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       【摘要】 
       目的研究血清IL4，IL6及IgE在哮喘发病中的作用及天灸对它们的影响。方法40只雄性大鼠随机分为正常组、模型组、天灸组及电针组。用卵蛋白（OVA）致敏来制备哮喘模型大鼠。ELISA法检测血清IL4，IL6及IgE。结果模型组血清IL4，IL6及IgE高于正常组(P＜0.01)，经治疗后均有所降低，且天灸组最显著。结论支气管哮喘的发病与血清IL-4，IL-6及IgE的异常有关，天灸对其具有调节作用。
       【关键词】  天灸； 白细胞介素4； 白细胞介素-6； IgE
       基金项目：武汉市科技局资助项目（No.20025007170）
       Effect of Tianjiu on the Serum IL4，IL6  and IgE in Asthmatic Rats
       ZHU Shuxiu,ZHOU Lisha,TU Qian,ZHU Qingyan,WANG Fang
       (Medicine and Life Sciences Institute ,Jianghan University,  Wuhan 430056，China)
       Abstract：ObjectiveTo investigate the function of serum IL4，IL6 and IgE in asthma occurance , observe the effect of Tianjiu on them.Methods40 male rats were divided randomly into the normal group,model group, Tianjiutreated group and the electric needle-treated group.The asthma model of big rats were sensitized by ovalbumen(OVA)and incited with inhaling fog. The serum IL4，IL6 and IgE  were examined by  ELISA  method.ResultsThe serum IL-4，IL6 and IgE of the model group was obviously higher than that of the normal group(P＜0.01）,and their contents were reduced by treatment,especially Tianjiutreated group.ConclusionOccurrance of asthma is related to abnormality of serum IL4，IL6 and IgE. Tianjiu can adjust them.
       Key words：Tianjiu;  IL4;  IL6 ;   IgE
       
       支气管哮喘是机体对抗原性或非抗原性刺激引起的一种慢性气道变态反应性炎症疾病，很多细胞参与该炎症过程，其中包括肥大细胞、嗜酸性粒细胞以及T淋巴细胞等［1］。目前对该病的治疗缺乏较理想的方法。根据祖国医学“发时治标，平时治本”“冬病夏治”的原则，采用中药穴位敷贴治疗具有高效、价廉、方便、无毒副作用等特点，已逐渐受到人们的关注，被广泛应用于临床，但其作用机理尚需进一步研究。本实验通过观察哮喘模型大鼠血清白细胞介素4 （IL4）、白细胞介素6（IL6）及IgE的含量变化来探讨天灸防治支气管哮喘的作用机理。
       1  材料与方法
       1.1  动物  健康雄性SD大鼠40只，体重为（200±50）g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。
       1.2  主要药物试剂及器材 天灸药物为棕黄色糊状物，主要成分为细辛、白芥子、甘遂等，用鲜姜汁调制而成。卵蛋白（Sigma公司进口分装，批号：71K1207），ELISA试剂盒（晶美生物制品公司），CM1超声雾化治疗仪，合力医疗器械厂产品（中国上海）。
       1.3  方法
       1.3.1  哮喘大鼠模型制备 参照文献［2］的方法建立大鼠支气管哮喘模型，实验第1天每只大鼠腹腔注射抗原液1 ml（卵蛋白100 mg，灭活百日咳疫苗5×10 ，氢氧化铝100 mg），2周后（第15天）采用CM1超声雾化治疗仪喷雾1%卵蛋白，使动物吸入20 min左右，直至出现喘促、咳嗽，甚至跌倒等呼吸道痉挛梗阻症状，提示造模成功。正常组注射等体积生理盐水。
       1.3.2  动物分组  将造模成功的动物随机分成3组，即模型组、天灸组及电针组各9只，正常组8只（实验过程中有3只大鼠造模不成功，2只大鼠死亡）。
       1.3.3   治疗方法 诱发后（即实验第16天）开始连续治疗3 d，再次诱发即实验第19天诱发，然后（实验第20天）又连续治疗3 d，依此类推共治疗15 d。天灸组参照华兴邦［3］制订的《实验动物穴位图谱》选穴：取双侧定喘、肺俞、肾俞，剪去其相应部位的毛发，令其皮肤暴露，将0.5 cm×0.5 cm大小天灸药物放置白色胶布上贴于相应穴位，1次/d，每次2 h左右，即致皮肤潮红后除去药物。电针组取穴与天灸组相同，用0.5寸的毫针针刺，接G6805电针治疗仪，采用疏密波，频率为100次/min,治疗30 min，1次/d,共治疗15次后取材，4组动物同步喂养、取材。
       1.4  指标检测
       1.4.1  取材 在治疗结束后，麻醉大鼠，打开胸腔，心脏取血，静置30 min后，1 500 r/min离心，取血清保存于-70℃冰箱备用。
       1.4.2   血清IL4，IL6及IgE含量测定 采用ELISA法，按试剂盒说明书操作。
       1.5   资料处理  以±s表示，采用SPSS11.0软件包进行单因素方差分析（oneway ANOVA）,方差齐者组间比较用SNK(StudentNewmanKeuls)检验，方差不齐者用GamesHowell检验。
       2  结果
       2.1   天灸对哮喘大鼠血清IL4，IL6含量的影响 结果见表1，模型组血清IL4，IL6显著高于正常组，具有非常显著性意义（P＜0.01）；与模型组相比，天灸组IL4和IL6以及电针组IL-4均有不同程度下降（P＜0.01或P＜0.05），但天灸组下降更显著，且与电针组相比具有统计学意义（P＜0.05）。
       表1  各组血清IL4，IL6含量（略）
       与正常组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与天灸组比较，△P＜0.052.2  天灸对哮喘大鼠血清IgE含量的影响结果见表2。模型组血清IgE明显高于正常组、天灸组和电针组，具有显著性意义（P＜0.01），且天灸组明显低于模型组和电针组（P＜0.01）。
       表2  各组血清IgE（略）
       与正常组比较，*P＜0.01；与模型组比较，**P＜0.01；与天灸组比较，△△P＜0.01
       3  讨论
       
