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       【关键词】  红毛五
        摘要：目的：比较红毛五加多糖和香菇多糖对体外人胃癌细胞增殖的抑制作用。方法：采用体外细胞培养计数法。结果：红毛五加多糖和香菇多糖对体外人胃癌细胞增殖均有显著性抑制作用(P＜0.05)，且红毛五加多糖作用强于香菇多糖 (P＜0.05)。结论：红毛五加多糖对胃癌可能有一定防治作用。
        关键词：红毛五加多糖；香菇多糖；胃癌
        Comparison of the Inhibitory Effect of Polysaccharrides Between Acanthopanax giraldii Harms and Lentinan on the Proliferation of the Human Gastric Cancer Cell in Vitro
        GUO Hui1, ZHANG Hongxu1, WANG Hui2, XIA Wenbin3, YANG Yongjian3
        (1.The Third People"s Hospital of Xuzhou City; Xuzhou 221005, China; 2.The Medical College of Xuzhou; Xuzhou 221002, China; 3.The Medical College of Lanzhou; Lanzhou 730000, China)
        Abstract:Objective:To compare the inhibitory effect of polysaccharrides between Acanthopanax giraldii Harms (AGP) and Lentinan on the proliferatoion of the human gastric cancer cell in vitro.Methods:In vitro culture cell number count assay was adopted.Results:Compared with the blank control group, both polysaccharrides of Acanthopanax giraldii Harms (AGP) and Lentinan significantly inhibited the proliferation of the human gastric cancer cell in vitro (P＜0.05).Conclusion:AGP may have some efficacy on the prevention and cure of the gastric cancer.
        Key words:Acanthopanax giraldii Harms polysaccharrides;Lentinan;Gastric cancer
        胃癌是严重威胁着人类健康的常见癌症之一［1］。近年来，国内外已研制出许多有效的抗癌药物，并且许多研究者已经开始关注开发天然植物中具有抗癌作用的某些活性成分。红毛五加多糖(AGP)是五加科五加属红毛五加Acanthopanax giraldii Harms的茎皮水溶性提取物，据《神农本草经》记载，红毛五加皮民间已有2000多年的用药史。国内外研究结果表明，红毛五加茎皮具有抗炎、免疫调节作用，其所含多糖成分有抗肿瘤作用［2～6］。研究表明红毛五加多糖对体内S180实体瘤具有显著抑制作用［7］，对体外培养人白血病粒细胞K562具有严重破坏作用［8］。本实验进一步研究了红毛五加多糖对胃癌细胞株MGC803增殖的抑制作用。
        1材料和仪器
        1.1实验样品红毛五加茎皮由兰州大学药学院提供，经植物分类学教授赵汝能鉴定其为Acanthopanax giraldii Harms。红毛五加多糖(AGP)是红毛五加茎皮经水提醇沉、脱蛋白、透析、柱色谱分离纯化后得到的多糖成分，纯度不低于80%：香菇多糖由南京蓝本科技有限公司赠送，纯度不低于80%。
        1.2细胞株人胃低分化腺癌细胞株MGC803，由徐州医学院免疫教研室提供。
