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       【关键词】  决明子；,,决明子水提物；,,肝损伤；,,大鼠
       摘要：目的研究决明子水提物对D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法50只大鼠随机分为正常组、模型组、大剂量给药组、小剂量给药组、阳性对照组5个组。给药组按10，5 g/kg剂量；阳性对照组按0.2 g/kg联苯双酯灌胃；正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃，共5 d。第4天，模型组和给药组按0.5 g/kg剂量腹腔注射D-半乳糖，正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注射D-半乳糖24 h后，摘眼球取血，用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(AST)的活性，血清、线粒体超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果决明子水提物显著降低因D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清ALT的升高；对急性肝损伤大鼠血清SOD，GSH-PX的活性有明显的升高作用及降低MDA的含量。结论决明子水提物对D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤有保护作用。
       关键词：决明子；  决明子水提物；  肝损伤；  大鼠
       Protective Effects of Semen Cassiae Aqueous Extract on Acute Hepatic Injury Induced by D-galactoasmine in Rats
       JIN Xiangzi, JIN Zheng, CAI Yinglan
       (Basic Medical College of Yanbian University, Yanji, 133000, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the protective effects of Semen Cassiae aqueous extract on acute hepatic injury induced by D-galactoasmine in rats.Methods50 rats were randomly divided into nomal group, model group, low and high dosage group and Biphengldimethylesteratis group. In test group, the Semen Cassiae aqueous extract were perfused to be into stomach for 5 days. Qn the fourth day, the D-galactoasmine 0.5 g/kg were injected into peritoneum in test groups one time to induce the models of acute liver lesion. The activities of aspartate transaminase(AST) and alanine transaminase (ALT) were measured by full-automatic biochemical instrument, the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione perioxidase (GSH-PX), and the content malondialdehyde(MDA) were measured by colorimetric analysis.ResultsSemen Cassiae aqueous extract significantly reduced D-galactoasmine inducing acute hepatic injury by decreasing ALT and AST in serum; the activities of SOD, GSH-PX in test group were higher than that of model group in serum and liver mitochondria.ConclusionSemen Cassiae aqueous extract have protecting effects for rats acute hepatic injury by D-galactoasmine.
       Key words:Semen Cassiae;  Hepatic injury;  Rats
   
　　决明子Semen Cassiae是豆科植物决明子成熟干燥种子，处方名为草决明、生决明。决明子具有降血压、降血脂、导泻、抗菌、抗血小板聚集等多种作用［1~3］。本实验研究决明子水提物对D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用。
       　1  材料和方法
       1.1  材料
