渗漉法提取枳壳的工艺研究
作者：胡钢银，史馨霞，吴光翠
《时珍国医国药》 2007年 第3期
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【关键词】 正交实验；,,渗漉法；,,提取；,,枳壳；,,柚皮苷
摘要：目的考查不同条件下用渗漉法提取枳壳浸膏的质量。方法用正交实验设计，以浸泡时间、渗漉速度、收集渗漉液体积和乙醇浓度为因素，以高效液相色谱法测定浸膏中柚皮苷含量为指标优化提取工艺。结果枳壳的最佳提取工艺为70%乙醇浸泡24 h渗漉速度为5 ml・kg-1・min-1，收集8倍的渗漉液。结论 用渗漉法提取枳壳中柚皮苷工艺稳定可行。
关键词：正交实验； 渗漉法； 提取； 枳壳； 柚皮苷
枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具有理气宽中、行滞消胀功效［1］。枳壳中主要含有黄酮类、挥发油及少量生物碱3大类成分，共同构成了枳壳的化学特征。其中黄酮类成分主要有柚皮苷、橙皮苷、酸橙素、苦橙素等［2］。为了考查不同条件下渗漉法提取枳壳的浸膏的质量，本文以柚皮苷为指标对提取工艺进行优化。
1 器材
1.1 仪器SSI SERIES IV pump高效液相色谱仪（美国科学系统公司）；Mettler AE240型电子分析天平（上海海鸿仪器有限公司）；SB3200超声波振荡仪（上海必能信超声有限公司）。
1.2 材料与试剂柚皮苷对照品购于中国生物制品厂。乙腈为色谱纯，冰醋酸和甲醇为分析纯，乙醇为药用乙醇。枳壳来自本院中药房，为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.的干燥未成熟果实。并经麸皮制，过筛后粉成粗粉备用。
2 方法与结果
2.1 正交实验设计实验选择四个因素分别为：浸泡时间、渗漉速度、收集渗漉液体积、乙醇浓度。以三水平L9（34）正交表安排实验。
2.2 提取方法取枳壳粗粉100 g，用不同浓度乙醇浸泡不同时间，进行渗漉，收集渗漉液，减压浓缩干燥，得干浸膏。
2.3 含量测定方法
2.3.1 色谱分析条件色谱柱为迪马C18柱（4.6 mm×20 mm×5 μm），流动相为乙腈-0.2%冰醋酸（20∶80），检测波长283 nm，流速1.0 ml/min，进样量为20 μl。
2.3.2 标准曲线的制备精密称取柚皮苷10 mg于50 ml容量瓶中，用甲醇加至刻度，摇匀。分别取1，2，3，4，5 ml于10 ml容量瓶中用甲醇加至刻度，摇匀。进样20 μl，以柚皮苷浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归方程为：Y=0.184X-0.823，r=0.999，线性范围为：0.2~1 mg/ml。
表1 因素与水平（略）
2.3.3 样品的测定取样品0.5 g精密称定，置100 ml容量瓶中，加甲醇80 ml，超声30 min放至室温，加甲醇至刻度，摇匀。取20 μl注入高效液相色谱仪，记录峰面积，用外标法计算柚皮苷含量。结果见表2。
表2 枳壳渗漉工艺正交实验结果（略）
2.3.4 正交实验结果由表2极差值和表3的方差分析结果表明在四个因素中，对柚皮苷提取率影响程度依次为：A＞C＞D＞B。最佳提取的组合为A2B1C3D2，即取枳壳粗粉用70%乙醇浸泡24 h，进行渗漉。渗漉速度为5 ml/（kg・min），收集10倍渗漉液。
2.3.5 渗漉工艺的验证实验取枳壳粗粉100 g两份，分别按照最佳渗漉工艺进行实验，将渗漉液减压干燥。按2.3.3方法测定柚皮苷的含量。结果见表4。
表3 枳壳渗漉工艺方差分析（略）
表4 枳壳渗漉工艺验证实验结果（略）
结果表明，枳壳粗粉用70%乙醇浸泡24 h，进行渗漉。渗漉速度为5 ml/(kg・min)，收集10倍渗漉液。此工艺稳定可行。
3 讨论
3.1 由表2极差值和表3的方差分析结果表明在4个因素中，浸泡时间和收集渗液体积对柚皮苷提取率影响较大。在浸泡时间A因素中A2＞A3＞A1，故选A2，因素渗漉速度B对实验结果无显著影响，为加快提取速度选择B1。对于因素乙醇浓度D因为D2＞D3＞D1，故选择D2。
3.2 在因素收集渗漉液体积C中C3＞C2＞C1，应选C3，但实地生产中，从成效比方面考虑选择收集8倍渗漉液。
参考文献：
［1］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005.
［2］ 潘隽丽，杨 平，苏薇薇.枳壳类药材的研究概况［J］.中草药，2003，2（10）：768.
(新疆生产建设兵团农七师医院，新疆 奎屯 833200； 新疆奎屯市药品检验所 833200)