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       【摘要】 
       目的探讨乌桕根皮水提物的抗菌活性以及不同温度条件下的提取物抗菌活性差异。方法采集乌桕根皮，在3种不同温度（60，80，100℃）下用水回流提取，提取物浓缩后进行抗菌测试，受试菌：枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和志贺氏杆菌。结果水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌具有抑制作用，对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌没有活性；不同温度下的提取物对大肠杆菌和志贺氏杆菌的影响较大，提取温度为100℃时，提取物对这两种细菌的抑制作用最强，抑菌圈直径分别为（9.67±1.32)mm和（11.67±1.00)mm。结论 乌桕根皮在湖南和广西民间治疗由大肠杆菌引起的腹泻和志贺氏杆菌引起的痢疾确有很好的疗效。
       【关键词】  乌桕根皮 水提物 抗菌活性
       Abstract:ObjectiveTo evaluate the antibacterial activity of water extracts from root bark of Sapium sebiferum against 5 bacterial species and the effects of extract temperature on the antibacterial activity.MethodsRoot bark of Sapium sebiferum was collected and extracted by water at different temperatures. The extracts were concentrated in rotary evaporators. Antibacterial activities of the concentrated extracts were tested against 5 bacterial species.ResultsThe water extracts inhibited the two bacteria, Escherichia coli and Shigae sonnei, but did not inhibited the growth of the other three bacteria, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. Moreover, the antibacterial activity was influenced by extract temperature, and at temperature of 100℃, the extracts displayed the largest inhibition zone(9.67±1.32)mm (agaist E.coli) and (11.67±1.00)mm(agaist Sh.sonnei).ConclusionIn Hunan Province and Guangxi Autonomous Region, root bark from S.sebiferum was used effectively as ethnic medicine against diarrhea caused by E.coli and against Shigellosis caused by shigae.
       Key words:Root bark of  S. sebiferum；  Water extracts；  Antibacterial activity
       
       乌桕Sapium sebiferum别名桕子树，属大戟科落叶乔木，为亚热带树种。对乌桕叶和茎皮的药用价值及抗菌活性已经有人研究过［1，2］，乌桕根皮具有泻热毒，通二便等功能［3］，而对乌桕根皮的抗菌研究相对较少。为了弥补这方面的不足，对乌桕根皮水提物的抗菌活性进行初步研究。
       1  材料与方法
       1.1   药材 乌桕根皮采自湖北省宜昌市猇亭区,时间为2006年7月，8月和12月。乌桕根皮洗净后，在通风橱内晾干，备用。
       1.2  提取方法 称取200 g干燥的乌桕根皮，将其粉碎, 加水1 200 ml，分别在60℃，80℃和100℃时回流提取1 h，过滤，收集滤液。向滤渣中加500 ml水再回流提取30 min，过滤，合并两次滤液。将滤液依次用0.45 μl和0.2 μl过滤后真空浓缩至浸膏。保存在4℃冰箱内待用。
       1.3  菌种及培养  病原菌：金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌由湖北省宜昌市中心医院从临床分离所得，志贺氏杆菌由湖北省宜昌市疾病预防控制中心提供，枯草杆菌由本校化生学院微生物学实验室提供。普通肉汤培养基购自广东环凯微生物科技有限公司。
       
       实验菌种经传代纯培养后,取1接种环菌种接种于普通肉汤培养基中, 37℃恒温箱培养12 h, 使受试菌处在对数生长期即对药物最敏感期。
       1.4  抑菌实验的方法 抑菌测试采用Lehre等［4］的双层琼脂纸片方法，略有改变。下层琼脂培养基凝固后，再倒入上层琼脂培养基（内含有实验菌株100 cfu/ml）。不同温度水提物的浓缩浸膏用水稀释至20 mg/ml，将灭过菌的小滤纸片（直径6 mm）分别浸透不同的药液，用浸泡灭菌水的滤纸片作对照。用不锈钢镊子将滤纸片放置于培养皿中，每皿（培养皿直径10 cm ）7片。每组实验重复3次。抗菌强弱以抑菌圈直径大小（除去滤纸片直径）表示。
       1.5  数据处理  采用SPSS 12.0 for Windows （One-Way ANOVA）软件对多次抗菌测试结果进行均值分析，实验数据以±s表示。
       2  结果
       
       将培养皿置于37℃培养24 h，观察抑菌效果，记录各个抑菌圈直径（mm），然后用SPSS 12.0 for Windows软件分析。结果见表 1。
       表1  提取物对受试菌的抑菌效果（略）
       2.1   乌桕根皮水提物对受试菌的抑制作用  由表1可知，根皮水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌具有抑制作用，而对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和绿脓杆菌没有抑制活性。这就证明了在湖南和广西民间能够用乌桕根皮来治疗腹泻和痢疾的道理。
       2.2   不同温度的水提取物对受试菌的抑制作用  由表 1还可以得知，对于不同温度的水提物，抑菌圈的直径变化较大。随着提取温度从60℃升至100℃，根皮水提物的抑菌活性增强，在100℃提取时，水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌的抑制作用最强，抑菌圈直径分别为：（9.67±1.32） mm和（11.67±1.00）mm。这说明民间使用乌桕根皮治疗腹泻和痢疾时，用水煮的方法比较合适。
       3  讨论
       
       随着耐药菌株的不断增加，寻找新型的抗菌药更加显得重要，所以许多科技工作者投身于这方面的研究［5］。乌桕根皮作为民间药材，发掘其药用潜力具有一定的应用意义。本文所涉及的工作只是乌桕根皮药用成分研究的开端，抗菌活性物质的进一步分离纯化及其结构解析将有助于人们更好地利用这一植物资源。
       【参考文献】
         　　［1］ 张世琏, 刘建超, 杨光忠, 等. 从植物中寻找农药活性物质-乌桕化学成分的研究（Ⅱ）［J］. 华中师范大学学报(自然科学版), 1995, 29 (4)：477.
       
       ［2］ 霍光华, 高荫榆. 陈明辉. 乌桕叶抑菌活性功能成分的研究［J］. 食品与发酵工业, 2005, 31(3)：52.
       
       ［3］ 罗献瑞. 实用中草药彩色图集（第三册）［M］.广州：广东科技出版社, 2004：128.
       
       ［4］ Lehrer R I, Rosenman M, Harwig S S S L. Ultrasensitive assays for endogenous antimicrobial polypeptides［J］. Journal of Immunological Methods, 1991,137:167.
       
       ［5］ 朱 明, 熊元君, 马秀敏, 等. 毛金丝桃提取物的体外抗菌实验［J］. 时珍国医国药, 2006, 17(9)：1693.