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       【摘要】 
       目的研究补肾养经汤对雌性去势大鼠子宫形态学的影响。方法将60只3月龄大鼠饲养2周后，随机取50只摘除双侧卵巢，余10只行假手术。50只去势大鼠随机分为5组；模型空白组、补肾养经汤高、中、低剂量组、六味地黄丸组，观察各组用药后子宫形态的变化。结果补肾养经汤能够显著增加去势大鼠子宫重量，使去势大鼠子宫内膜明显增厚，并能明显增加子宫内腺体数目及血管分布。结论 补肾养经汤可能直接作用子宫，改善子宫内膜的状态，从而缓解子宫萎缩的作用。
       【关键词】  补肾养经汤 去势大鼠 子宫形态学
       The Effect of BushenyangJing Decoction on the Endometrial of Female Castrate Rats
       ZHONG Xuemei,WANG Hui,WU Yufei,QIN Dalian
       1.The Affiliated Hospital of Luzhou Medical College,Luzhou,Sichuan 646000,China; 
       2.Luzhou Medical College Luzhou,Sichuan 646000,China
       Abstract：ObjectiveTo study the effect of BushenyangJing decoction on the endometrial of female castrate rats.Methods60 female SD rats of 3 months old were fed two weeks.Then 50 rats were selected randomly and removed their ovaries,and 10 rats remained were sham operated.50 rats were divided randomly into five groups:model group,high dose group of BuShen YangJing decoction,middle dose group of BuShen YangJing decoction,low dose group of BuShenYangJing decoction,and LiuWeiDiHuang Bill group .Every group was carried out corresponding treatment.By removing uterus,histological morphology of each layers of uterus were observed of endometrial.ResultsBuShenYangJing decoction increased the uterus index.Thickness of endometrial became thicker,and the number of glandules became higher than that of model group.ConclusionBuShenJing decoction can probably act directly on the endometrial ,by regulating the endometrial formation,and delay the atrophy of uterus in ovariectomized rats.
       Key words：Bushenyingjingsoup;  Castrated rat;  Histomorphology
        卵巢早衰（POF）一般认为是40岁以前卵巢功能丧失，以闭经为主要临床表现，并伴有血清雌二醇水平下降和促进腺激素水平上升，是当今生殖医学和生殖健康研究的热点和难点。我们在观察补肾养经汤对卵巢早衰治疗作用［1，2］的基础上，进行了该方对雌性去势大鼠子宫形态学影响的实验研究。现将结果报道如下。
       1  材料与方法
       1.1  动物及条件健康SD雌性大鼠，3月龄，体重（200±30）g，60只，由泸州医学院实验动物中心提供，二级实验室。
       1.2  药品与仪器补肾养经汤，由覆盆子、女贞子、紫河车、当归、黄芪等组成的中药复方。由泸州医学院附属医院中药熬药房制备。批号20051120，浓度为1.5 g生药/ml；六味地黄丸，由吉林通化震林药业有限责任公司生产；批准文号：国药准字Z22023191；BZYI50 k型自动煎药包装机为中韩合资天津三延精密机械有限公司产品。
