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       【摘要】 
       目的比较鸡骨草、毛鸡骨草不同部位总皂苷的含量，为鸡骨草和毛鸡骨草的开发利用提供依据。方法采用比色法测定鸡骨草，毛鸡骨草不同部位总皂苷的含量。结果鸡骨草不同部位总皂苷的含量分别为：根为0.817%，茎为0.599%，叶为0.939 %；毛鸡骨草不同部位总皂苷的含量分别为：根为 0.995%，茎为0.507%，叶为0.882%。结论鸡骨草茎、叶中总皂苷的含量比毛鸡骨草中的高，但鸡骨草根中总皂苷的含量比毛鸡骨草中的低。
       【关键词】  鸡骨草； 毛鸡骨草； 总皂苷； 不同部位
       Comparison of the Content of Total Saponins in Different Parts between Abrus cantoniensis  and  Abrus mollis
        HU Yan1, ZHANG Zhixin1,ZHANG Tie1,LUO Yongming2
        （1.Department of Biochemistry, Wenshan Normal College, Wenshan 663000, China; 2.Guangxi Agriculture Vocational Technical College, Nanning, 530007, China）
        Abstract：ObjectiveTo comparative the content total saponins of in different parts between Abrus cantoniensis and Abrus rnollis, in order to provide basis for utilization of two types of Chinese herbal medicine. MethodsThe content of total saponins in diferent parts of Abrus cantoniensis and Abrus rnollis was determined by UV-visible spectrophotometer．ResultsThe content of total saponins in Abrus cantoniensis were respectively as follows: 0.817% in roots，0.599% in stems ，0.939% in leaves. The content of saponins total in Abrus rnollis were 0.995% in roots，0.507% in stems ，0.882% in leaves ，respectively. Conclusionthe total saponins content in stems and leaves of Abrus cantoniensi are higher than those of Abrus rnollis, but the content of tooal saponins in roots of Abrus cantoniensi is lower than that of Abrus rnollis.
        Key words：Abrus cantoniensis；  Abrus rnollis ;   Total saponin;   Different part
        鸡骨草为豆科相思子属植物广州相思子Aburs cantoniensis Hance的全草［1，2］，主产广西、广东等省区，其中广西产量最大。鸡骨草的药用价值很高，性凉味甘淡，有清热利湿、解毒、疏肝止痛、活血化瘀等功效，用于治疗急性和慢性肝炎、肝硬化腹水、胆囊炎、胃痛、风湿跌打痛、毒蛇咬伤、乳腺炎等多种疾病［3，4］。鸡骨草常用于中药配方和作为多种中成药的主要生产原料，也是广东、广西等省区的主要出口创汇药材之一。毛鸡骨草为同属植物毛相思子Abrus mollis Hance 的全草，是治疗肝炎药物“鸡骨草胶囊”的主要原料，被作为鸡骨草的代用品。
