文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的研究心安宁传统合煎液与其经过分煎制成的免煎配方颗粒混合物的化学成分的差异。方法采用高效液相色谱（HPLC）指纹图谱法，比较心安宁免煎配方颗粒和心安宁汤剂两者指纹图谱的差别，并通过相似度软件分析两者的相似性。结果心安宁配方颗粒中共出9个色谱峰，心安宁合煎液和混合免煎配方颗粒指纹图谱的相关系数为0.883。结论 心安宁合煎液同其分煎制成的免煎配方颗粒中的主要化学成分组成基本相同，其共有成分比例相近。
       【关键词】  心安宁 指纹图谱 高效液相色谱
       Abstract：ObjectiveTo study the difference in main chemical composition between Traditional Herbs Decoction and Compatible Granules of Xin"anning. MethodsHPLC and Fingerprints were used.ResultsThere were 9 peaks in the fingerprints of Compatible Granules of Xin"anning. The correlation of both HPLC fingerprints was 0.883.ConclusionThe main chemical substances and the composition"s ratio of Traditional Herbs Decoction and Compatible Granules of Xin"anning are similar.
       Key words：Xin"anning;  Fingerprints；  HPLC
       
       中医药作为中国传统医药学，经过了几千年的临床验证，建立了一套完整的理论体系。临床上中医用药，自古以来多以汤剂为主，以饮片作为原料，它具有组方灵活，随证加减，易于吸收，起效较快等特点，最能反映中医特色和医生专长。但由于患者需自己加工煎煮，费时、费力，且有剂量、质量不稳定，储存、携带不便等多方面的问题，不符合现代人的要求，在国际上更难以被接受，影响了中医药的进一步发展。中药饮片急需改革，故配方颗粒应运而生［1］。它突破了传统中药饮片混合煎煮的应用形式，具有免煎易服、作用迅速、安全卫生、携带方便等优点，既满足了临床辨证论治、随证加减的需要，又有利于药房调剂和药材资源的深度开发及中药的标准化和国际化［2］。但是否这种复方分煎的配方颗粒完全等同于与传统的合煎液呢？是否产生差异不能一概而论，复方合煎过程中各味药是否相互作用也需要化学理论和实验数据的支持。本实验以心安宁处方为基准，考察了该方“分煎”与“合煎”的化学成分的变化，为解决免煎配方颗粒能否替代传统水煎液提供一定的理论依据［3～8］。
       
       心安宁为江苏省中西医结合医院临床常用的经验方，由葛根、何首乌、山楂、珍珠粉4味药组成。功能为补益肝肾、消脂导浊，用于高脂血症。
       1  仪器与试药
       1.1  仪器Waters高效液相色谱仪（Alliance 2695四元泵及自动进样系统，996二极管阵列检测器，Empower色谱工作站）；KQ250E型医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）； Millipore纯水器。
       1.2  试药葛根素、二苯乙烯苷对照品均由中国药品生物制品检定所提供，批号为（752200108，0844－9801），甲醇为色谱醇，水为超纯水，配方颗粒及药材由江阴天江药业有限公司提供。
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件色谱柱：Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：起始甲醇0.5%冰醋酸（5∶95），10 min时，线性变化至甲醇0.5%冰醋酸（15∶85），60 min时，线性变化至甲醇0.5%冰醋酸（55∶45），62 min时，线性变化至甲醇0.5%冰醋酸（95∶5），65 min时，线性变化至甲醇0.5%冰醋酸（5∶95），梯度结束平衡后20 min进入下一个样品分析；流速1.0 ml/min；柱温35℃；进样量20 μl。
       2.2  供试品溶液的制备
       2.2.1  心安宁合煎剂按心安宁配伍量，精密称取饮片，加入10倍量蒸馏水煎煮2次，过滤，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇适量，超声提取30 min，过滤，滤液浓缩并定容至10 ml,取上清液，滤过，取续滤液，即得。
       2.2.2  心安宁混合配方颗粒按心安宁配伍量，精密称取各配方颗粒，混合均匀，加甲醇10 ml，超声提取30 min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
       2.2.3  药材取饮片，精密称定，加甲醇10 ml，超声提取30 min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
       2.2.4  配方颗粒取配方颗粒，精密称定，加甲醇10 ml，超声提取30 min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。
       2.3  最佳检测波长的选择 利用二极管阵列检测器的特性，对210～400 nm每隔10 min分别观察指纹图谱，结果270 nm波长所得的图谱基线较稳，分离较好，紫外响应值合适，且反映的信息较多，故选择270 nm为测定波长。
       2.4   精密度实验取心安宁配方颗粒供试品溶液，连续进样5次，对主要的9个色谱峰，进行了考察，计算峰面积的RSD和保留时间的RSD，结果各峰的峰面积和保留时间的RSD均小于5%。
       2.5  结果
       2.5.1  指纹图谱中各峰的确认以270 nm为检测波长，从心安宁配方颗粒液、药材合煎液的色谱图中共分辨出8个峰，经过与相同波长条件下对单味配方颗粒、单味药材提取液的色谱比较，确认其中3～7，9号峰属于葛根的峰，3号峰为葛根素峰；1，8号峰属于何首乌颗粒的峰，其中8号峰为二苯乙烯苷峰；2号峰属于山楂的峰。
       2.5.2  心安宁合煎液和混合免煎配方颗粒指纹图谱的比较从整体角度及直观分析判断，心安宁合煎液和混合免煎配方颗粒的指纹图谱相似性较高（见图1），两者共有1～9号峰，其中都包括3号葛根素和 8号二苯乙烯苷的峰，两者相似度较高。但从图1中来看，2号峰混合配方颗粒的相对峰面积要高于合煎液。于是应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版（中国药典委员会）对两者的相关性进行分析,分析结果为两者的相关性为0.883。
       图1  心安宁合煎液和配方颗粒提取物的HPLC指纹图谱（略）
       3  讨论
       
