文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的建立更年乐胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，以C18色谱柱（5 μm，4.6mm×200 mm）；乙腈∶水（30∶70）为流动相；流速1.0 ml/min，检测波长270 nm。结果淫羊藿苷在0.204～0.816 μg范围内呈良好的线性关系，r=0.999 9。平均回收率为98.77%，RSD为1.58%。结论该方法简单、灵敏度高，可用于更年乐胶囊中淫羊藿苷的含量测定。
       
       【关键词】  更年乐胶囊； 淫羊藿苷； 高效液相色谱
       Content Determination of Icariine in Gengnianle Capsule by HPLC
       TIAN Jun, HE Fei, LU Yu
       (Anhui Institute of Materia Medica, Hefei 230022, China)
       Abstract：ObjectiveTo establish HPLC method for the determination of Icariine in Gengnianle Capsule. Methods LUNA ODS C18 BDS (200 mm×4.6 mm) was used with acetonitrile water (30∶70) as a mobile phase. The flow rate was 1.0 ml·min-1. The detecting wavelength was 270 nm. ResultsThe linear range of Icariine was 0.201～0.816 μg,r=0.999 9. The average recovery was 98.77%. Conclusion The method is simple,rapid and accurate.
       Key words：Gengnianle Capsule;  Icariine;  HPLC
       
       更年乐胶囊由淫羊藿、牡蛎、知母、金樱子、黄柏、车前子、人参等组成，具有养心养肾、调补冲任的功能。用于更年期出现的夜寐不安，心悸，耳鸣，多疑善感，烘热汗出，烦躁易怒，腰背酸痛等症。根据方中成分，选择其主药淫羊藿中的淫羊藿苷作为含量控制的指标，采用高效液相色谱法测定制剂中的淫羊藿苷。现报道如下。
       1  仪器与试药
       
       HP1100高效液相色谱仪，VWD紫外检测器，HP化学工作站。色谱柱：LUNA ODS C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；超声提取器（AS3120B）。
       
       淫羊藿苷对照品，购于中国药品生物制品检定所（含量测定用，批号0737-200011）。
       
       乙腈、甲醇为色谱纯；水为亚沸重蒸水；所用其它试剂均为分析纯。更年乐胶囊，自制，批号041020；041022；041025。
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件色谱柱为LUNA ODS C18柱分析柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相［1］为乙腈∶水（30∶70）；检测波长270 nm；流速1.0 ml/min；进样量10 μl。在上述色谱条件下淫羊藿苷与其他成分分离良好，且空白溶液无干扰，见图1～3。
       2.2  对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含淫羊藿苷50 μg的溶液，即得。
       2.3  供试品溶液的制备［2］取本品内容物细粉（过80目筛）约2.0 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇50 ml，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。
       2.4  空白溶液的制备按处方组成，取除淫羊藿外的其余药物，按制备工艺要求制成不含淫羊藿的空白对照样品，按供试品制备项下的方法制备空白溶液，分别吸取空白溶液与供试品10 μl注入液相色谱仪。结果表明，空白溶液与供试品比较，相应位置未出峰，认为无干扰。
       图1  对照品的HPLC图（略）
       图2  供试品的HPLC图（略）
       2.5  线性关系考察精密称量淫羊藿苷标准品5.1 mg置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取对照品溶液4，6，8，12，16 μl，按上述色谱条件注入液相色谱仪，记录峰面积，以峰面积积分值（A）为纵坐标，淫羊藿苷进样量（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=4164.7C-29.352,r=0.999 9。表明淫羊藿苷在0.204～0.816 μg范围内呈良好的线性关系。
       图3  空白样品的HPLC图（略）
       2.6  精密度实验精密吸取淫羊藿苷对照品溶液10 μl，连续进样5次，测得峰面积平均值为1 779，RSD为1.35%。
       2.7  重复性实验按上述供试品溶液制备方法，称取同批号样品（批号041020）5份，分别进行测定。得淫羊藿苷的平均含量为0.33 mg/粒，RSD为1.36%。
       2.8  稳定性实验取同一供试品溶液（批号041020），分别于配制后0，2，4，8，12 h依法测定，峰面积平均值为1522，RSD为2.28%，表明样品溶液在12 h内稳定。
       2.9  回收率实验采取加样回收法（按1∶1加入），精密称取已知含量的同一批号样品（041020）1.0 g共5份，分别精密加入浓度为1.1 mg/ml的淫羊藿苷对照品溶液1 ml，水浴蒸干，混合均匀，按2.3项下方法制备供试品溶液，精密吸取10 μl，注入液相色谱仪，同法测定。计算平均回收率为98.77%，RSD为1.58%（n=5）。结果见表1。
       表1  淫羊藿苷回收率实验结果（略）
       2.10  样品测定结果取3个批号(041020,041022,041025)的样品,每个批号3个样本,按样品溶液制备项下的方法提取，结果3个批号样品的淫羊藿苷平均含量分别是0.33,0.29,0.33 mg/粒。
       3  讨论
       3.1  流动相的选报参考文献［1，2］分别选择甲醇∶水（62∶38）、甲醇∶0.1 mol/L磷酸二氢钠水（52∶48）、乙腈∶水（30∶70）作为流动相进行实验，结果发现以乙腈∶水（30∶70）为流动相时，被测物分离效果较好，杂质干扰少，故选择其为本法的流动相。
       3.2  样品制备方法曾采用70%乙醇加热回流提取及50%乙醇超声提取，结果发现50%乙醇超声提取所得杂质较少，被测成分分离效果好，且操作简便，快捷，故选择本法。
       
       实验证明，该含量测定方法简单可靠，易于操作，重现性好，可作为本品的质量控制的有效方法。
       【参考文献】
         　　［1］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：545.
       
       ［2］ 苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术［M］.北京：人民卫生出版社，2000：971.