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       【摘要】 
       目的采用比色法测定天山花楸中总黄酮的含量。方法以芦丁作对照品，以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系为显色剂,检测波长为510 nm。结果线性范围为0.0103～0.0515 mg·ml-1，平均回收率为98.8%，相对标准偏差(RSD)为1.3%。结论 该法为控制天山花楸的内在质量提供了依据。
       【关键词】  天山花楸 总黄酮 比色法
       Abstract:Objective To analyze the total content of flavonoids in Sorbus tianschanica Ruper by colorimetric method.MethodsRutin was used as reference substance and the detecting wavelength was 510nm. ResultsThe linearity of flavonoids was fine in the range of 0.010 3～0.051 5 mg/ml,average recovery rate was 98.8%,RSD was 1.3%(n=5).ConclusionThe method can be used for the control of the inherent quality in Sorbus tianschanica Ruper.
       Key words:Sorbus tianschanica Ruper；  Total flavonoids;  Colorimetric method
       
       天山花楸为蔷薇科花楸属植物天山花楸Sorbus tianschanica Ruper 的嫩枝叶，为落叶乔木或灌木［1］。全世界约有80种, 我国约有50种, 主要分布在东北、西北、西南等地区,新疆地区有3种，主要分布在新疆哈密至伊犁的天山山脉里。用于治疗慢性气管炎、肺结核、哮喘、咳嗽、水肿、胃痛，具有平喘及依赖性地抑制心肌收缩和保护心肌缺血等病症［2］。天山花楸味甘苦，性平，具有补脾生津的作用。民间常以嫩枝叶，果实和茎皮入药用［3］。为了进一步开发和利用其药用价值，本实验对天山花楸的总黄酮含量进行了测定，目前尚未见相关报道。
       1  仪器与试剂
       
       TU1800型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；电热恒温水浴锅（型号：HHS4）；电子天平（型号：AB104N）； 芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供，亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。
       
       天山花楸野生，200507采集于新疆米泉铁仓沟，经新疆医科大学生药学教研室帕丽达教授鉴定为Sorbus tianschanica ruper的嫩枝叶。
       2  方法与结果
       2.1  天山花楸黄酮类化合物的提取取天山花楸2.5 g精密称定，置100 ml圆底烧瓶中，加入甲醇50 ml，回流2 h，滤过，提取液置100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，待用。
       2.2  标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品10.3 mg,置100 ml容量瓶中，加入甲醇70 ml，置水浴中微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为0.103 mg·ml-1的标准溶液。精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，置10 ml量瓶中，分别加甲醇5 ml，再分别加5%NaNO2溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min；再加10%Al（NO3）3溶液0.3   ml，摇匀，放置6 min；再加10%NaOH溶液4.0 ml，摇匀，室温放置15 min。在510 nm波长处测定吸光度，同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵坐标，溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。
       2.3  测定波长的选择精密吸取3.0 ml芦丁,余下部分按2.2项下方法操作，在紫外-可见分光光度计上，波长400～800 nm扫描，确定最大吸收波长为510 nm。
       2.4  标准曲线与回归方程结果表明，芦丁标准溶液浓度在0.010 3～0.515 mg·ml-1范围内，线性关系良好。得到回归方程：A=10.246C-0.075，相关系数r=0.997 9。
       2.5   天山花楸总黄酮含量的测定精密量取样品溶液2 ml，置10 ml量瓶中，余下部分按2.2项方法操作，在510 nm波长处平行测定5次，同以样品空白做参比。根据回归方程，计算总黄酮浓度。根据公式：总黄酮含量=（黄酮化合物质量/样品质量）×100%，得天山花楸总黄酮含量。结果见表1。
       表1  天山花楸总黄酮含量测定结果（略）
       2.6  精密度实验取一定质量浓度的供试品溶液，按2.2项显色，连续测定5次。结果见表2，采用本法测定天山花楸总黄酮含量，精密度良好，其相对标准偏差RSD为0.3%。
       表2  精密度实验结果（略）
       2.7   稳定性实验取对照品溶液及供试品溶液，按2.2项显色，于室温分别放置0，15，30，45，60 min，测定对照品及供试品溶液吸光度，其RSD分别为1.3%，0.9%。表明对照品及供试品溶液在1 h内稳定。结果见表3。
       2.8   回收率实验精密称取已知量的天山花楸6份，分别精密加芦丁对照品适量，按2.2项下方法测定，平均回收率为98.8%，RSD为1.3%。结果见表4。
       表3  稳定性实验结果（略）
       表4  回收率实验结果（略）
            3  讨论
       
       本法采用甲醇回流提取天山花楸中总黄酮，以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系为显色剂，利用分光光度法测定总黄酮，操作简便，重现性好，结果可靠,为天山花楸的质量控制提供了可行的方法。
       【参考文献】
         　　［1］ 新疆植物志编辑委员会.新疆植物志，第2卷，第2分册［M］.乌鲁木齐：新疆人民出版社，1973：62.
       
       ［2］ 艾买提江·阿依浦别克，开丽曼·达吾提，陈 坚.花楸属药用植物的自然资源初探［J］.中国民族医药杂志，2004，10(3)：18.
       
       ［3］ 新疆维吾尔自治区卫生厅.新疆维吾尔自治区药品标准［S］.1987：14.