       配方颗粒生产与实验用药材为同一批次药材，以排除由于药材不均一而引起色谱图的差异。
       
       从配方颗粒和合煎液指纹图谱比较的结果来看，由于2号峰为山楂所有的峰，且 2号峰在配方颗粒的相对峰面积要高于合煎液，可以说明心安宁的药材在合煎过程中破坏了山楂中某些成分，或者是抑制了该成分的溶出。
       
       在实验中同时比较了方中葛根、何首乌、山楂药材和配方颗粒的指纹图谱，并对各自的相关性进行了分析，结果各药材和配方颗粒的相关性分别为0.829，0.988，0.359。通过上述相关性的分析，更进一步说明了心安宁配方颗粒与合煎液间的差异主要来源于山楂。
       
       心安宁合煎和配方颗粒虽然在化学成分上有少量的变化，但两者的相似度依然较高，对分析中药方剂的应用原理具有积极的意义，但想要确定心安宁免煎配方颗粒是否能完全替代合煎液，还有待大量实验研究工作要做。
       【参考文献】
         　　［1］ 胡淑凤,王新玲,柴建玲.配方颗粒疗效与应用方法探讨［J］.中国医药卫生，2005，6(9)：84.
       
       ［2］ 张建眷,王少臣,胡 浩.中药颗粒剂研究概况［J］.中国现代医学与临床，2005，3(2)：30.
       
       ［3］ 刘 韶，雷 鹏，李新中，等.黄连解毒汤饮片汤剂和颗粒汤剂的指纹图谱比较［J］.中国药师，2005，8（2）：117.
       
       ［4］ 史万忠，徐德生，刘 力，等.补肾方分煎和合煎提取物的指纹图谱比较［J］.中成药，2004，26（1）：7.
       
       ［5］ 胡 柳，栾连军，程翼羽.复方有效部位与组方药材指纹图谱色谱峰相关性研究［J］.中国药学杂志，2004，39（12）：895.
       
       ［6］ 杨文宇，张 艺，李 玲，等.灯盏细辛注射液和灯盏花素的HPLC-DAD对比分析［J］.中成药，2005，27（2）：202.
       
       ［7］ 邓轶渊，高文远，陈海霞，等.中药复方合煎与分煎的差异性研究进展［J］.中草药，2005，36（12）：1909.
       
       ［8］ 王 政，谢素治.中药配方颗粒和传统饮片的化学成分及药效学研究概述［J］.海峡药学，2004，16（2）：78.