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       【摘要】 
       目的考察糖康胶囊中苦瓜的提取工艺。方法采用正交实验法，以苦瓜总皂苷含量和浸膏收率为指标筛选苦瓜的提取工艺。结果确定苦瓜的提取工艺为：采用12，10，8倍水，提取3次，前两次提取时间2 h/次，第3次30 min。结论 该实验确定的苦瓜提取工艺方法合理，稳定可行。
       【关键词】  糖康胶囊； 提取工艺； 苦瓜
       Research on the Extraction Technology of Momordica charantia L. of Tangkang Capsule
       LEI Lei, WANG Xing*
       (Pharmacy School of Southwest Jiaotong University, E"meishan City, Sichuan 614202, China)
       Abstract：Objective To study the extraction technology of Momordica charantia L. of Tangkang Capsule. MethodsThe Conditions for the extraction were studied by orthogonal experimental design. The indexes were the quantity of extract and the content of total saponin in the extract. ResultsThe extraction technology was to decoct Momordica charantia L. with water for 3 times, with 12, 10, 8 times water each time and for 2h for the first two times and 0.5h for the last time. ConclusionThe best extraction process of Momordica charantia L. is reasonable, stable and easy to operate.
       Key words：Tangkang Capsule;   Extraction technology;   Momordica charantia L.
       
       糖康胶囊由苦瓜、鬼箭羽组成，主要用于治疗2型糖尿病。本课题前期采用高脂饲料加链脲佐菌素（STZ）诱发C57BL/6J小鼠产生的与人类发病机理相似2型糖尿病模型对糖康胶囊粗提取物进行了药效学研究。结果表明，糖康胶囊有良好的降血糖作用。本文对糖康胶囊中主药苦瓜的提取工艺进行了研究，筛选出其最佳提取工艺，为进一步的制剂研究提供实验依据。
       1  仪器与试药
       1.1  试剂  5%香草醛冰醋酸溶液（自制）、高氯酸（成都科龙化工试剂厂，批号20050306）、冰醋酸（成都科龙化工试剂厂，批号20050306）、乙醇（成都金山化学试剂有限责任公司，批号060402）、香草醛等，以上原料和试剂均为分析纯。
       1.2   仪器  紫外分光光度计，TU1901双光束，北京普析通用仪器责任有限公司；Ultrasonic cleaner：AS5150A，Tianjin automatic instrument CO. LTD；离心机：TGL16G，Anke公司；精密电子天平，BP211，SARTORIUS公司；电子天平：G&G T200，美国双杰兄弟集团公司；电热鼓风恒温干燥箱，DB207，成都电烘箱厂。
       1.3  药材  新鲜苦瓜，购于成都青羊小区综合市场，经西南交通大学药学院宋良科副教授鉴定为葫芦科（Cucurbitaceae）苦瓜属植物苦瓜Momordica charantia L.的未成熟果实。
       2  方法与结果
          
       本制剂方中药味鬼箭羽的有效部位理化性质与苦瓜相似，亦能与香草醛冰醋酸溶液发生反应而显色，从而影响苦瓜总皂苷的含量测定，故将其与苦瓜分开提取。据相关报道，苦瓜的有效降糖部位为苦瓜皂苷类化合物［1］，其可溶于水和乙醇，考虑到生产成本及安全性，确定以水为溶剂进行煎煮提取。
       2.1  苦瓜的提取工艺研究
       2.1.1   正交实验方法
       
       样品的制备：将新鲜苦瓜去瓤后切制成厚度约10 cm的切片，取切片200 g，按表2的安排进行正交实验，将提取液用200目滤布滤过，浓缩并定容至100 ml，在5000 r/min转速下离心15 min，取上清液，作为供试品溶液。
       
       苦瓜浸膏收率测定： 精密吸取供试品溶液50 ml，移入已干燥至恒重的蒸发皿中，70℃水浴浓缩至干，放入105℃烘箱干燥3 h，取出，置干燥器中冷却30 min后，取出，精密称重，计算浸膏收率。
       
