文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的建立HPLC法测定立克宁肠溶微丸中丁香苦苷的含量。方法Symmetry shield TM RP18（3.9 mm× 150 mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇-水(30∶70, V/V)，检测波长为225 nm，流速为1.0 ml·min-1，柱温为30℃。结果丁香苦苷浓度在0.05～1.04 μg/ml之间线性良好，r = 0.999 9。平均加样回收率为99.64 %，RSD为1.92 %。结论该法简便、准确、重复性好，可用于立克宁肠溶微丸中丁香苦苷的含量测定，为该制剂质量标准的建立提供依据。
       【关键词】  高效液相色谱； 丁香苦苷； 肠溶微丸
       Determination of Syringpicroside in Likening Enteric Micropelets by HPLC
       WANG Xiaohui，WANG Chao，WANG Yanhong，GUAN Qingxia, LI Yongji*
       （Department of Pharmacology,Medical College of Chinese People"s Armed Police Force,Tianjin 300162,China;Shenyang Pharmacological University,Shenyang 110016,China;Heilongjiang University of TCM,Haerbin,150040 China）
       Abstract：ObjectiveTo determine the content of syringpicroside in Likening enteric micropelets by HPLC. MethodsThe HPLC system consisted of the column of Symmetry shield TM RP18 (3.9 mm × 150mm, 5μm), and methanol-water (30∶70, V/V) as the mobile phase. The temperature was 30℃,  the detection wavelength was 225nm, and the flow rate was 1.0 ml·min-1.ResultsGood separation and peak figures of syringpicroside were obtained. Linear range of syringpicroside was in the range of 0.05～1.04 μg/ml, average recovery was 99.64％ and the RSD was 1.92%.ConclusionThis method is rapid, accurate, and reproducible, which can be used to control the quality of Likening enteric micropelets.
       Key words：HPLC;   Syringpicroside;   Enteric micropelets
       