       1.3  模型建立连续观察大鼠阴道脱落细胞变化两周，均有正常动情周期后开始本实验。从60只大鼠中随机留取10只作为假手术空白组做假手术：常规处理后，开腹并寻找到卵巢组织，取仰卧位固定于手术板上，剪去腹部被毛，消毒术区皮肤，沿下腹正中做纵行切口约2 cm，暴露卵巢及子宫角，行双侧子宫角结扎，剥离并剪除卵巢，缝合切口并消毒。术后每只大鼠予青霉素20万单位肌肉注射1次。术后1周，开始连续观察各组大鼠阴道脱落细胞角化指数（CD）的变化，1次/d，连续5 d。以CI＜50%定为性周期消失，即造模成功。假手术空白组以出现规律的动情期和动情期变化者为符合实验要求。手术次日假手术组大鼠死亡1只，去势大鼠均健康。
       1.4  分组及给药将去势后大鼠50只随机分为5组，即去势空白组、六味地黄丸组、补肾养经汤高、中、低剂量组，每组10只；另外9只行假手术的为假手术组。各组分别标记。给药剂量与方法：①假手术及去势空白组：予生理盐水1 ml/100 g体重；②六味地黄丸组：配制浓度为1.44 g/ml混悬液，按1 ml/100 g体重灌胃；③补肾养经汤低、中、高剂量组；分别按每100 g体重0.375，0.75， 1.5 g给药。各组均为灌胃给药，1次/d，连续30 d。
       1.5  子宫的采集大鼠心脏取血后，立即剪开腹腔。寻找子宫，剥离周围脂肪组织，于宫颈上方完整剪下子宫体。滤纸稍拭后，电子分析天平称出湿重，分组标号并浸入10%福尔马林液中固定。子宫重量法：将子宫湿重换算为子宫指数：子宫指数=子宫湿重（g）/体重（g）×100%；大鼠子宫HE染色标本制备：固定脱水和石腊包埋切片染色封片。
       1.6  资料统计与处理所有数据均采用SPSS11.5统计软件进行处理，用均数±标准差表示。进行方差齐性检验后，定量指标用方差分析，组间比较采用LSD，S-N-K分析。
       2  结果
       2.1  子宫重量水平的变化及补肾养经汤对其的影响见表1及图1。表1  补肾养经汤对去势大鼠子宫重量的影响(略)
        由表1可见，去势后大鼠子宫明显萎缩，低剂量补肾养经汤能够显著增加去势大鼠子宫重量（P＜0.05），与六味地黄丸作用相当（P＞0.05）。
       2.2  子宫形态学变化及补肾养经汤的影响见表2及图1～4。由表2可知，与假手术组比较，去势空白组大鼠子宫内膜明显萎缩，经比较有显著性差异（P= 0.009）。经补肾养经汤治疗后，各组内膜厚度、子宫壁厚度、腺体数目均有明显增加，与去势空白组比较有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）；与六味地黄丸组比较，差异不明显（P＞0.05）。表2  补肾养经汤对子宫组织形态学的影响(略)
       3  讨论
        子宫是性激素的靶器宫，性激素作用于子宫可使其蛋白质合成增加、血管扩张、通透性发生改变，子宫对水的摄取量增加，故可以用子宫指数来判断性激素效应［3］。子宫上存在多种激素和肽类的受体，它们的变化会引起子宫形态和功能的改变。本实验结果表明，补肾养经汤能够较明显地提高去势大鼠子宫指数，并增加去势大鼠子宫中腺体及血管数量，使子宫内膜、肌层增厚，纤维结缔组织减少。由此推测药物可能直接作用于子宫。促进大鼠子宫生发上皮生长，提高细胞、腺体和血管数目，使纤维结缔组织减少，改善子宫内膜状态，缓解子宫萎缩。表明该方剂具有一定的营养子宫并改善其功能的作用，且其作用优于六味地黄丸。方中覆盆子补肾益精；紫河车为血肉有情之品，益精，补气，养血。两药共起泌精滋肾之协同作用。《药性论》言覆盆子令“女子食之有子”。因女子以肝为先天，肾为月经孕育之本，只有肝血充足，肾精旺盛，血海满盈，才能阴充阳长，而摄精成孕。在本方剂的基础上酌情加入黄芪、当归等益气养血之品。黄芪补脾肺之气，资生血之源，与当归合用，养血和营，则阳生阴长，气血两旺。全方共同发挥补肾养血之功。现代药理研究表明，覆盆子等［4］补肾中药具有类雌激素样作用；当归可使子宫DNA含量和子宫利用葡萄糖能力增加［5］，说明当归可促进蛋白质的合成及子宫增生。有实验证明补肾中药能提高垂体的反应性和调节卵巢内激素水平，对性腺轴的各个环节均有一定的调整作用［6］。我们推测，补肾养经汤的作用可能不是简单的雌激素代替或单因素干预，它促进内分泌系统整体功能的改善，可能是一种多层次、多环节、多途径的综合反应，其机理正在进一步研究中。
        
       【参考文献】
         　　［1］李宗恒，钟雪梅，代嘉得.雌孕激素顺序法与补经汤治疗卵巢早衰的比较观察［J］.中国中医药科技，2002，9（3）：170.
       
       ［2］钟雪梅，代嘉莉，李宗恒.补肾养经汤合人工周期法治疗卵巢早衰38例临床观察［J］.江苏中医药，2005，26（8）：21 .
       
       ［3］李仪奎.中药药理实验方法学，第1版［M］.上海：上海科学技术出版社，1991：224.
       
       ［4］江苏新医学院.中药大辞典，第1版［M］.上海：上海科学技术出版社，1986：2698.
       
       ［5］吴梧桐，高向东.当归及其成分阿魏酸对小鼠脾淋巴细胞的作用［J］.中国药科大学学报，1989，20（4）：219.
       
       ［6］许 昕，腾秀香，佟 庆.补肾养血养经法治疗有卵泡型卵巢早衰［J］.北京中医，2001，20（4）：21.