        药材皂苷类成分在免疫调节、延缓衰老、抗肿瘤等方面有很强的药理作用［5］。有关研究表明，鸡骨草粗皂苷对治疗四氯化碳所致的肝损伤有效［6］。宫尾英男等［7］从鸡骨草中分离出三萜皂苷，并做了药理实验，认为鸡骨草三萜皂苷具有一定的保肝护肝作用。本实验以齐墩果酸标准品为对照，采用超声提取和香草醛-高氯酸比色法测定鸡骨草、毛鸡骨草中不同部位中总皂苷的含量并比较其差异，以期为这两种中药材的开发利用提供实验依据。
           1  器材
        1.1  药材鸡骨草、毛鸡骨草种子购于广西药用植物园，种植于广西大学农学院教学科研基地，鸡骨草、毛鸡骨草的栽培管理措施相同。
        1.2  仪器与试剂岛津UV-1206紫外可见分光光度计；UV-1601紫外-可见分光光度计（澳大利亚生产）；KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；1702-电子自动分析天平（德国生产）；LSY-电热恒温水浴锅；微型植物粉碎机；索氏提取器。实验所用试剂均为国产分析纯试剂；齐墩果酸对照品购自中国药品生物制品检定所。
           2  方法与结果
        2.1  取样的方法在12月17日取样，把连根挖取的鸡骨草、毛鸡骨草去泥，绑成捆，放入烘箱中，105℃杀青30 min，60℃恒温干燥至恒重，取出，分根、茎、叶粉碎，过60目筛，用于测定总皂苷的含量。
        2.2  鸡骨草、毛鸡骨草中总皂苷含量的测定参照高山林［8］的方法提取和项昭保等［9］的方法测定，并略作修改。
        2.2.1  供试品溶液制备精密称取鸡骨草粉（或者毛鸡骨草粉）1.00 g，用滤纸包好，置索氏提取器中，用石油醚( 60～90℃)水浴回流脱脂。待完全脱脂后，取出鸡骨草（或者毛鸡骨草）滤纸包，挥干石油醚后，置于100 ml锥形瓶中，加40 ml 95%的甲醇，超声提取4次，50 min/次，合并提取液过滤，水浴蒸干，加少量水溶解残渣，过滤，滤液用40 ml水饱和正丁醇萃取3次，取正丁醇层，合并，水浴蒸干正丁醇，用少量甲醇溶解残渣，转移到容量瓶并定容至5 ml，即得鸡骨草（或者毛鸡骨草）供试品溶液。
        2.2.2  标准曲线的制备精密称取120℃干燥至恒重的齐墩果酸标准品5  mg,加甲醇溶解并定容5 ml容量瓶，得1 mg/ml标准液，分别吸取0，60，120，180，240 μl置于10 ml具塞试管中，自然挥干（或在70℃水浴蒸干）后各加5%香草醛（香兰素）冰醋酸溶液（5g香草醛溶于100 ml冰醋酸中）0.2 ml，高氯酸0.8 ml， 摇匀，置60℃水浴中加热15 min，冷却至室温，各加醋酸乙酯4.0 ml，摇匀，于UV-1601型紫外-可见分光光度计上，在400～800 nm范围内进行扫描，在550 nm处有最大吸收，故选择波长为550 nm测定上述各系列溶液。测定结果见表1。以吸光度为纵坐标，以样品浓度为横坐标绘制标准曲线，其回归方程为：Y=0.0338 5X-0.005 4，R2=0.999 9，在0～48 μg/ml范围内有良好的线性关系。
        2.2.3  样品含量测定用微量进样器吸取鸡骨草（或者毛鸡骨草）供试品溶液80 μl（空白对照加80 μl蒸馏水），置于干净干燥试管中，70 ～80 ℃水浴蒸干，取出，各试管依次加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml，摇匀，于70 ℃水浴保温15 min，取出流水冷却至室温，加入4 ml醋酸乙酯，摇匀，用岛津UV-1206型紫外-可见分光光度计，于550 nm处测定供试品溶液的吸光度。以齐墩果酸为评价指标，用回归方程计算总皂苷含量。结果见表2。表1  齐墩果酸浓度与吸光值的关系
        2.3  鸡骨草、毛鸡骨草根、茎、叶中总皂苷的含量结果见表2。表2  鸡骨草、毛鸡骨草根、茎、叶总皂苷含量不同的小写字母表示差异达显著水平(α=0.05),不同的大写字母表示差异达极显著水平(α=0.01)
