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       【摘要】 
       目的比较藏党参和潞党参中活性成分——多糖和皂苷的含量。方法 以分光光度法分别测定药材中多糖和皂苷的含量。结果藏党参和潞党参中多糖的含量分别为24.32%，18.25% ；皂苷的含量分别为3.02%，2.48%，表明藏党参中多糖和皂苷的含量都明显高于潞党参——多糖含量是潞党参的1.33倍，皂苷含量是潞党参的1.22倍。结论藏党参中多糖和皂苷含量丰富，具有较高的开发利用价值，此为藏党参的质量评价及开发利用提供了更为可靠的实验数据。
       【关键词】  藏党参(长花党参)； 潞党参； 多糖； 皂苷
       
       Comparison of the Contents of Polysaccharide and Saponins in Codonpsis thalictrifolia Wall. and Codonopsis pilosula （Franch．） Nnannf.
       WANG Lifan, ZHENG Juan, XU Sifan*
       （Central University for Nationalities, Institute of Chinese Minority Traditional Medicine, Beijing, 100081 China）
       Abstract：ObjectiveTo compare the contents of polysaccharide and saponins in Codonpsis thalictrifolia Wall. and Codonopsis pilosula (Franch．) Nnannf.MethodsThe contents of polysaccharide and saponins in herbs were determined by spectrophotometry. ResultsThe contents of polysaccharide in Codonpsis thalictrifolia Wall. and Codonopsis pilosula (Franch)． Nnannf. were 24.32% and 18.25%, and the saponins were 3.02% and 2.48% respectively. The results showed that the contents of polysaccharide and saponins in Codonpsis thalictrifolia Wall. were 1.33 and 1.22 times higher than those in Codonopsis pilosula (Franch．) Nnannf. respectively.ConclusionThe polysaccharide and saponins in those in Codonpsis thalictrifolia Wall. were measured for the first time, and both are higher than those in Codonopsis pilosula (Franch．) Nnannf., used by Chinese Medicine in common. This study supplied credible foundation for quality estimate and utilization of Codonpsis thalictrifolia Wall..
       Key words：Codonpsis thalictrifolia Wall.；  Codonopsis pilosula (Franch．) Nnannf．；  Polysaccharide；  Saponins
       
