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超声散血净透入对家兔玻璃体积血的实验研究
作者:赵会军    
作者单位:河南科技大学医学院,河南 洛阳 471003;

《时珍国医国药》 2007年 第6期

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       【摘要】 
       目的探讨超声散血净对家兔实验性玻璃体积血的作用。 方法用家兔自体动脉血造成玻璃体积血模型,随机分成散血净治疗组、尿激酶治疗组、不作治疗的对照组。30 d后观察各组眼底可见度、玻璃体蛋白浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性和巨噬细胞计数及吞噬率。结果散血净治疗组眼底可见度的恢复较其它组快,蛋白浓度明显下降,SOD活性增强,巨噬细胞计数高于其它组。 结论 超声散血净能促进玻璃体积血的吸收。
       【关键词】  超声透入 散血净 玻璃体积血
       Study on the Therapeutic Effects of Traditional Chinese Medicine Sanxuejing Phonophoresis on Experimental Vitreous Hemorrhage of Rabbits
       ZHAO Huijun, YAN Junbao,JIANG Lilei, ZHANG Yanli
       1.Medical College of Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003 China;
       2. Department of Ophthalmol,The First Affiliated Hospital of Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China
       Abstract:ObjectiveTo explore the therapeutic effects of traditional Chinese medicine Sanxuejing phonophoresis on experimental vitreous hemorrhage of rabbits .MethodsThe models of vitreous hemorrhage of rabbit eye were developed with autoblood, and randomly divided into the treated group with traditional Chinese medicine Sanxuejing,treated group with urokinase, untreated group. After the rabbits had been fed and administrated for 30 days, eye bottom visibility,  protein concentration and the activity of superoxide dismutase,the number of macrophage and the phageocytosis rate in each group were observed.ResultsThe rabbits of traditional Chinese medicine Sanxuejing group was better in restore of eye bottom visibility  than the other groups,and the  protein concentration was lower, the number of macrophage was higher. ConclusionTtraditional Chinese medicine Sanxuejing phonophoresis can promote the absorbtion of vitreous hemorrhage.
       Key words:Phonophoresis;   Sanxuejing;  Vitreous hemorrhage
        玻璃体积血是眼科常见病,玻璃体周围组织发生外伤、炎症、肿瘤,特别是视网膜破裂及血液病等,均可发生玻璃体积血。目前主要用止血、抗凝、激光及玻璃体切割等方法治疗。为了寻找玻璃体积血吸收疗效显著且副作用少、简便实用的方法和药物。我们自200306~200507采用超声透入散血净方法进行了动物实验。现报道如下。
       1  材料与方法
       1.1  材料
       选择健康无眼病日本大白兔36只,体重2.0~3.0 kg,雌雄不拘。由河南科技大学动物中心提供。
        仪器采用洛阳无线电厂生产742型超声波治疗机。工作频率800 KC,声强输出0.5~2.5 W/cm2,声头直径36 mm,工作状态“脉冲”和“连续”。
        药物用自拟方散血净,由桃仁、红花、川芎、赤芍、丹参、水蛭、牛膝、桔梗等中药组成。将上述中药用蒸馏水浸泡2 h后,煮沸30 min,用6层干净纱布过滤后装入容器备用。
        
       1.2  方法
        
       1.2.1  动物造模及分组
       36只兔子术前直接检眼镜检查双眼无病,身体健康。造模前给予0.25%氯霉素滴眼消炎,2滴/次,2次/d,1%阿托品扩大瞳孔,1次/d,连滴3 d。造模时,用1%地卡因表面麻醉。消毒后取兔耳缘动脉血0.4 ml备用,用8号针头在睫状体扁平部1.00距角膜缘5 mm处,经瞳孔直视下垂直刺入玻璃体腔中,抽取玻璃体0.2 ml,立即注入自血0.2 ml,拔出针头,轻压针孔1 min,点0.25%氯霉素2滴。36只兔子随机分为3组,散血净组(治疗组),尿激酶组(对照组),单纯造模组(空白组)。每组12只,均于右眼造模,左眼供眼底观察对照用。
        术后24 h后,直接检眼镜检查造模情况,开始给药。空白组不作特别处理,对照组每天耳缘静脉注射尿激酶1次,用量1000 U/kg;治疗组用散血净超声透入治疗。
        
       1.2.2  透入方法
       将兔子背位固定在手术台上,右眼朝上,左眼下方垫多层纱布。采用眼部浴杯法,用特制的眼杯置于右眼眶周。取散血净15 ml注入眼杯内,将超声波治疗机声头经碘伏消毒、生理盐水冲洗后放进眼杯内。声头治疗面完全淹没在药液内,之间不能有空气。治疗者左手持眼杯和声头,勿压眼球,右手托住兔嘴及下颌,使其保持治疗位置。治疗1次/d,15~20 min/次。超声波输出强度0.5 W/cm2,脉冲状态。
        
       1.3  观察指标和测定方法
        
       1.3.1  玻璃体积血观察
       眼底检查 用直接检眼镜,按Forrester5级分类法[1]观察记录。Ⅰ级:玻璃体完全不透明;Ⅱ级:有微光反射,但眼底观察不清;Ⅲ级:经玻璃体间隙可见部分眼底;Ⅳ级:玻璃体中央透明,周围见少量不透明物,大部分眼底清楚;Ⅴ级:清晰玻璃体,眼底清楚可见。
        
