高效液相色谱法测定复方磺胺甲
作者:廖富林, 宋新康
《时珍国医国药》 2005年 第12期
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【关键词】 高效液相色谱法;,,复方磺胺甲
摘要:目的:采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲 唑的含量。方法:以DOS柱为分析柱,流动相:水 乙腈 三乙胺(80∶20∶0.2),并用醋酸调pH至5.9±0.1,流速1.2 ml/min,检测波长240 nm,柱温40℃,峰面积外标法。结果:复方磺胺甲 唑中甲氧苄啶和磺胺甲 唑分别在0.1~0.01 mg/L和0.5~0.03 mg/L浓度范围内线性关系良好,r值分别均为0.999 9,平均回收率分别达RSD=0.4%和0.7%(n=4)。结论:该方法操作较《中国药典》方法简便、快速、结果准确可靠,重现性好,可用于复方磺胺甲 唑片中测定甲氧苄啶和磺胺甲 唑含量。
关键词:高效液相色谱法; 复方磺胺甲 唑; 甲氧苄啶
Determination of the Main Components in Compound Sulfamethoxazole Tablets by HPLC
LIAO Fu lin, SONG Xin kang
(Biology Department, Jiaying College,Meizhou, Guangdong 514015,China; Meizhou Institute for Drug Control, Meizhou, Guangdong 514071,China)
Abstract:Objective:To establish an HPLC method for determining Compound sulfamethoxazole tablets.Methods:The analytical column was ODS-C18,the mobile phase was water-acetonitrile-triethglamine (80∶20∶0.2 to adjust the pH 5.9±0.1 with AC-acid)with 1.2 ml・min-1 of flow rate,the detective wavelength was 240nm,and the column temperture was 40℃.External standard method was used.Results:The standard curves of two compounds were linear well.The average recovery of TMP was 101.2%,RSD=0.4%(n=4). The average recovery of SMZ was 100.6%,RSD=0.7(n=4).Conclusion:The HPLC method is simpl, rapid and accurate for the determination of Compound Sulfamethoxazole Tablets.
Key words:HPLC; SMZ; TMP; Determination of content
复方磺胺甲 唑片(百炎净)是目前临床应用较为广泛的制剂,《中国药典》2000年版Ⅱ部,用差示分光光度法测定其主药成分甲氧苄啶和磺胺甲 唑含量,该法操作复杂,给检验工作带来不便。本实验采用高效液相色谱法对复方磺胺甲 唑片中甲氧苄啶和磺胺甲 唑含量测定方法进行初步研究,并与药典方法进行比较。结果表明本方法简便、快速、准确可靠。
1 仪器与试药
LC―10A高效液相色谱仪(日本岛津);SPD―10A紫外检测器(日本岛津);中北通用汉字色谱工作站;甲氧苄啶对照品(中国药品生物制品检定所,批号0031-9803);磺胺甲 唑对照品(中国药品生物制品检定所,批号0025-9503)。
复方磺胺甲 唑分别为:广东康博通药业实业有限公司、徐州平光制药有限责任公司、上海新亚药业闵行有限公司生产,电子分析天平;乙腈为色谱纯;三乙胺、醋酸为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液制备
2.1.1 对照品溶液的制备取于60℃减压干燥至恒温重的甲氧苄啶和磺胺甲 唑对照品适量,精密称定,用流动相溶解,并制成0.2 mg/L和1 mg/L溶液作对照品溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备取复方磺胺甲 唑10片,精密称定,按平均片重,精密称取甲氧苄啶30 mg和磺胺甲 唑150 mg后置50 ml量瓶中加甲醇溶解稀释至刻度,再精密量取适量,用流动相制成含甲氧苄啶0.024 mg/L和含磺胺甲 唑0.12 mg/L作供试品溶液
2.2 色谱条件色谱柱:DOS柱;流动相:水-乙腈-三乙胺(80∶20∶0.2);并用醋酸调pH至5.9±0.1,流速1.2ml/min,检测波长240 nm,柱温40℃,进样量:20 μl。色谱图见图1。
a-标准品图谱
b-样品图谱
图1 复方磺胺甲 唑的HPLC图谱(略)
2.3 标准曲线精密量取对照品溶液25 ml置50 ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。为①号液,用①液同法再分别配成②③④⑤,5个配比浓度分别取20 μl注入液相色谱仪,记录各对照品的峰面积(A),将峰面积(A)与对相应浓度(C)进行回归处理,得回归方程:甲氧苄啶回归方程A甲=157 238 084 C甲+101 497,r=0.999 99。磺胺甲 唑归方程A磺=66 207 149 C磺+149 896,r=0.999 96。结果显示甲氧苄啶在0.1~0.01 mg/L,磺胺甲 唑在0.5~0.03 mg/L,浓度范围内显良好线性关系。
2.4 精密度实验取复方磺胺甲 唑溶液1份,连续进样4次,分别求出甲氧苄啶的精密度RSD为0.4%,磺胺甲 唑的精密度RSD为 0.7%。
2.5 回收率实验精密量取已知含量的复方磺胺甲 唑样品溶液2 ml,与对照品溶液1 ml,置同一50 ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,按上述色谱条件中进行测定,回收率分别见表1~2。
表1 甲氧苄啶回收率测定(略)
表2 磺胺甲 唑回收率测定(略)
2.6 样品测定分别测定三个厂家复方磺胺甲 唑的甲氧苄啶和磺胺甲 唑含量,并与药典方法进行比较,结果见表3~4。
表3 甲氧苄啶含量测定(略)
表4 磺胺甲 唑含量测定(略)
3 讨论
本文用水 乙腈 三乙胺(80∶20∶0.2)为流动相进行洗脱,使甲氧苄啶和磺胺甲 唑的分离度R=1.5,且两峰未出现拖尾,理论塔板数以磺胺甲 唑对照品计为9 622,因此是一种分离较好,且精确度、准确性较高的检测方法。
参考文献:
[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典,Ⅱ部[S].北京:化学工业出版社,2000:1042 1043.
[2] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药品标准・新药转正标准[S].2002:288 289.
基金项目:广东省教育厅自然科学研究资助项目(No.Z03088)
广东省科技计划项目(No.2004B36001018)
(嘉应学院生物系,广东 梅州 514015; 广东省梅州市药品检验所 514071)