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       【摘要】 
       目的测定川芎在不同溶媒提取下活性成分阿魏酸的含量。方法色谱柱为Cosmosil-C18(125 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-3%醋酸（32∶68，v/v），流速为0.8 ml/min，波长为323 nm，柱温为室温。结果 3种溶媒川芎提取物中以乙醇提取物中阿魏酸的含量最高达到0.56 mg/ml。结论 3种溶媒川芎提取物中阿魏酸的含量各不相同，且以乙醇提取物中FA的含量较高。
       【关键词】  川芎； 阿魏酸； 反相高效液相色谱法
       Determination of Ferulic Acid in Extract of Chuanxiong in Different Solution by RP-HPLC
       DING Li,LIU Zongwu
       (Department of Pharmacy,The Second People’s Hospital of Lanzhou, 730046,China)
       Abstract：ObjectiveTo determine the contents of ferulic acid in extraction of Chuanxiong of different solution.MethodsThe Cosmosil ODS C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)was used,the mobile phase was methanol -3%acetic acid solution(32∶68，v/v),the flow rate was 0.8 ml/min and the detection wavelength was at 323 nm at roomtemperature.ResultsThe contents of ferulic acid was 0.56 mg/ml in alcoholic extraction,which was the highest in extract of Chuanxiong in different solution. ConclusionThe contents of ferulic acid are different in extract of Chuanxiong in different solution.
       Key words：Chuanxiong;  Ferulic acid;  RP-HPLC
       
       中药川芎是伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort的干燥根茎，味辛、微苦，性温，具有活血祛淤、行气开郁、祛风止痛之功效。其主要活性成分阿魏酸（Ferulic Acid FA）及其衍生物有抗血栓形成、抗炎、止痛、调节人体免疫功能的作用［1］。川芎中有效成分的提取方法有超临界流体萃取、醇提、水提等，所得产物为川芎嗪，FA，挥发油的混合物［2，3］。为比较不同溶媒对提取物中活性成分含量的影响，本实验对川芎采用了不同溶媒提取，考察了提取物中FA的含量。
       1  仪器与试药
       
       LC-20AT高效液相色谱仪（岛津，日本），SPD-M20A二极管阵列检测器，STL-20A自动进样器，DGU-20A3在线脱气机，Lcsolution数据采集处理系统：LDZ4-0.8自动平衡微型离心机（北京医用离心机厂）；MA110-型电子分析天平（上海第二天平仪器厂）。FA对照品（中国生物制品鉴定所），冰醋酸（分析纯），甲醇（色谱纯）均购自山东禹王。川芎药材购自兰州复兴厚药材有限公司。
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件色谱柱为Cosmosil-C18(柱长125 mm×4.6 mm I.D)；检测波长为323 nm；流动相为甲醇-3%醋酸溶液（32∶68，v/v）；流速0.8 ml/min；柱温室温；进样量20 μl。
       2.2  标准曲线的绘制将FA的标准品溶于含有内标（芦丁）的甲醇中制成55.5 μg/ml溶液，进一步稀释获得0.5，1.0，5.0，10.0，15.0，25.0和50.0 μg/ml的对照品溶液，在上述色谱条件下，进样，测其峰面积。以FA和内标的峰面积之比为纵坐标（Y）FA的浓度为横坐标（X）用加权（1/C2）最小二乘法进行回归运算得到回归方程：Y=0.070 75X-0.140 1，r=0.999 8 (n=6)，表明样品中FA在0.5～50.0 μg/ml范围内线性关系良好。
       2.3  供试品的制备取川芎药材粉3份各200 g，分别加适量的双蒸水，乙醇和醋酸乙酯浸没药材30 min，用双蒸水浸没的药材加热煮沸10 min，转入小火煮30 min，趁热过滤。药渣继续加双蒸水加热煮沸10 min，转入小火煮20 min，2次，合并3次煎出液，用纱布过滤，加热浓缩至100 ml，加20 ml乙醇和80 ml聚乙二醇进行溶解。用乙醇和醋酸乙酯浸没的药材分别采用回流提取，提取1 h，将提取液用纱布过滤后分别回收乙醇和醋酸乙酯，然后用200 ml溶剂系统（乙醇/PEG400/双蒸水，1∶4∶5，v/v/v）分别溶解提取物。取3种不同溶媒提取物的溶解物离心，精密吸取上清液2 ml于50 ml量瓶中，用溶有芦丁10 μg/ml溶剂系统（以乙醇/PEG400/双蒸水，1∶4∶5，v/v/v）定容，以0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
       2.4  精密度实验分别精密吸取同一供试品溶液各20 μl，分别连续进样5次，测定FA峰面积。结果水提取物的RSD为1.0%（n=5），乙醇提取物的RSD为1.1%(n=5)，醋酸乙酯提取物的RSD为1.03%（n=5）。表明本法精密度较好。
       2.5  稳定性实验分别精密吸取对照品溶液和川芎的水提取物、乙醇提取物、醋酸乙酯提取物的同一供试品溶液20 μl，在0，2，4，6，8 h分别进样测定峰面积，结果RSD分别为0.3%，0.31%，0.4%，0.35%,表明供试品溶液在8 h内基本稳定。
       2.6  重复性实验按“2.3”项下制备方法分别平行制备同一批供试品溶液各5份，依法测定，计算含量，结果水提取物中FA含量的RSD为1.0%，乙醇提取物中FA含量的RSD为1.1%,醋酸乙酯提物中FA含量的RSD为1.03%。结果表明本法重复性较好。
       2.7  加样回收率实验分别称取已知FA含量的川芎药材5份各200 g，精密称定，同2.3项下制备供试品溶液，并分别精密加入FA对照品约1.5 mg，精密称定，再按上述测定条件测定，分别计算回收率。结果见表1。
       2.8  样品含量测定取3种不同溶媒川芎提取物的溶液各20 μl进样分析，记录高效液相色谱图，见图1。根据谱图中FA和内标的峰面积之比由“2.2”项下回归方程计算不同溶媒提取物中FA的含量见表2。
       表1  回收率实验结果（略）
       表2  样品含量测定结果（略）
       图1  HPLC色谱图（略）
       3  讨论
          
       由本实验分析可以发现在3种不同溶媒川芎提取物中，以乙醇提取物中FA的含量较高达到0.56 mg/ml。另外据资料反应水煎对川芎中FA提取物影响特别大，原因是水回流提取时温度太高，FA不耐热，且水煎液中含糖量较醇提液要高，不利于后续的处理［3］，而醋酸乙酯提取物中FA的含量要略低于乙醇提取物中的FA。
       【参考文献】
         　　［1］ 祁淑玲.川芎的研究及应用进展［J］.天津药学，2005，17（1）：61.
       
       ［2］ 赵 飞，胡燕月，陈益萍，等.川芎中阿魏酸的提取分离［J］.中国医院药学杂志，2005，25（1）：8.
       
       ［3］ 胡 杰，冯丽莉，崔福德.当归川芎中阿魏酸提取的研究［J］.时珍国医国药，2004，15（11）：732.