       1.3.2  SOD活性和蛋白浓度的测定30 d后抽取玻璃体0.2 ml,加入生理盐水,用3000 r/min离心10 min,取上清液用754-紫外分光光度仪进行测定。
        
       1.3.3  巨噬细胞计数及吞噬率
       10%福尔马林固定眼球分别在2:00~10:00,3:00~9:00,4:00~8:00三个水平面上作病理切片,计数巨噬细胞及吞噬率。
       1.4  统计分析
       统计分析采用SPSS11.0软件,进行卡方检验和T检验,P<0.05  为差异有统计学意义。
       2  结果
        眼底可见度比较,30 d后,散血净组眼底可见度与尿激酶组和不作治疗组之间差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01 )。结果见表1。表1  治疗30 d后各组兔玻璃体积血程度分级比较(略)
        巨噬细胞计数及吞噬率比较 :30 d后散血净组巨噬细胞与尿激酶组和不治疗组之间差异具有统计学意义(P<0.01 ,P<0.01 );各组吞噬率均为100%。吞噬率=已发生吞噬作用的巨噬细胞数/巨噬细胞总数。结果见表2。表2   治疗30 d后各组兔巨噬细胞计数比较(略)
        SOD活性及玻璃体蛋白浓度测定:30 d后散血净组SOD活性与尿激酶组和不治疗组之间差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.01 );而蛋白浓度比较各组之间差异无统计学意义。结果见表3。表3  治疗30 d后各组兔玻璃体SOD活性和蛋白浓度值测定比较(略)
       3  讨论
        散血净功能活血化瘀,方中桃仁、红花、赤芍、川芎行气活血、散瘀;川芎、丹参、水蛭能抑制凝血酶原-纤维蛋白系统,降低血小板表面活性,促进纤维蛋白的溶解, 降低血粘度。现代药理学认为丹参具有扩张血管、增加血容量、改善微循环、促进细胞代谢、改善细胞缺氧、降低血小板凝集作用[2]。活血化淤药物的应用,能增强巨噬细胞吞噬作用,促进血液循环,加快视网膜脉络膜出血的吸收且有利于巨噬细胞的趋化和自溶后的消除[3]。诸药合用,消除玻璃体积血。超声波可使细胞结构发生变化,使酶的催化过程改变,提高细胞对药物的敏感性,超声透入药物无极性之分,不会是药物产生电解电离,能有效发挥药性;超声波的机械和温热作用使细胞渗透性增加,局部组织血管扩张,血流加速[4]。而脉冲超声可对细胞内物质及微小的细胞结构起到轻微“按摩”作用,可增强半透膜的弥散作用,提高细胞的代谢功能,增强细胞的活力[5]。超声作用下所引起的震动流和声能使细胞膜通透性增加,药物极易从细胞间隙透入细胞内[4]。超声波溶解血栓的机制可归纳为:空化作用、微流作用及震动所致的机械效应、热效应、超声透入作用以及增强纤维蛋白的溶解活性或增强纤溶药物的效应等,直接溶解血栓[6]。超声药物透入法,药物在超声作用下不经血液循环直接到达病灶部位,没有口服和注射用药所引起的副作用。
        超声散血净透入疗法结果显示:能促进纤维蛋白分解,溶解血凝块,促进积血吸收,30 d后眼底可见度高于对照组和空白组;能促进巨噬细胞的吞噬作用,促使巨噬细胞趋向眼部组织,参于消除红细胞的碎片,散血净治疗组巨噬细胞计数高于其它两组;能提高SOD活性,巨噬细胞吞噬红细胞及其碎片时,可产生氢氧自由基,自由基对玻璃体基质及细胞成分都有很强的破坏作用,可使玻璃体透明质酸降解,结构崩解。同时巨噬细胞也产生超氧化物歧化酶,SOD能清除超氧离子自由基,保护细胞免受损伤。散血净治疗组SOD活性明显高于其它组;能降低蛋白浓度,当玻璃体积血液化时,玻璃体本身蛋白质沉淀及血红蛋白增加,使蛋白浓度增高,也是玻璃体严重混浊的影响因素[7]。本实验空白组玻璃蛋白浓度最高,散血净治疗组蛋白浓度最低。
        本实验提示,超声药物透入治疗玻璃体积血是有效的方法,具有应用价值和前景。                  
        
       【参考文献】
           [1]Forrester J V, Edger W, Millar W ,et ai.Enhancement of vityeius cloty - sis by urokinase:made of action[J].ExpEye RES,1982,34:895.
       
       [2]陈祖基.实用眼科药理学,第1版[M].北京:中国科学技术出版社,1993:428.
       
       [3]李寿玲,邓亚平.活血化瘀治疗实验性眼内出血的病理研究[J].眼底病,1991,15(3):156.
       
       [4]周万松,肖红雨.超声治疗的国内进展[J].中华医疗杂志,1996,19:44.
       
       [5]赵彼得.临床电疗与光疗[M].北京:人民军医出版社,1992:112.
       
       [6]郎鸿志,黄寿吾.经颅超声溶栓治疗缺血性卒中的研究进展[J].中国脑血管病杂志,2005,7(7):327.
       
       [7]梁风鸣,魏 淳,王明芳.中药对实验性玻璃体出血的作用观察[J].中国中医眼科杂志,1997,11(4):202.

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