       党参Radix Codonopsis Pilosulae其性味甘平、无毒，有补中益气、生津止渴等功效。主治脾胃虚弱，中气不足，肺气亏虚，热病伤津，气短口渴，血虚萎黄，头晕心慌等症，是我国传统的补益药［1，2］。现代研究表明党参中多种成分具有生理活性，尤其是对多糖和皂苷的活性研究较多，如党参多糖具有增强免疫能力［3，4］、提高应激能力［5］、抗衰老［6］等药理活性；党参皂苷具有抗突变［7］、抗缺氧等活性［8］。根据党参的产地不同，分为不同的商品规格。藏党参，又名鲁堆多吉，为桔梗科党参属植物的根。据《晶珠本草》记载，分为黑色类和白色类两种，脉花党参与长花党参分别符合黑色类和白色类的特征，视为正品［9］。本研究所用的药材为长花党参Codonpsis thalictrifolia Wall.，生长于青藏高原与西秦岭相汇处，海拔2 000～3 000 m之间，常被藏族人民用于消炎散肿，滋补壮阳，健脾胃，补气，可治疗风湿性关节炎、神经痛、神经麻痹、疮疥痈肿、麻风、脚气病、癔病等［10，11］。潞党参Codonopsis pilosula (Franch．) Nnannf.被视为党参中品质优良的品种，多为人工栽培，产于山西，临床应用广泛，研究较多。本实验首次测定了藏党参中多糖与皂苷这两种活性成分的含量，并与潞党参进行了对比研究，为藏党参的进一步研究和开发利用提供科学依据。
       1   材料与仪器
       1.1  仪器 UNICO2000分光光度计（上海尤尼柯公司）；分析天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；5804R冷冻型高速离心机（德国eppendorf公司）等。
       1.2   试剂葡萄糖－D对照品，人参皂苷Re对照品（中国药品生物制品检定所）；其他试剂均为分析纯（北京化学试剂公司）。
       1.3   实验药材藏党参，产地为甘肃省岷县（购于兰州金开来商贸有限公司）；潞党参产地为山西省陵川县（购于北京药材公司）。在阴凉处风干，粉碎后，过24目筛，置干燥处备用。
       2  方法与结果
       2.1  多糖含量的测定
       2.1.1  多糖的制备与精制精确称取60 ℃烘24h后的药材粉末80 g，置于圆底烧瓶中，加500 ml石油醚，回流脱脂1.5 h，过滤，回收石油醚。药渣挥干溶剂，分别用800，400，400 ml 80%的乙醇提取2，1.5，1 h。过滤，回收乙醇，药渣挥干溶剂，再分别用蒸馏水800，400，400 ml，75～80 ℃回流提取2，1.5，1 h，过滤，合并滤液，浓缩到150 ml，用0.1%的活性炭脱色两次，过滤，滤液加95%乙醇至乙醇含量为80%。置于冰箱中24 h，过滤，残渣先后用95%乙醇，乙醚，丙酮洗涤数次，离心，得总多糖。
       2.1.2  多糖理化性质检识多糖为灰白色粉末，可溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂。Molish 反应呈阳性，碘-碘化钾反应呈阴性。
       2.1.3  葡萄糖标准曲线的绘制 精确称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖-D对照品25 mg，加水溶解，定容至25 ml，摇匀，配成浓度为1 mg/ ml标准葡萄糖溶液。精密量取标准葡萄糖溶液0，10，20，40，60，80 μl置干燥试管中，各加蒸馏水至2 ml，再分别加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速滴加浓H2SO4 5 ml，充分摇匀，室温放置25 min。进行全波长扫描，在490 nm 处均有最大吸收。以490 nm处吸光度为纵坐标，以样品浓度为横坐标绘制标准曲线，回归方程为A = 0.061 9 C - 0.005 6，R2 = 0.999 6，在1.25～10 μg/ml之间有良好的线性关系，见图1。
       2.1.4  换算因素的测定精确称取干燥至恒重的多糖20 mg，加水溶解后定容到100 ml容量瓶中，摇匀，作为多糖储备液，浓度C1 = 0.2 mg/ml。精密吸取此溶液0.2 ml，照“2.1.3”项下的方法测其吸光度值，从回归方程求得藏党参和潞党参多糖供试液中葡萄糖的含量C2分别为4.775 μg/ml和3.838 μg/ml。
       2.1.5   样品溶液的制备称取药材粉末0.2 g，3份，分别置于圆底烧瓶中加80%乙醇150 ml，80 ℃水浴回流提取1 h，趁热过滤，残渣用80%热醇洗涤。然后将残渣连同滤纸置烧杯中，加蒸馏水150 ml，80 ℃水浴提取1 h，趁热过滤，残渣及烧瓶用热水洗涤，洗液并入滤液，放冷后移入250 ml容量瓶中，用蒸馏水定容，浓度C为0.8 mg/ml，备用。
       图1  葡萄糖标准曲线（略）
       2.1.6  样品中多糖含量测定精密量取0.2 ml样品溶液，照“2.1.3”项下的方法测其吸光度值，从回归方程求得藏党参和潞党参样品溶液中葡萄糖的含量C3分别为4.404 μg/ml和2.756 μg/ml。
       2.1.7  稳定性实验取样品溶液照“2.1.3”项下的方法测其吸光度值，每隔15 min测1次，结果表明1.5 h内稳定性良好，RSD= 0.68% (n=5)。
       2.1.8  回收率实验精确称取药材粉末1 g，加入总多糖20 mg，用150 ml 80%乙醇85 ℃回流提取2 h，过滤，药渣用95%乙醇洗涤3次，挥干溶剂，再用150 ml蒸馏水85 ℃提取2 h，过滤并用蒸馏水洗涤数次，转移至容量瓶中，定容到250 ml。取5 ml定容至100 ml，然后取400 μl按照“2.1.3”项的方法测定吸光度。藏党参和潞党参多糖含量测定的平均回收率分别为94.79%和98.37%，RSD均小于1.5%（n=3）。
       2.1.9  样品中多糖含量计算供试液多糖浓度C4的计算：C2/C1=C3/C4
       
