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       【关键词】  头顶一颗株；,,学习；,,记忆；,,,抗氧化酶；,,超氧化物歧化酶；,,谷胱甘肽过氧化物酶
       摘要：目的观察头顶一颗株注射液对快速老化大鼠学习记忆能力及血、肝、肾、海马、脑皮质抗氧化酶的影响。方法采用氟哌啶醇造成实验大鼠获得性记忆缺失动物模型，用电跳台法观察对照组、模型组、头顶一颗株注射液高、中、低剂量组大鼠行为学变化，测定各组大鼠血及肝、肾、海马、脑皮质等组织超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果与模型组比较头顶一颗株注射液各剂量组能维持实验大鼠学习记忆成绩，多种组织SOD，GSH-Px 显著升高，高、中剂量组作用尤其明显(P<0.01)。结论头顶一颗株能够改善氟哌啶醇致快速老化大鼠学习记忆能力，其作用与增强抗氧化酶的表达有关。
       关键词：头顶一颗株；  学习；  记忆；   抗氧化酶；  超氧化物歧化酶；  谷胱甘肽过氧化物酶
       Effects of Trillium tschonoskii Maxim on Learning and Memory and Anti-oxidase in Rats 
       AI Mingxian   
       （Medical School of Hubei Nationality College, Enshi Hubei 445000, China）
       Abstract：ObjectiveTo study the effect of Trillium tschonoskii Maxim injection on the learning and memory and on the expression of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in serum, liver, kidney, hippocampus, cortex of aging rats.MethodsRats were randomly divided into five groups, control group, model group, Trillium tschonoskii maxim injection small dose group, middle dose group and large dose group. Rat model of acquired memory deficiency induced with haloperidol was employed. Electricity stimulated jumping stand was used for observation on rat behavior change and meanwhile concentrations of SOD and GSH-Px in different organs of the animal were detected.ResultsIn contrast with model groups, Trillium tschonoskii maxim injection at different dosage could maintain learning and memory, significantly increase the concentrations of SOD and GSH-Px in different tissue of the rats.(P<0.01;P<0.05).ConclusionTrillium tschonoskii Maxim can improve learning and memory，and the effects were associated with enhancement of anti-oxidase expression.
       Key words：Trillium tschonoskii Maxim;  Learning；  Memory；  Anti-oxidase；  Superoxid dismutase;  Glutathione peroxidase
   
　　头顶一颗株又称延龄草Trillium tschonoskii Maxim，为百合科延龄草属植物，以根入药,含有薯蓣皂素、甾醇、甾酮等化学成分，具有镇静、止痛、止血作用，主要用于治疗眩晕头痛、神经衰弱、跌打损伤、月经不调、崩漏等疾病［1］。 现代医学研究认为，中枢神经系统功能退行性病变是人体衰老的关键，并与代谢产生的氧自由基（oxygen free radicals）慢性损伤或抗氧化酶不足密切相关。本实验用头顶一颗株注射液腹腔注射，通过对各组大鼠行为学观察和组织SOD，GSH-Px含量测定，探讨头顶一颗株注射液对大鼠学习记忆能力及抗氧化酶的影响，从而进一步探讨其改善中枢神经系统功能抗衰老作用机制。
       1  材料与方法
       1.1  头顶一颗株注射液制备头顶一颗株由恩施中药材生产GAP（质量管理规范）示范基地提供，采用水提醇沉法制成含生药30%的注射液，瓶装密封消毒备用。
       1.2  药品与仪器氟哌啶醇注射液(湖南洞庭药业股份有限公司生产)， SOD、GSH-Px试剂盒（由南京建成生物工程研究所提供），回避反应箱（由华中科技大学同济医学院病理生理系提供），GL-20G II型高速低温离心机，UV-2450分光光度仪，水浴箱。
