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       【摘要】 
       目的分析藏药沙棘的挥发油组分。方法采用超临界CO2萃取法从沙棘中提取挥发油，气相色谱质谱联用技术对其化学成分进行分析，并用归一化法确定各化学成分的相对百分含量。结果沙棘挥发油共提取、鉴定出14种化合物，含量最高的组分为亚油酸23.91%，其次为油酸24.09%，再次为棕榈酸21.26%， 三十二烷8.97%，硬脂酸6.18%。相对含量较高的还有棕榈油酸2.89%，十八碳烯酸甲酯1.92%，亚麻酸1.35%。结论 了解了超临界提取的沙棘挥发性成分的组成，为沙棘的进一步开放利用奠定了基础。
       【关键词】  沙棘； 挥发性组分； 超临界流体萃取； 气相色谱质谱
       Supercritical Carbon Dioxide Extraction of Essential Oil from Tibetan Medicine Hippophae rhamnoide and Analysis by GCMS
       DU Ran, ZHANG Haiyan, HUAGN Wei, LIU Junjie, LING Jianya*
       （School of Life Science, Shandong University, Jinan 250100, China; State Key Laboratory of Microbial Technology, Shandong University, Jinan 250100, China）
       Abstract：ObjectiveTo analyse the chemical components of essential oil from Hippophae rhamnoide. MethodsAfter supercritical fluid extraction, the volatile oil was separated by GCMS and determined by normalization method. Results14 components from propoils by SFE were separated and identified. The main compounds of volatile oil were 9,12Octadecadienoic acid 30.01%，9-octadecenoic acid 24.09%，hexadecanoic acid 21.26%，n-dotriacontanol 8.97%, octadecanoic acid 6.18%, hexadecenoic acid 2.89%, 9octadecenoic acid, methyl ester 1.92%, alphaLinolenic acid 1.35% etc. ConclusionThere are abundant of unsaturated fatty acid, saturated fatty acid in the essential oil extracted from Hippophae rhamnoide. This research established a good method for further studying medical application and developing of Hippophae rhamnoide.
       Key words：Hippophae rhamnoide;   Essential oil;   Supercritical fluid extraction;   GCMS
       
       沙棘Hippophae rhamnoid，藏名“达日布”，为胡颓子科沙棘属［1，2］，作为藏药应用历史源远流长，早在公元八世纪著名藏医药学家帝玛·丹增彭措所著的《晶珠本草》中就有记载：“‘达日布’”果锐、轻，治培根病、消化不良、化血、消除肺肿”。沙棘于公元十三世纪传入蒙古族地区，成为藏、蒙民族的传统药物。《中国药典》1977年将其收录。沙棘在抗辐射、抗凝血、降血压、抗衰老、抗疲劳、增强机体免疫力等方面都显示出较好的治疗效果，被誉为“天然维生素的宝库”和“绿色黄金”［3，4］。
       
       超临界流体萃取技术(Supercritical Fluid Extraction, SFE)是近年来迅速发展被人们所认知的一种新型“绿色分离”技术。本文应用超临界CO2萃取技术提取沙棘的挥发性组分，利用气质联用技术对其化学成分进行鉴定，以期对沙棘的有效成分进一步认识，为沙棘资源的药用开发奠定坚实的基础。
       1  仪器与试药
       
       SPEed SFE型超临界萃取仪（美国Applied Separations公司）；GCMSQP2010型色谱质谱联用仪（日本岛津公司）；沙棘购自西藏山南地区藏药厂；高纯液体CO2（纯度＞99.99%，北京大兴气体厂）。
       2  方法
       2.1  沙棘挥发油的提取将15 g沙棘粉碎后过60目筛加入20 ml超临界CO2萃取池中。压力20 MPa，萃取池温度45℃，接收池温度30℃。静态萃取20 min，动态萃取90 min，CO2流量1.0 L /min。得黄色透明油状物，有浓郁臭味。
       2.2  气相色谱质谱分析条件色谱柱：弹性石英毛细管柱SE-54（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；色谱柱程序升温条件：柱温50℃（3 min）5℃·min-1          180℃（2 min）10℃·min-1          260℃（50 min）；载气He，分流比1∶50；接口温度280℃；离子源温度200℃；电离电压70 eV；扫描质量范围30 ～ 400 AMU。
       3  结果
        
       经实验比较得知，SE54毛细管柱兼有非极性柱与极性柱的优点，对非极性的烃类组分及中等极性的酯、醚等组分均有较好的分离效果。采用SE54毛细管柱按上述实验条件，气相色谱法对沙棘挥发油进行分析，采用色谱数据处理系统，以峰面积归一化法测得挥发油各组分相对含量，总离子流图见图1（峰号与表中序号同）。对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图，经过质谱数据系统检索（质谱数据库NIST），人工谱图解析，并查对有关质谱资料［5～8］，从基峰相对丰度等几个方面进行比较，从而确定出沙棘挥发油中的化学成分。结果见表1。
       图1  超临界CO2萃取的沙棘挥发性成分的化学成分分析结果（略）
       
       超临界CO2提取的沙棘挥发性成分中，共分离出14种化合物，并全部得到鉴定。从表1可见，沙棘挥发性成分主要是不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸、酯及少量的石竹烯、蛇床烯类物质。其中，必需脂肪酸亚油酸的含量高达30.01%，单不饱和脂肪酸－油酸含量为24.09%，加上亚麻酸和棕榈油酸，不饱和脂肪酸占总提取物的58%以上。
       表1  超临界CO2萃取的沙棘挥发性成分的化学成分分析结果（略）
       4  讨论
       
       不饱和脂肪酸的适量摄入对心脑血管疾病和癌症有较好的防治作用。资料表明，不饱和脂肪酸能杀伤肿瘤细胞，同时可以参与体内免疫调节，通过影响免疫细胞的结构和功能来发挥免疫作用［9］。我们利用超临界流体萃取技术，简便、快捷的完成了对沙棘挥发性成分的提取。实验证明，沙棘中富含不饱和脂肪酸，这对沙棘药理作用的深入研究有一定的指导意义。
       【参考文献】
         　　［1］ S.C. Fu, C.W.C. Hui, L.C. Li. et al.Total flavones of Hippophae rhamnoides promotes early restoration of ultimate stress of healing patellar tendon in a rat model［J］.Medical Engineering & Physics, 2005, 27：313.
       
       ［2］ P.S. Negi a, A.S. Chauhan , G.A. Sadia et al.Antioxidant and antibacterial activities of various seabuckthorn (Hippophae rhamnoides L.) seed extracts［J］.Food Chemistry, 2005,92：119.
       
       ［3］ 蒲自连.绿色黄金-沙棘［J］.植物与健康,1998,(4)：6.
       
       ［4］ 包文芳，李保桦.沙棘属植物化学成分研究概况［J］.中国药物化学杂志，1997, 7(1)：66.
       
       ［5］ 丛浦珠.质谱学在天然有机化学中的应用［M］.北京:科学出版社,1987：57.
       
       ［6］ Masada Y. Analysis of Essential oils by Gas Chromatography and Mass Spectrometry ［M］.New York: John Wiley and sons. Inc. 1976：157.
       
       ［7］ 中国质谱学会有机专业委员会.香料质谱图集［M］.北京:科学出版社,1992：161.
       
       ［8］ Heller S R. EPA/NIH mass spectral data base ［M］. Washington, US: Government Printing office, 1978：2634.
       
       ［9］ Gill I., Valivety R. Polyunsaturated fatty acids. Part I：occurrence, biological activities and application［J］.Trends Biotechnol, 1997,15：401.