        2.4  测定方法的可行性
        2.4.1  精密度实验  精密吸取鸡骨草或者毛鸡骨草同一种供试溶液80μl，按“2.2.3”项的方法测定，重复测定8次，测定结果为：鸡骨草总皂苷含量的RSD=1.75%，毛鸡骨草总皂苷含量的RSD=1.80%，表明测定仪器较为精密、误差小，测定结果真实可信。
        2.4.2  稳定性实验取鸡骨草或者毛鸡骨草同一种供试溶液80μl进行测定，每隔20 min测定1次吸光度值，测得鸡骨草总皂苷含量的RSD=2.18%，吸光度值在2 h内基本不变；毛鸡骨草总皂苷含量的RSD=2.27%，吸光度值也在2 h内基本不变。表明该显色测定方法形成的络合物较稳定，显色后在较长时间内测定结果无明显差异。
        2.4.3  重复性实验取鸡骨草或者毛鸡骨草样品各6份，依样品含量测定步骤重复测定，测得鸡骨草总皂苷含量RSD=1.75 %，毛鸡骨草总皂苷含量RSD=1.32 %，表明该显色测定方法重复性好、误差小。
        2.4.4  回收率实验分别取已知总皂苷含量的鸡骨草或者毛鸡骨草供试品液各5份，各加入同一浓度的标准品溶液20 μl，按样品测定方法进行测定，依回归方程计算质量分数，测得鸡骨草总皂苷含量的平均回收率为103.8%，RSD=1.75%，毛鸡骨草总皂苷含量的平均回收率为101.65%，RSD=1.58%，表明该测定方法能对目标成分充分显色，回收率高。
           3  讨论
        黄荣韶等［10，11］的研究认为，鸡骨草、毛鸡骨草的最佳采收期为12月，此时皂苷含量最高，田间生物产量达最大，容易获取较高的经济效益，也与传统习惯的采收期相吻合。我们在这一时期采样分析鸡骨草、毛鸡骨草中不同部位总皂苷的含量，并对其数据进行方差分析，其结果表明，鸡骨草、毛鸡骨草不同部位总皂苷含量之间有显著性差异，用最小显著差数法（LSD法）进行多重比较。从表2中看出，鸡骨草不同部位总皂苷的含量分别为：根为0.817 %，茎为0.599%，叶为0.939%；毛鸡骨草不同部位总皂苷的含量分别为：根为 0.995%，茎为0.507%，叶为0.882%。多重比较结果表明，鸡骨草茎中总皂苷的含量极显著高于毛鸡骨草茎中总皂苷的含量，并且，鸡骨草叶片中总皂苷的含量显著高于毛鸡骨草叶中总皂苷的含量，而毛鸡骨草根中总皂苷的含量显著高于鸡骨草根中总皂苷的含量。
        关于鸡骨草、毛鸡骨草不同部位中总皂苷的含量未见报道。我们的研究表明，鸡骨草不同部位中总皂苷的含量不相同，表现为叶＞根＞茎；毛鸡骨草不同部位中总皂苷的含量也不相同，表现为根＞叶＞茎。比较鸡骨草、毛鸡骨草不同部位中总皂苷的含量，我们得出这样的结论，鸡骨草叶片、茎中总皂苷的含量比毛鸡骨草叶片、茎中总皂苷的含量高，但是，毛鸡骨草根中总皂苷的含量比鸡骨草根中总皂苷的含量要高。毛鸡骨草作为鸡骨草的代用品，它与鸡骨草相比在栽培上具有抗性强，生长快，生物产量高，栽培管理简单等优点，具有潜在的开发价值。研究鸡骨草、毛鸡骨草不同部位中总皂苷的含量，可为鸡骨草、毛鸡骨草的开发利用提供参考。
       【参考文献】
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       ［2］ 《中华本草》编委会.中华本草［M］.上海：上海科学技术出版社,1999,4：303.
       
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       ［7］ 宫尾英男［日］. 鸡骨草中三萜皂甙槐花皂甙III和大豆皂甙I对AST和ALT的作用：对接触CCl4 1h大鼠肝细胞转氨酶升高的影响［J］. 国外医学·中医中药分册，1999,21(3)：45.
       
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       ［11］ 黄荣韶,罗永明,胡 彦,等.毛鸡骨草总皂甙含量测定及其动态变化研究［J］. 广东农业科学,2006,6:28.