       1.3  电跳台行为学训练及测试实验装置为30 cm×30 cm回避反应箱，箱底为铜栅，可通刺激电流。另有一高5 cm，顶端直径为5 cm的橡胶圆台作为避电击平台，固定放置在箱内一角的铜栅上，大鼠可在圆台上停留以回避电击。实验开始时，先将大鼠轻放于回避反应箱内，使其适应3~5 min，以消除探究反应。尔后底部铜栅通电（36  V）2 s，大鼠在受电击刺激中逐渐学会跳上平台回避电击。多数大鼠可能再次或多次跳至铜栅上，受到电击后又重新跳回平台，如此训练3 min，并记录每只鼠受电击数或犯错次数，以此作为学习成绩。末次给药后,再测试行为学改变,记录3 min各鼠跳下平台的错误次数和第一次跳下平台的潜伏期。
       1.4  动物分组与用药雄性Wistar大鼠50只，鼠龄40~50周，体重300~350 g，由华中科技大学同济医学院动物中心提供。随机分为对照组、模型组、头顶一颗株高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组10 只。模型组按1 g/kg体重腹腔注射氟哌啶醇注射液，头顶一颗株高、中、低剂量组分别在注射氟哌啶醇的同时，按7.2，3.6，1.8 g/kg体重腹腔注射头顶一颗株注射液，对照组每天等量腹腔注射生理盐水，Bid，连续用药7 d。
       1.5  组织SOD，GSH-Px测定行为学测试结束后断颈处死大鼠,迅速取血及各种组织，血液离心取血清，组织制成10%匀浆，备用。SOD，GSH-Px测定，按试剂盒说明书进行，蛋白定量采用双缩脲法测定。
       1.6  统计方法所有结果都用SPSS统计软件进行处理，计量资料用±s表示，在对数据进行分析的过程中，发现个别数据不符合ANOVA比较的要求，而用非参数进行比较分析。
       　2  结果
       2.1  头顶一颗株对大鼠学习记忆能力的影响  电跳台行为学测试结果显示，头顶一颗株各剂量组与模型组比较均能延长实验大鼠的跳台潜伏时间,减少3 min犯错次数, 高、中剂量尤其明显(P<0.01)，提示头顶一颗株能维持实验大鼠学习记忆能力。结果见表1。
       2.2  头顶一颗株对大鼠血及组织SOD，GSH-Px影响从表2和表3可见：头顶一颗株注射液各剂量组与模型组比较均能提高血液、海马、脑皮质及肝肾SOD，GSH-Px表达值，高、中剂量组作用明显(P<0.01)。
       表1  头顶一颗株对大鼠学习记忆能力的影响（略）
       与模型组比较，*P<0.01,**P<0.05；n=10
       表2  头顶一颗株对大鼠血及组织SOD的影响（略）
       与模型组比较，*P<0.01，**P<0.05；n=10
       表2  头顶一颗株对大鼠血及组织GSH-Px的影响 （略）
       与模型组比较，*P<0.01，**P<0.05；n=10
       3  讨论
       衰老（Senility）是人体一种全身性生理变化过程，各系统、器官、组织和细胞都会出现这种过程，其机制复杂，并与多种因素有关。Lustbader等研究发现,阿尔茨海默病的发病机制与氧化应激有关,氧化应激通过氧自由基损伤神经元细胞,促进神经元细胞凋亡或死亡,引起神经系统功能减退［2］。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶系，普遍存在于人体各组织中，包括血液、肝脏、线粒体和细胞质，有对抗自由基损伤和清除氧自由基、降低细胞内H2O2水平、减少自由基和过氧化物蓄积的作用。氧自由基被SOD转变为H2O2后，GSH-Px可继续作用在H2O2上，使之转变成完全无害的水和氧。因此SOD，GSH-Px表达变化，已成为检测衰老因素最为敏感和可靠的指标［3］。已有实验研究报道，根据氟哌啶醇可使实验动物产生僵住症(强直性昏厥，catalepsy)的原理，用氟哌啶醇进行大鼠腹腔注射，对SOD和GSH-Px有抑制作用，是很好的动物老化造模剂［4］。本实验用氟哌啶醇造模,观察、探讨头顶一颗株对大鼠行为学变化及在不同组织对SOD，GSH-Px表达作用的影响,结果表明：头顶一颗株能维持实验大鼠学习记忆能力，显著提高实验大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质SOD，GSH-Px表达量，具有上调抗氧化酶表达、改善记忆抗衰老作用。
       参考文献：
       ［1］  谢宗万，范崔生，朱兆仪，等. 全国中草药汇编，第2版［M］.北京：人民卫生出版社，1996：225.
       ［2］  Lustbader JW, Cirilli M, Lin C, et al. ABAD directly links Abeta to mitochondrialtoxicity in Alzheimer"s disease［J］. Science,2004,304(5669):448.
       ［3］  Moorthy K, Sharma D, Basir SF, Baquer NZ Administration of estradiol and progesterone modulate the activities of antioxidant enzyme and aminotransferases in naturally menopausal rats［J］. Exp Gerontol. 2005，40(4):295.
       ［4］  黄丽亚，叶  嗣.党参注射液上调抗氧化酶表达作用的实验研究［J］.中国老年学杂志，2006，1：70.
       (湖北民族学院医学院，湖北 恩施  445000)