       丁香苦苷为丁香叶提取物的主要有效成分之一［1］。药理研究表明，丁香苦苷具有抗菌消炎、抗病毒［2］、降压、降温、镇咳祛痰等作用。为了将其研发成为高效、安全、使用方便的药物制剂，笔者进行了新剂型立克宁肠溶微丸的工艺研究。控制该制剂的制备工艺及药品质量的稳定性，确保临床疗效，本实验以丁香苦苷含量为质量控制指标，建立了高效液相色谱法测定丁香苦苷含量［3］的方法。
       1   材料与仪器
       1.1   药品 丁香苦苷对照品（自制，纯度大于98％）；微晶纤维素 (天津天泰精细化学品有限公司，T.T.R.C)；甲醇（液相用）为色谱纯，其他试剂均为分析纯。立克宁肠溶微丸为自制样品，批号分别为050812，050814，050816)。
       1.2   仪器  美国Waters公司高效液相色谱仪系统，2996二极管阵列检测器， Empower 色谱工作站；MP2000电子天平（上海第二天平仪器厂）；ZB-1C 智能崩解仪(天津大学精密仪器厂)。
       2   方法与结果
       2.1   立克宁肠溶微丸的制备取处方量的原辅料，加入适量的稀释剂混合均匀，挤出物投入滚圆机滚圆成含药丸芯，含药丸芯低温烘干后过筛，筛分得粒径为10～18目的含药丸芯，含药丸芯包肠溶衣至增重6％后即得立克宁肠溶微丸。
       2.2   立克宁肠溶微丸阴性样品的制备处方中不含丁香叶提取物，其它辅料以及工艺与立克宁肠溶微丸的制备相同。
       2.3   供试品溶液配制取立克宁肠溶微丸1.2 g，研成细粉，置50 ml具塞三角烧瓶中，加入蒸馏水溶解，加热至全溶后转移至100 ml的容量瓶中蒸馏水定容。精密吸取20ml置分液漏斗中，加醋酸乙酯萃取两次（每次为30 ml），回收有机相，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容于25 ml容量瓶中，再精密吸取1.0 ml置于25 ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，0.45 μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液。
       2.4   对照品储备液配制精密称取丁香苦苷对照品1.06 mg，置于10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中备用。
       2.5   色谱条件色谱柱：Symmetry shield TM RP18（3.9 mm×150 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水(30∶70,V/V)；柱温：30℃；检测波长：225 nm；流速为1.0 ml·min-1。
       2.6   可行性实验按处方配比制备不含丁香叶提取物的空白微丸阴性样品。称取与立克宁肠溶微丸样品及相当量的阴性样品，按样品测定项下方法分别进行提取。分别取丁香苦苷对照品溶液、立克宁肠溶微丸样品溶液、不含丁香叶提取物的微丸阴性样品溶液，进样10 μl，结果表明丁香苦苷的峰保留时间约为9 min，阴性样品在丁香苦苷峰处无峰，即立克宁肠溶微丸中其他成分对丁香苦苷含量测定没有影响。结果见图1～3。
       图1  丁香苦苷对照品（略）
       2.7  标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的丁香苦苷对照品，加甲醇配制成0.5，1，2.5，5.0，7.5，10.0 mg·ml-1的系列溶液，微孔滤膜滤过，在225 nm波长条件进行测定，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，浓度(mg·ml-1)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=2.13×104+1.3×106X (n=5)，相关系数r=0.999 9，表明丁香苦苷浓度在0.05～1.04 mg·ml-1之间呈良好的线性关系。
       图2  立克宁肠溶微丸样品（略）
       图3  阴性对照（略）
       2.8   精密度实验精密吸取丁香苦苷对照液（0.106 mg·ml-1）10μl，在上述色谱条件下连续进样5次，计算相对标准偏差，结果表明日内精密度的RSD为0.70%，日间精密度的RSD为1.02%。表明仪器系统的精密度良好。
       2.9  重复性实验精密吸取供试液6份，各进样15 μl测定丁香苦苷含量，计算相对标准偏差，结果表明RSD为1.36%，符合规定标准，表明重复性良好。
       2.10   稳定性实验精密吸取丁香苦苷对照液（0.106 mg·ml-1）10 μl，分别在0，2，4，6，8，10 h测定1次，计算相对标准偏差，RSD为1.60%。表明丁香苦苷对照液在10 h内稳定。
       2.11   加样回收率实验精密称取已知丁香苦苷含量的微丸样品5份，加入丁香苦苷对照品溶液5 ml（0.106 mg·ml-1），依上述方法制成供试液，按标准曲线法进行测定,计算回收率，结果平均回收率为99.64%，RSD为1.92%。
       2.12   样品含量测定精密吸取供试品液15 μl，注入液相色谱仪测定，计算样品含量。结果见表1。
       表1  样品含量测定（略）
       3  讨论
          
       本实验建立了HPLC法测定立克宁肠溶微丸中丁香苦苷含量的方法，该方法具有操作简便、重复性好、结果准确等优点，可为立克宁肠溶缓释微丸质量标准的制定提供依据。
       
       本实验以挤出滚圆制丸和流化床包衣丸芯，该工艺对微丸含量影响较小，3批立克宁肠溶微丸中丁香苦苷含量无显著性差别。
       
       利用HPLC对立克宁肠溶微丸中的丁香苦苷进行含量测定，结果表明该法基线平稳、峰形陡峭无杂质峰干扰，积分准确、精密度高。
       【参考文献】
         ［1］ 卢 丹,李平亚,李静晖.紫丁香叶化学成分研究［J］.中草药,2003,34(8):688.
       
       ［2］ Ahmad M., Rizwani G.H. Aftab K., et al. Acteeside: A new antihypertensive drug［J］. Phytother Res,1995,9(6)：525.
       
       ［3］ 王艳宏,李永吉,王艳芝,等.紫丁香叶中丁香苦苷的RP-HPLC法测定［J］.中草药,2003,34(3):268．