妇月康胶囊中阿魏酸的含量测定
作者:白娟
作者单位:安徽省医学科学研究所,安徽 合肥 230061
《时珍国医国药》 2007年 第6期
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【摘要】
目的建立妇月康胶囊中阿魏酸的含量测定方法。方法采用HPLC法,uBondapak C18(4.0 mm×250 mm)柱,甲醇5%冰醋酸溶液(22∶78)为流动相,检测波长322 nm。结果阿魏酸在 0.072 5~0.290 0 μg范围内浓度与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.999 9 (n=5)。平均回收率99.46%,RSD 为1.26%。结论 该法简便、灵敏、准确,可用于妇月康胶囊的质量控制。
【关键词】 高效液相色谱法 妇月康胶囊 阿魏酸
Determination of Ferulic Acid in Fuyuekang Capsule
BAI Juan, CHONG Mingcai
Anhui Institute of Medical Sciences, Hefei 230061, China
Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of ferulic acid in Fuyuekang Capsules. MethodsHPLC method was used in the quantitative analysis using a uBondapak C18(4.0 mm×250 mm) column. The mobile phase was methyl alcohol-5% glacial acetic acid (22∶78) and detecting wavelength was 322 nm. ResultsThe calibration curve was linear in the range of 0.0725~0.2900 μg for ferulic acid (r=0.999 9,n=5). The average recovery was 99.46% and RSD was 1.26%. ConclusionThis method is simple, sensitive, accurate and available for the quality control of Fuyuekang Capsules.
Key words:HPLC; Fuyuekang Capsule; Ferulic acid
妇月康胶囊是由当归、川芎、甘草(炙)、干姜(炭)、益母草、等8味中药组成,其主要功能为活血、祛淤、止痛。用于产后恶露不行,少腹疼痛,也可试用上节育环后引起的阴道流血,月经过多。当归为本方的君药之一,且当归、川芎的有效成分均为阿魏酸。故选择阿魏酸作为控制该产品质量的定量指标,通过高效液相色谱法建立其含量测定方法。
1 仪器与试药
Model 2000二元高压梯度高效液相色谱系统(美国SSI公司),包括Model 500型紫外/可见可变波长检测器,Laballiance Instrument Series Ⅳ Pump,阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所,含量测定用 批号07739809),妇月康胶囊(自制),水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,冰醋酸等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱:uBondapak C18(4.0 mm×250 mm);流动相:甲醇5%冰醋酸溶液(22∶78);检测波长:322 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:25℃;进样量:10 μl。
2.2 对照品溶液的制备
取阿魏酸对照品适量,精密称定,用甲醇制成每毫升含阿魏酸14.5 μg的溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取本品内容物约4.0 g,精密称定,加甲醇甲酸(95∶5)溶液40 ml,超声处理30 min,放冷,滤过,用少量甲醇甲酸(95∶5)溶液分次洗涤容器和残渣,洗液滤过,合并滤液,70℃水浴上蒸干,残渣加30 ml水溶解,加盐酸调节pH值至2~3,用乙醚提取5次,30 ml/次,合并乙醚液,挥干,残渣用甲醇溶解,移置10 ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取阿魏酸对照品溶液5.0,7.5,10.0,12.5,15.0,20.0 μl进样,按上述色谱条件测定,以对照品量(X)为横坐标,峰面积值(Y)为纵坐标,绘制标准曲线,得阿魏酸回归方程:Y=3 317 067X+11 069.7(r=0.999 9)。阿魏酸在0.072 5~0.290 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度实验
精密吸取阿魏酸对照品溶液10 μl,重复进样5次,测定峰面积值,RSD=1.43%,小于2%。
2.6 重现性实验取同一批号的样品5份,分别按上述方法测定含量。结果见表1。表1 重现性实验结果(略)
2.7 稳定性实验精密吸取同一供试品溶液,分别于0,1,2,4,8 h后进样10 μl,测定阿魏酸峰面积,结果表明,供试品溶液在8 h内稳定性良好, RSD为1.15%。
2.8 阴性对照实验
按照本品处方,取当归、川芎外的其余药材,按制备工艺要求,制成不含当归、川芎的胶囊内容物,按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液并测定。阴性溶液色谱中,与对照品相应的位置上无干扰,见图1。
2.9 回收率实验精密称取已知含量的样品5份,分别精密加入等量的阿魏酸对照品,按供试品溶液制备方法制备并测定。结果见表2。表2 回收率测定结果(略)
2.10 样品测定依法测定样品4批次。结果见表3。表3 样品测定结果(略)
3 讨论[1,2]
本实验经对阿魏酸对照品溶液进行紫外扫描发现,在322 nm处有最大吸收,故选择322 nm作为测定波长。通过对乙腈-0.085%磷酸溶液(17∶83)、乙腈-2%冰醋酸(20∶80)、甲醇-5%冰醋酸(25∶85)等多种流动相进行比较实验,发现甲醇-5%冰醋酸溶液(22∶78)的系统分离效果最好,且柱效高,故选择本系统为流动相。制备供试品溶液选择提取溶媒时,曾对甲醇、甲醇-甲酸(95∶5)、醋酸乙酯和水进行了比较,其中用水提取,在乙醚萃取时乳化现象严重,干扰测定。其余三种则以甲醇-甲酸(95∶5)提取效率最高,故提取溶剂选择甲醇-甲酸(95∶5)溶液。但甲醇-甲酸(95∶5)提取液颜色较深干扰测定,故本研究在此基础上,结合阿魏酸的理化性质,又进行初步纯化,用乙醚萃取。对萃取次数及超声提取20~40 min的结果进行比较,结果表明,超声30 min, 萃取5次,阿魏酸即可提取完全。
实验结果表明:本法简便、灵敏、准确,可用于妇月康胶囊的质量控制。
【参考文献】
[1]苗明三, 李振国. 现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫生出版社,2000:131, 412.
[2]薛玉梅. HPLC法测定新生化颗粒中阿魏酸的含量[J].基层中药杂志,2002,16(4):26.