       计算得藏党参和潞党参供试液中多糖浓度分别为0.185 mg/ ml和0.144 mg/ ml。
       
       样品多糖含量的计算：在吸取量均相同的情况下样品多糖含量为：C4/C，经计算藏党参和潞党参中多糖平均含量分别为24.32%和18.25%，RSD均小于1.5%（n=3），见表1。
       表1  藏党参和潞党参中总多糖和总皂苷含量的测定结果（略）
       2.2  皂苷含量的测定
       2.2.1   皂苷供试液的制备 精确称取前期处理好的药材粉末2 g，置圆底烧瓶中加70%乙醇150 ml回流提取2 h，提取液过滤后浓缩，挥干溶剂，加入50 ml蒸馏水溶解，用水饱和的正丁醇150 ml萃取3次，浓缩，挥干溶剂，甲醇溶解定容至100 ml，样品浓度为20 mg/ ml，待测。
       2.2.2  人参皂苷Re标准曲线的绘制精确称取105 ℃干燥至恒重的人参皂苷Re对照品10 mg，甲醇溶解，定容至10 ml，摇匀，配成浓度为1 mg/ ml标准人参皂苷Re溶液。精密量取人参皂苷Re溶液0，20，40，80，120，160 μl置干燥试管中，吹干，依次加入现配的5%香草醛冰醋酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml，60 ℃水浴15 min，冷却后加入冰醋酸5.0 ml，室温下放置5 min。进行全波长扫描，在544 nm 处均有最大吸收。以544 nm处吸光度为纵坐标，以样品浓度为横坐标绘制标准曲线，回归方程为A=0.027 5 C - 0.034 2，R2=0.997 9，在3.33～26.67 μg/ml之间有良好的线性关系，如图2所示。
       2.2.3  稳定性实验取样品溶液照“2.2.2”项下的方法测其吸光度值，每隔15 min测1次，结果表明1.5 h内稳定性良好，RSD= 0.59% (n=5)。
       2.2.4  回收率实验精确称取前期处理好的药材粉末1 g，加入5 mg人参皂苷Re对照品，按样品溶液的制备和测定方法分别进行实验。藏党参和潞党参皂苷含量测定的平均回收率分别为97.73%，96.82%，RSD均小于1.5%（n=3）。
       2.2.5  样品中皂苷含量的测定精密吸取样品溶液60 μl，按照“2.2.2”项的方法测吸光度值，从回归方程求得藏党参和潞党参皂苷的含量分别为3.02%和2.48%，RSD均小于1.5%（n=3）。见表1。
       图2  人参皂苷Re标准曲线（略）
       3  讨论
          
       党参作为中医临床上常用的补益药，对其化学体系研究表明，其主要成分有多糖、甾醇类成分、三萜类成分、生物碱、内酯类成分、香豆素类等［1］。现代医学研究证实，党参对心血管系统、免疫系统、中枢神经系统都具有影响［12～14］。本实验首次测定了藏党参中多糖和皂苷的含量，并与临床上常用的同科属植物——潞党参进行了对比研究。
       3.1  多糖含量的比较藏党参和潞党参中多糖的含量都较高，且藏党参中多糖的含量是潞党参的1.33倍。潞党参中多糖含量测定的结果与咸丰等［15］所测得的19.82%，以及刘文生等［16］测得的20.99%基本一致，说明分析方法可靠。
       3.2  皂苷含量的比较在以前的研究中，对党参属植物中皂苷的药理活性研究较多，但对皂苷含量进行测定的报道很少。本实验参考程伶俐等［17］测定板桥党参皂苷含量的方法，选择以人参皂苷Re为对照品测定皂苷含量。结果显示，两者皂苷含量都高于板桥党参的1.38%，藏党参中皂苷的含量是潞党参的1.22倍。
       3.3  存在含量差异的原因分析首先，是生长环境差异。本实验所选用的藏党参产于甘肃省岷县，生长于青藏高原与秦岭相汇处，海拔在2 000～3 000 m之间。其次，是采摘、收获时节不同。潞党参多为人工栽培，产于山西。本实验所用药材虽均为市面上所销售的药材，但是采摘、收获时节可能存在差异。
       
       综上所述，藏党参中多糖和皂苷含量与潞党参对比，结果显示，藏党参多糖和皂苷含量高，具有较高的开发利用价值，为藏党参的深入研究、质量评价以及开发利用提供了更加合理、可靠的依据。
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