文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【关键词】  秦皮；,,急性肝损伤；,,保护作用
       摘要：目的研究秦皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组，模型对照组，阳性对照组，大中小剂量给药组。大中小剂量给药组分别按2.0，1.0，0.5 g/kg灌胃秦皮提取物；阳性对照组按0.1 g/kg灌胃水飞蓟宾；正常对照组和模型对照组以等体积生理盐水灌胃，共6 d。第5天，模型对照组、阳性对照组和给药组按2.0 ml/kg腹腔注射CCl4，正常对照组腹腔注射等体积生理盐水。比较各组丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。结果秦皮提取物能显著降低四氯化碳所致小鼠各组ALT含量的升高(P ＜ 0.05)，同时能升高SOD的活性, 降低MDA的含量(P ＜ 0.05)。结论 秦皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。
       关键词：秦皮；  急性肝损伤；  保护作用
       Protective Effect of Ash Bark Extract Against Acute Liver Injury in Mice
       YIN Minghao,  L Huizi, JIANG Lijun,JIN Chunhe, LI Gao*
       (College of Traditional Chinese Medicine, Yanbian University, Yanji 133000, China; College of Pharmacy, Yanbian University, Yanji 133000, China; Key Laboratory of Natural Resources of the Changbai Mountain and Functional Molecules, Yanbian University, Yanji 133002, China)
       Abstract：ObjectiveTo investigate the protective effect of ash bark extract against carbon tetrachloride inducing acute liver injury in mice. MethodsSixty male mice were randomly divided into normal control group, model control group, positive control group, high-dosage group, middledosage group and lowdosage group. The mice in the above groups were fed for 6 days. The drug groups were pretreated intragastrically with 2.0，1.0，0.5 g/kg ash bark extract, positive control group was pretreated intragastrically with 0.1 g/kg silybin. Control mice were given the same volume physiological saline. On the 5th day of feeding, the mice except normal control group were given intraperitoneally 2.0 ml/kg carbon tetrachloride. Twenty four hours after the intoxication, the serum ALT, SOD activities and MDA content were measured in each group above. ResultsAsh bark extract significantly decreased carbon tetrachloride inducing acute hepatic injury with increasing the activity of ALT and the content of MDA, increased the activity of SOD in serum. ConclusionIt is revealed that ash bark extract can prevent the CCl4 from inducing acute liver injury in mice through its antioxidation.
       Key words：Ash bark extract;  Liver injury;  Protective effect
   
　　秦皮是木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance的干燥枝皮，主要具有清热燥湿、收敛、明目之功效，用于热痢、泄泻、赤白带下、目赤肿痛等［1］。通过体外筛选秦皮提取物的清除DPPH（二苯代苦味酰自由基）自由基的能力强（浓度50 mg/ml时，清除率为66.8%），本实验进一步研究秦皮提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用，并对其作用机理进行了初步探讨。