       1.1.1  药品及试剂取500 g生药材加入4 000 ml(8倍量)60％乙醇，放置1 h，在60℃水浴回流2 h，过滤，残渣加入3 000 ml(6倍量)60％ 乙醇60℃水浴回流2 h，合并滤液，用旋转蒸发仪回收溶剂，得粗粉59 g(每克粗粉相当于生药材8.5 g)。SOD，MDA，GSH-PX试剂盒购置南京建成生物工程研究所，联苯双酯由浙江温岭制药厂生产，批号980813，其他试剂均为国产分析纯。
       1.1.2  动物Wistar大鼠，雌雄各半，体重为180~200 g，由延边大学医学部动物科提供。
       1.2  方法取大鼠50只，随机分为正常组、模型组、大剂量给药组、小剂量给药组、阳性对照组组5个组。给药组按10，5 g/kg剂量，阳性对照组按0.2 g/kg联苯双酯灌胃，正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃，共5 d。第4天，模型组和给药组按0.5 g/kg剂量腹腔注射D-半乳糖，正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注射24 h后，摘眼球取血，分离血清。大鼠处死后，迅速取出肝脏，称取1.0 g放入置有冰冷的匀浆介质（pH=7.5，0.25 mol/L蔗糖，0.005 mol/L Tris-HCl，0.001 mol/L  EDTA）的玻璃匀浆器中，在冰浴中制成100 g/L匀浆，在2 000×g离心10min，取上清液，用低温超速离心机以16 000×g离心20 min，取其沉淀部分，即为线粒体。再加入匀浆介质（pH=7.5，0.25 mol/L蔗糖，0.005 mol/L Tris-HCl，0.001 mol/L EDTA）2 ml，用超声波打碎线粒体膜性结构，制成线粒体悬浮液。用全自动生化分析仪检测血清ALT，AST的活性，用比色分析法检测血清、线粒体SOD，GSH-PX的活性及MDA的含量。
       1.3  统计学处理数据以±s表示，应用SPSS10.0统计软件进行方差分析。
       　2  结果
       2.1  血清ALT，AST的影响决明子水提物明显降低D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清ALT，AST的升高（P<0.05或P<0.01）。结果见表1。
       表1  决明子水提物对D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清ALT，AST的影响（略）
       与模型组比较，*P<0.05,**P<0.01；n=10
       2.2  血清SOD，GSH-PX，MDA的影响决明子水提物明显升高D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清SOD，GSH-PX的活力（P<0.05），降低MDA的含量（P<0.05）。结果见表2。
       表2 决明子水提物对D-半乳糖所致急性肝损伤大鼠SOD，GSH-PX，MDA的影响（略）
       与模型组比较，*P<0.05；n=10
       　3  讨论
       一般认为D-半乳糖所致肝损伤是由于消耗提供尿苷合成的尿苷二磷酸及核糖核酸材料尿苷，导致糖原及RNA、蛋白质合成障碍，引起肝细胞坏死。近年来研究表明，肝损伤是多因素参与的复杂过程，自由基和脂质过氧化在肝损伤中起着十分重要的作用。D-半乳糖引起肝细胞内钙离子增多，镁离子减少，钙离子增多时抑制线粒体的呼吸功能，激活磷脂酶，分解膜磷脂，破坏溶酶体膜，使蛋白水解酶释放，并使黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶，加速氧自由基的产生，从而使损伤进一步加剧［4］。自由基是人体正常生化过程的中间产物，在机体正常及病理过程中都存在，同时机体在进化过程中获得了灭活氧自由基的一些酶，如SOD，GSH-PX等。 SOD，GSH-PX的变化可以间接地反应疾病情况下自由基的变化。SOD为高效的清道夫，可抑制自由基启动的脂质过氧化,GSH-PX是重要的催化过氧化氢分解的酶,它特异地催化还原性GSH对过氧化氢的还原反应,从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作用。 MDA是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜的结构，导致细胞肿胀、坏死，其含量反映了组织过氧化的损伤程度。因此，只有当自由基产生过多或者机体内的酶系统过少时才导致疾病。氧自由基可促使不饱和脂肪自由基形成，脂质自由基可引起细胞膜的流动性、通透性和完整性的破坏，进而使其双层结构发生断裂，引起膜镶嵌的一系列酶的排列紊乱，功能丧失，细胞的能量产生系统瘫痪。本实验结果表明，决明子水提物对D-半乳糖所致大鼠血清ALT，AST的升高有明显降低作用，给药组大鼠血清SOD，GSH-PX较模型组显著升高，而MDA含量显著降低，这说明决明子水提物的保肝机制与其对抗自由基脂质过氧化密切相关。
       参考文献：
       ［1］  钟先锋，邓泽元，黄桂东.决明子用效成分的提取［J］.南昌大学学报，2004，28(1)：96.
       ［2］  王根生，韩哲武.甘草类黄酮对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响［J］.药学学报，1993，28(8)：572.
       ［3］  李素婷，杨鹤梅，石艳华，等.黄芩茎叶总黄酮保肝作用的实验研究［J］.中国中医药信息杂志，2004，11(7)：593.
       ［4］  徐  萍，刘华屏.常用急性肝损伤动物模型［J］.中国病理生理杂志，1995，11（4）：447.
       (延边大学基础医学院，吉林 延吉  133000)