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       【摘要】 
       目的探讨最常用的抗衰老中药麦冬和何首乌延缓衰老的作用机理，观察和分析麦冬注射液和何首乌注射液对氟哌啶醇致痴呆大鼠抗氧化酶表达作用的影响。方法雄性 Wistar大鼠40只，随机分为对照组、模型组、实验1组、实验2组。除对照组外，模型组、实验组先用氟哌啶醇建立痴呆症(Alzheimer Disease，AD)动物模型，实验组还分别腹腔注射麦冬注射液、首乌注射液。测定各组大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量。结果与对照组和模型组比较，麦冬注射液、何首乌注射液均能使模型大鼠多种组织SOD，GSH-PX显著升高，差异有极显著性意义(P<0.01)。结论麦冬和何首乌都能显著提升组织抗氧化酶含量，但对多数组织SOD，GSH-PX表达值的影响，何首乌要强于麦冬。
       【关键词】  麦冬 何首乌 氟哌啶醇 抗氧化酶 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 抗衰老
       The Experimental Research and Comparative Analyses of Anti-oxidase Expression to Rat with Alzheimer Disease Enhanced by Radix Ophiopongonis and Radix Polygonummultiflorum
       LIU Jieshu， HUANG Liya
       School of Medicine, Hubei Institute of Nationality，Enshi 445000, China
       Abstract：ObjectiveTo study the mechanism and antiaging function of dwarf and Radix Polygonummultiflorum. Methods40 male Wistar rats were divided respectively into contrast, model and experimental I and Ⅱ groups  Except contrast, all rats were set animal model of Alzheimer Disease by lilyturf tuber.The experimental ones were injected dwarf and Radix Polygonummultiflorum injection to stomach. Rat model of acquired remembering deficiency induced by haloperidol was made. Meanwhile concentrations of SOD and GSH-PX in different organs or tissues of the animals were detected. The changed rule and the relationship between different groups in dwarf lilyturf tuber treated animal experiments were analyzed. ResultsIn contrast with controls and model groups, concentrations of SOD and GSH-PX strikingly increased in the drug-treated groups. The differences were statistically significant (P<0.001). Conclusion Dwarf and Radix Polygonummultiflorum lilyturf tuber can  upregulate the expression of the anti-oxidation.To most organic expression of SOD GSH-PX, the effect of tuber of  Radix Polygonummultiflorum is much better than Ridix Ophiopongonis.
       Key words：Ridix Ophiopongonis；  Radix Polygonummultiflorum；  Haloperidol anti-oxidase；  Superoxide dismutase；  Glutathione Peroxidase；  Against ageing
        麦冬、何首乌为中医传统常用抗衰老中药之一，麦冬原名麦门冬，为百合科植物麦冬Ophiopogon japonicus (L.F.) Ker-Gawl 的干燥块根。其味甘、微苦，性寒，归心、肺、胃经，具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦等功效。临床常用于治疗肺阴不足的干咳痰粘、痨热咳嗽，胃阴虚的津伤口渴，心阴虚的心烦不眠等证［1］。麦冬含有主要化学成分为甾体皂苷、高异黄酮类、多糖、氨基酸等［2］。近年来研究表明麦冬水提物可对抗D-半乳糖的致衰老作用，能显著升高红细胞SOD，血清TAA含量，显著降低血清MDA含量，提示麦冬有降低自由基反应而发挥抗衰老的作用［3］。何首乌，为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根,其味甘、涩，性微温，归肝、肾经，具有补益精血、固肾乌须的功效，临床上用于治疗血虚的头昏失眠，肝肾亏虚的眩晕耳鸣、须发早白等证，主要化学成分含蒽醌类、磷脂类和二苯乙烯苷类等［4］。现代研究表明何首乌通过降低脑组织和肾组织LPF含量，升高心肌Na+/K+-ATPase活性和肝脏SOD活性而实现延缓衰老［5］，两者均有不同程度的抗衰老作用。
        本实验用麦冬注射液和何首乌注射液作实验动物腹腔注射，由于氟哌啶醇(Haloperidol，Hal)制作帕金森氏病动物模型是目前最准确可靠的，是进行老年痴呆病研究中首选的动物模型［6］，因此本实验选用Hal诱导动物老化模型作对照，通过对各组动物行为学观察进行比较性研究，通过对各组动物组织SOD，GSH-PX含量的测定，旨在进一步探讨麦冬和何首乌延缓衰老的机制，分析影响抗氧化酶表达的效果和差异。