       　1   材料与方法
       1.1  材料 秦皮采自吉林省长白山一带，经延边大学药学院刘永镇教授鉴定为真品。1 kg白芷切碎后，用70%甲醇回流提取3次，1 h/次，温度50℃，合并3次滤液，减压浓缩，得白芷浸膏210 g。
       1.2  试剂与仪器 飞蓟宾购自西安华萃生物技术有限责任公司，丙氨酸氨基转移酶(ALT)超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，其他试剂均为国产分析纯。使用的仪器有小型离心机 (Sigma 113)，722型分光光度计（中国厦门分析仪器厂）和生化分析仪(SPOTCHEME 2, SP4430)等。
       1.3  动物分组 昆明种雄性小鼠60只，体重（20±2） g，由延边大学医学部动物科提供。按随机表法将其分为正常对照组，模型对照组，阳性对照组，大、中、小剂量给药组，每组各10只。
       1.4   给药方法 大中小剂量给药组分别按2.0，1.0，0.5 g/kg灌胃秦皮醇提取物；阳性对照组按0.1 g/kg灌胃水飞蓟宾；正常对照组和模型对照组以等体积生理盐水灌胃，2次/d, 连续6 d，末次给药后1 h, 除正常对照组外，其余均腹腔注射0.1% CCl4 花生油溶液2.0 ml/kg，禁食，不禁水。24 h后摘眼球取血，分离血清。取血后脱颈椎处死，剖腹，取出肝，分别称重取出0.1 g，加入0.9 ml生理盐水进行匀浆。
       1.5  生化检测  按试剂盒说明测定ALT，SOD活性和MDA含量。
       1.6  统计学处理 数据以均数±标准差表示，各组样本均数间差别的假设检验用方差分析(ANOVA), P＜0.05认为有统计学意义。
       　2  结果
       2.1  秦皮提取物对CCl4引起小鼠急性肝损伤血清ALT活性的影响结果见表1。模型组ALT较正常组明显升高，有显著性差异 (P＜ 0.01)，表明CCl4引起造模成功。大中小剂量给药组与模型组比较P＜ 0.05，说明秦皮提取物显著降低CCl4引起急性肝损伤小鼠血清ALT含量的升高。
       2.2  秦皮提取物对CCl4引起小鼠急性肝损伤SOD活性和MDA含量的影响结果见表1。大、中剂量给药组与模型组比较均P＜ 0.05，SOD活性在中剂量时升高(P＜0.05)，说明秦皮醇提取物能升高CCl4引起急性肝损伤小鼠肝组织SOD活性，同时降低小鼠肝组织MDA的含量。
       表1  秦皮提取物对CCl4引起小鼠急性肝损伤ALT，SOD活性和MDA含量的影响（略）
       与模型对照组比较， *P＜ 0.05， **P ＜0.01
       　3  讨论
       肝损伤是由多种病因引起并且可以有多种因素参与的复杂过程［2］。四氯化碳引起肝损伤是传统的肝毒模型，它对肝损伤的毒性作用是通过脂质过氧化作用进行的。CCl4在肝微粒体细胞色素P-450酶激活下产生活性自由基CCl3 ・，CCl3 ・可进一步与氧反应，形成具有更强反应活性的CCl3Oˉ，这些自由基与肝细胞内大分子发生共价结合，也可攻击肝细胞膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，损伤肝细胞膜的结构和功能，使膜通透性升高，导致细胞肿胀坏死［3］。存在于肝细胞质中的可溶性酶AST，ALT在肝细胞损伤后释放入血，血清中两者水平高低可以反应肝细胞损伤程度，可作为早期肝损伤的指标。本实验结果显示模型对照组ALT活性显著高于正常对照组，表明急性肝损伤模型成功（P＜ 0.01）。秦皮提取物显著降低CCl4所致小鼠急性肝损伤血清ALT的升高（P＜ 0.05），表明药物具有一定的肝保护作用。MDA是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、坏死，含量高低可反应氧化的损伤程度［3，4］，大、中剂量给药组降低急性肝损伤小鼠血清MDA含量（P＜0.05）。自由基是人体正常生化过程的中间产物。只有当自由基产生过多或者机体内的酶系统过少时才导致疾病，这其中主要有氧自由基和脂质自由基。SOD是细胞内主要的防御性抗氧化酶，能够清除自由基，并可抑制自由基启动的脂质过氧化反应，从而起到保护细胞膜结构与功能的完整作用。秦皮提取物对此有一定的改善作用，说明秦皮提取物可能通过保护细胞膜，清除氧自由基抑制脂质过氧化而对肝细胞起到保护作用。
       参考文献：
       ［1］  中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典中药彩色图集, 1995年版［M］.广州：广东科技出版社, 1996：352.
       ［2］  Weisburger JH. Mechanisms of action of antioxidants as exemplified in vegetables tomato and tea ［J］.Food Chem Toxic，1999，37（9）：943.
       ［3］  林冬静，金  政. 决明子提取物对急性肝损伤保护作用的实验研究［J］.时珍国医国药, 2006，17(2)： 214.
       ［4］  张学武，朴  龙，姜逢春，等. 珍珠梅水提物对大鼠肝损伤的保护作用 ［J］.世界华人消化杂志, 2003, 11(10)： 1497.
       (延边大学中医学院, 吉林 延吉  133000;  延边大学药学院，吉林 延吉  133000; 长白山天然资源和功能分子省部共建教育部重点实验室，延边大学, 吉林 延吉  133002)