       细胞因子是指由免疫细胞（如单核/巨噬细胞、T细胞、B细胞等）和某些非免疫细胞（如血管内皮细胞、表皮细胞、成纤维细胞等）经刺激而合成、分泌的一类生物活性物质。细胞因子多属小分子多肽或糖蛋白，作为细胞间信号传递分子,主要介导和调节免疫应答及炎症反应,在支气管哮喘等变态反应性疾病中起重要作用。IL-4主要是T淋巴细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞产生。其通过分布在T，B淋巴细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞等上的IL-4受体传递信息而发挥多向性免疫效应。IL-4调节CD4+（TH）向TH2分化，TH2再分泌多量的IL-4，诱导B细胞分化为浆细胞，进而产生IgE［4］。IL-6则协同IL-4促进B淋巴细胞分化，促其高效合成分泌IgE，参与哮喘气道变态反应性炎症［5］。本实验结果提示模型组血清IL-4，IL-6及IgE均高于正常组，说明其在哮喘的发生发展中起着重要作用。
       
       祖国医学认为哮喘系由宿痰内伏于肺，因外感、饮食或情志劳倦等诱因而引发，其本为肺脾肾亏虚。我们根据《素问·咳论》“治脏者，治其俞”，选取定喘、肺俞、肾俞等穴来固本、益肾、护肺。利用“天人相应”理论、“冬病夏治”原则，在三伏天采用天灸法来防治支气管哮喘，三伏之时，气候炎热，人体腠理开泄，此时在穴位上敷贴药物，易由皮肤进入穴位经络，通过气血运行到达相关脏腑，来调理脏腑机能，达到驱邪、止咳平喘的目的。
       
       实验表明，天灸组血清IL-4，IL-6及IgE的含量显著低于模型，提示在三伏时天灸可调节IgE的异常合成，达到防治支气管哮喘的作用，其作用途径可能是通过抑制IL-4，IL-6的合成和分泌。
       【参考文献】
         　　［1］ 李明华，于志昂，叶世泰.变应性哮喘治疗研究进展［J］.中华微生物和免疫学杂志，1996，16（增刊）：97.
       
       ［2］ 苗 会,薛全福,庄逢源,等.哮喘大鼠动物模型的制备［J］.基础医学与临床，1998，18(1)：72.
       
       ［3］ 华兴邦.大鼠穴位图谱的研制［J］.实验动物与动物实验,1991，1：1.
       
       ［4］ Schroede Jk,Kagey-Sobotka A,Lichtemstein LM.The role of the basophil in allergic inflamation［J］.Allergy,1995,50：463.
       
       ［5］ 高小梅,黄 平,苏卓娃,等.哮喘及慢性支气管炎患者血清白细胞介素6水平的研究［J］.中国现代医学杂志,1999，9(12)：42.