       1  器材与方法
       1.1  麦冬注射液和何首乌注射液的制备麦冬、何首乌由恩施州中药材生产GAP（质量管理规范）示范基地提供，采用水提醇沉法制成含生药1.0 g/ml的注射液，瓶装密封备用。
       1.2  药品及仪器
       Hal注射液（湖南洞庭药业股份有限公司生产），SOD，GSH-PX试剂盒（南京建成生物工程研究所生产），GL-20G II型高速低温离心机，UV-2450分光光度仪，水浴箱。
       1.3  分组雄性
       Wistar大鼠40只，鼠龄40～50周，体重300～350 g, 由华中科技大学同济医学院动物中心提供。随机分为对照组：生理盐水10 只；模型组：氟哌啶醇10只；实验1组：氟哌啶醇+麦冬注射液10只；实验2组：氟哌啶醇+何首乌注射液10只。
       1.4  给药途径及剂量 
       实验动物除对照组外，模型组和实验组均按每克体重Bid腹腔注射0.001 mg氟哌啶醇注射液，持续 3 d。尔后各实验组在继续注射氟哌啶醇注射液的同时，再分别按每克体重腹腔注射0.003 ml麦冬注射液Bid，0.003 ml何首乌注射液，持续7 d。对照组每天等量腹腔注射生理盐水Bid，持续7 d。
       1.5  组织器官SOD，GSH-PX测定注射实验结束后，断颈处死各组动物。迅速取血及各种组织，血液离心取血清、组织制成10%匀浆，备用。SOD，GSH-PX测定：按试剂盒说明书进行。蛋白定量采用双缩脲法测定。
       1.6  统计学方法
       所有检测数据用SPSS 11.5统计软件进行统计学处理，计量资料用均数加减标准差表示。在对数据进行比较分析的过程中，发现个别数据不符合ANOVAO比较的要求，而改用非参法进行比较分析。
       2  结果与分析
        从表1、表2可见：麦冬注射液、何首乌注射液均能提高模型大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质SOD，GSH-PX的含量，经比较差异有极显著性意义（P＜0.01），说明麦冬、何首乌确有提高抗氧化酶的表达作用。实验1组与实验2组比较，麦冬在血和肝中升高SOD，在海马和脑皮质中升高GSH-PX比何首乌强（P＜0.05），何首乌在肾、海马和脑皮质中升高SOD, 在血、肝和肾中升高GSH-PX比麦冬强（P＜0.05）。实验1组海马和脑皮质的GSH-PX表达值，与对照组和模型组比较，差异有非常显著性意义（P＜0.001），提示麦冬在脑组织增强GSH-PX表达作用上更具优势。表1  各组SOD结果比较(略)表2  各组GSH-PX结果比较(略)
       实验组分别与对照组和模型组相应组织比较，差异有极显著性意义（P<0.01）；实验1组和实验2组比较，★差异有显著性意义（P<0.05），△差异无显著性意义(P＞0.05)；n=10
       实验组分别与对照组和模型组相应组织比较，差异有极显著性意义（P<0.01）；实验1组和实验2组比较，★差异有显著性意义（P<0.05），△差异无显著性意义(P＞0.05)；n=10
       3  讨论
        现代医学证实，衰老是机体各种生化反应的综合表现，是体内外许多因素（环境污染、精神紧张、遗传等）共同作用的结果。早在1956年，由Denham Harman提出的“氧化自由基学说”是目前比较公认的的致衰学说之一，该理论认为，机体在有氧物质代谢过程中（细胞线粒体的呼吸氧化代谢过程），不断产生氧自由基（oxygen free radicals），同时又具有有效的自由基清除系统（如SOD和GSH-PX等抗氧化酶），以对抗和消除氧自由基的损伤，使体内氧自由基维持在正常水平。老年人随着年龄的增长,这种平衡逐渐被破坏，造成氧自由基过剩，过量的氧自由基通过氧化作用攻击细胞膜及DNA、蛋白质和酶类大分子，引起细胞膜上的不饱和脂肪酸产生脂质过氧化反应，DNA及蛋白质分子交联，DNA基因突变或复制异常及生物酶活力下降，最终导致细胞功能严重受损以致衰老、死亡。这表明氧自由基损伤对人体衰老影响最大，与机体各组织、器官的老化和多种慢性疾病的发生密切相关［7，8］。寻求改善自由基—抗氧化平衡的药物成为延缓衰老和防治多种慢性疾病的重要方向［9］。
        SOD和GSH-PX是重要的抗氧化酶系，普遍存在于人体各组织中，包括血液、肝脏、线粒体和细胞质，有抗自由基损伤和清除氧自由基、降低细胞内H2O2水平、减少自由基和过氧化物蓄积的作用。氧自由基被SOD转变为H2O2后，GSH-PX可继续作用在H2O2上，使之转变成完全无害的水和氧。因此SOD，GSH-PX表达变化，已成为检测衰老最为敏感和可靠的指标［10］。麦冬和何首乌是公认的延年益寿中药，是最常用的抗衰老中药之一，研究二者与SOD，GSH-PX的关系，对解释其作用机制有重要的理论意义和实际意义。
        本实验研究，通过Hal诱导动物模型，探讨麦冬和何首乌对SOD，GSH-PX在不同组织中活性和表达量的影响。结果表明：氟哌啶醇对SOD和GSH-PX有抑制作用。麦冬和何首乌均能显著提高模型大鼠血、肝、肾、海马、脑皮质，SOD，GSH-PX的含量，有很强的抗氧化作用。但二者在提高SOD，GSH-PX表达值上，显示出不同组织有不同特点。麦冬在血、肝中升高SOD，在海马、脑皮质中升高GSH-PX比何首乌更强，而何首乌在肾、海马、脑皮质中升高SOD，在血、肝、肾中升高GSH-PX比麦冬有优势。这一组织分布特点，值得结合中医理论进一步研究。然而从总的情况看，在对多数组织SOD，GSH-PX表达值的影响上，何首乌强于麦冬。
       【参考文献】
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       ［2］林 晓,周强峰,徐德生.麦冬药理研究进展［J］.上海中医药杂志，2004，38（6）:59.
       
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       ［5］宋士军，李芳芳，岳 华,等.何首乌的抗衰老作用研究［J］.河北医科大学学报，2003,24(2):90.
       
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       ［9］王 访,张有权.抗衰老中药的药理研究近况［J］.时珍国医国药，2002，13（4）:236.