       苦瓜总皂苷含量测定：①方法建立：苦瓜降糖活性成分皂苷类化合物可与5%香草醛冰醋酸溶液发生特征性显色反应，故本实验采用紫外可见分光光度法，通过扫描苦瓜水提液显色后的紫外图谱，确定最大吸收波长为470 nm（见图1）。通过测定各提取样品在470 nm波长下的吸光度，并以吸光度值大小来比较苦瓜总皂苷含量的高低。②样品测定［2］：精密量取供试品1 ml（随行空白），置10 ml容量瓶中，水浴蒸干，分别加5%香草醛冰醋酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml，摇匀，在60℃水浴10 min，立即置冰水浴中冷却2 min，精密加入冰醋酸4 ml，充分振摇，在470 nm处测定吸光度。
       2.1.2   正交实验设计与结果以对提取效果影响最显著的因素：加水量(A)、煎煮时间(B)、煎煮次数(C) 3个因素进行考察，各取3个水平，进行L9（34）正交实验，以浸膏收率、470 nm处测定的吸光度为指标进行综合评分，并结合生产周期、生产成本和生产值进行综合评价，筛选苦瓜水提工艺条件。因素水平设计与实验安排见表1～2。方差分析见表3。
       图1  苦瓜水提液的紫外可见光谱图（略）
       表1  因素水平（略）
       表2   正交实验结果（略）
       以浸膏收率最大值4.34%计为45分；以吸光度最高值0.890计为55分。综合评分公式：            
       表3   方差分析结果（略）
       由正交实验结果的方差分析结果可知，影响提取效果的因素顺序为：C（提取次数）>A（加水倍数）>B（提取时间）。表3的极差结果为A1>A2>A3，B2>B1>B3，C1>C2>C3，直观分析确定最佳提取工艺为：A1B2C1。鉴于C1与C2对实验结果的影响程度相近，为了缩短生产周期和降低成本，可将提取次数（C）由3次调整为2次；同时药物第3次提取的时候往往有效成分已经大量渗出，为缩短生产周期，降低能耗，第3次提取的时候可将提取时间设为0.5 h。综合考虑，将工艺优化为：用12，10，8倍水，提取3次，前两次提取时间为2 h/次，最后1次为30 min。
       2.1.3  验证实验以2.1.2确定的最佳工艺和优化工艺进行验证实验。结果见表4。
       表4   验证实验结果（略）
       验证实验结果表明，优化工艺与最佳工艺结果相近，且优化工艺的相对标准偏差值较小，表明优化工艺的实验结果重现性良好。
       2.2   糖康胶囊中苦瓜提取工艺拟定将苦瓜鲜品纵剖两半，去瓤，切片，采用12，10，8倍水，提取3次，前两次提取时间2 h/次，第3次为30 min，合并3次提取液，与鬼箭羽提取液混合，过滤，离心后浓缩至稠膏，加入辅料，混匀，于65℃干燥箱充分干燥后磨粉过100目筛，制粒灭菌，填充，即得糖康胶囊。
       3  讨论
       
       由于目前尚缺乏苦瓜药材相应的标准品，本提取工艺利用苦瓜总皂苷的特征显色反应，采用紫外分光光度法测定其提取液与香草醛冰醋酸溶液发生显色反应后的吸光度，并以此来评价和筛选苦瓜的提取方法。
       
       经初步预实验表明，苦瓜的乙醇和水提取液中总皂苷含量相差不大，考虑到工业生产的成本和安全性，选择以水作为苦瓜的提取溶剂。
       
       实验主要从保留苦瓜中的有效成分为出发点来进行研究。工艺条件的确定以可溶性浸出物收率、TLC检查、定量分析、药效实验四者结合来确定。其中药效实验尚存在药效指标的选择问题，同时该方法成本较高。有必要针对中药复方制剂的特点寻求一些新的制剂学工艺评价方法。
       【参考文献】
         　　［1］ 孙宝莹，孙宝全，张 朝，等．苦瓜皂苷的药效学实验研究［J］.河南中医药学刊，1994，9（6）：20.
       
       ［2］ 孙 磊．乙醇提取苦瓜皂甙的工艺研究［J］.宁夏医学杂志，2005，27(2)：112.