        1.3主要试剂和仪器KPMI1640培养基：SIGMAALDRICH CO.，LTD..Lot＃ 0304：24Well Culture Cluster:Made in USA,Corning lncorporated 3599;CO2孵箱：SHELLB产品，MODEL TC2323型；光学显微镜：华东电子集团医疗装备有限责任公司，XSP18A型。
        1.4实验分组实验分5组。空白对照组：不加任何处理的培养液，仅用RPMI1640；香菇多糖阳性对照组：将香菇多糖用生理盐水溶解，以1.0%(V/V)加入培养液中，使其终浓度为4.0×105mol・L1；三个剂量实验组：将红毛五加多糖用生理盐水溶解，以1.0%(V/V)加入培养液中，使其终浓度为1.0×104，4.0×105，1.6×105mol・L1。
        1.5细胞计数检测结果设上述5个组，每组设4个平行孔，取对数生长期的细胞，调整细胞浓度为2.0×104个/ml，接种于24孔培养板内，每孔0.5 ml；细胞接种后培养24 h，空白对照组加入培养液0.5 ml，香菇多糖阳性对照组加入含4.0×105mol・L1香菇多糖的培养液0.5 ml，实验组分别加入含1.0×104，4.0×105，1.6×105mol・L1红毛五加多糖的培养液0.5 ml，继续培养；于加入红毛五加多糖后24，48，72，96 h，台酚蓝染色(终浓度0.2%)，在血球计数板上计数活细胞，每孔计数2次，计算各组的胃癌细胞增殖抑制率。结果见表1。
抑制率=空白对照组4天细胞总数-实验组4天细胞总数〖〗空白对照组4天细胞总数×100%
        1.6统计学方法各组实验统计资料以均数±s表示，组间显著性差异通过t检验方法，显著性差异以P＜0.05表示。
           2结果
        与空白对照组相比，AGP组和香菇多糖组均能显著抑制人胃癌细胞的增殖(P＜0.05)，而且AGP组抑制作用明显强于香菇多糖组，统计学有显著性差异(P＜0.05)。另外，AGP组抑制作用有明显的量效关系，即AGP最高剂量、次高剂量均显著抑制胃癌细胞株MGC803的增殖(P＜0.05)。结果见表1。
           3讨论
生长曲线体现胃癌细胞在培养过程中动态增殖变化，因此它已经被用来检测药物抑制作用的时间效应和剂量效应。AGP在对人胃癌细胞的体外量效抑制实验可以很好地控制实验条件，且快速、简便、经济。采用人体来源的细胞实验结果更适用于人，同时易于进行机理研究；由于细胞失去了神经、体液的调节，药物也未经体内吸收、分布、代谢，因此肿瘤细胞在体外和体内对药物的反应性可能存在不一致，尚需进一步进行体内实验加以确证。
        表1红毛五加多糖对体外人胃癌细胞增殖的影响(±s)（略）
        但是，香菇多糖已广泛用于癌症的防治，我们的实验结果表明红毛五加多糖抑癌作用强于香菇多糖，因此AGP用于胃癌的防治具有一定的理论依据。
           参考文献：
        ［1］Yanai H,Noguchi T,Mizumachi S.Adenovicus mediated P53 Iumor suppressor gene therapy for human gastric cancer cells in vitro and in vivo［J］.Gnt1999 Mar44(3):366371.
        ［2］沈映君，冷怀瑛，黄国钧，等.红毛五加皮的药理研究［J］.成都中医学院学报，1983，(4)：4348.
        ［3］王满霞，张莅峡，刘弘，等.红毛五加茎皮多糖对体外培养人白血病粒细胞生物学效应的研究［J］.中国组织化学与细胞化学杂志，1994，1(3)：7275.
        ［4］江之泉，章崇杰，汪成孝，等.红毛五加多糖对小鼠的免疫增强作用［J］.华西药学杂志，1993，8(4)：211213.
        ［5］王满霞，张莅峡，刘弘，等.红毛五加茎皮多糖对机体免疫功能的影响［J］.中药材，1994，17(5)：3538.
        ［6］张文智，张乃哲，陈秀鉴.刺五加多糖和GST对实验性肝癌影响的病理学研究［J］.肿瘤防治研究，1997，24(2)：7880.
        ［7］陈萍，张莅峡，刘弘，等.红毛五加抗肿瘤及免疫作用［J］.中国药学杂志，1993，28(6)：351353.
        ［8］王满霞，张莅峡，刘弘，等.红毛五加茎皮多糖对体外培养人白血病粒细胞超微结构影响的观察［J］.中国中医基础医学杂志，1999，5(3)：2929.
        (1.江苏省徐州市第三人民医院221005；2.徐州医学院，江苏 徐州221002；3.兰州医学院，甘肃 兰州730000)