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       【摘要】 
       目的以芍药苷的提取转移率为指标对中药乳康平胶囊进行最佳制备工艺的研究。方法采用L9(34)正交实验法优选水提工艺条件，用高效液相色谱法测定芍药苷的含量作为指标。结果最佳水提工艺条件为：以6倍量水提取3次，时间为1.0h/次最佳。结论此制备工艺操作简单，芍药苷的提取率高，稳定性好，可作为乳康平胶囊的最佳制备方法之一。
       【关键词】  乳康平胶囊； 芍药苷； 制备工艺； 正交实验； 高效液相色谱
       Study on the Preparation of Rukangping Capsules
       DENG Guoxing,LI Chunxiang*,ZHAO Lifeng,DING Fang,HAO Lei,YIN Tianzhao
       （Tradiontional Chinese Medical College,Hebei Medical University,Hebei,Shijiazhuang 050091 China;Chang"an Hospital of Shijiazhuang, Hebei,Shijiazhuang 050017 China）
       Abstract：ObjectiveTo study the preparation craft of Rukangping capsules.MethodsThe orthogonal testing method was used to optimize the technological conditions and the content of  peoniflorin was determined by HPLC.ResultsThe optimal technological conditions with water extraction were as follows: 6 times amount of water,3 times,1h each time.ConclusionThe method is simple,specific stable and can be used for preparation craft of Rukangping capsules.
       Key words：RuKangping capsules;   Peoniflorin;   Preparation craft;   Orthogonal test;   HPLC
       
       乳腺增生病(Hyperplastic disese of breast,HDB)是以乳腺腺泡、导管的上皮细胞及结缔组织增生为主要病理变化的一类疾病的总称,是育龄妇女最常见的乳腺疾病,其发病率约占育龄妇女的40%，约占乳腺疾病的70% ～80%［1］。乳腺增生病属中医“乳癖”或 “乳痨”范畴，辨证多为肝郁气滞，血淤痰凝，冲任失调，肝肾两虚等，“肝体为阴用为阳，喜条达恶抑郁，肝布两胁”。中青年女性见之较多。大多是由于精神压力过大，情绪波动,多愁善感等,致内分泌失调，乳腺增生病发生。中药乳康平胶囊是在李春香教授多年临证治疗乳腺增生病乳康平汤剂的基础上，根据各药物的理化性质等进行的胶囊工艺研究，以更好的方便患者服用，提高疗效。
       1  仪器与试剂
       　1.1   仪器高效液相色谱仪（Agilent1100型）、VWD紫外检测器、Agilent1100色谱工作站、KQ-500DV型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DP-01减压抽滤器；FA（N）/JA（N）电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）。
       1.2   试剂芍药苷标准品（中国药品生物制品检定所提供，批号110786-200503）；甲醇、乙醇、蒸馏水；甲醇（Fisher）为色谱纯，其余试剂为分析纯。
       2  方法与结果
       2.1   实验水平因素的选择
       2.1.1  溶媒的选择根据方中各药所含有效成分的化学性质，欲采用醇提和水提两种方法。预实验中选用4倍量50%乙醇溶液，回流提取3次，1.0 h/次；与同条件下的水提液分别对柴胡、白芍、炒白术、当归等4味药进行高效液相定性检出，均检出其有效成分，效果显著；取同量醇提物和水提物浓缩蒸干，干浸膏量差异不大；并且醇提成本远远高于水提，故选用水提工艺。
       2.1.2  正交实验设计 采用正交实验设计法以芍药苷的提取转移率为评价指标，以加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为考察因素，各因素的水平设计见表1。
       表1  正交试验因素水平（略）
       2.2   制备工艺优选
       2.2.1  实验方法采用L9(34)正交实验表设计，每次实验按处方比例取药材量的1/10，按正交表中所列实验条件进行实验。煎煮，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏。
       2.2.2   供试品溶液的制备根据正交实验表设计每次实验按处方比例取药材量的1/10，按要求量加水，煎煮规定时间，过滤，合并滤液，浓缩成稠膏，加入甲醇15 ml，超声提取20 min，滤过，取续滤液，过微孔滤膜（水系0.45 μm孔径）滤过（供测试芍药苷用）。
       2.2.3   对照液的制备
       
       对照品溶液的制备：取芍药苷标准品，精密称定15.7 mg置于10 ml容量瓶中，加入10 ml甲醇，将容量瓶置于超声波清洗器中超声使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。用移液管精密量取上述溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，将容量瓶置于超声波清洗器中超声混匀后用甲醇稀释至刻度。
       
       阴性对照溶液的制备：取除白芍外的其余中药，按“2.2.2”项下制成阴性对照溶液。
       2.3  色谱条件的选择色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：甲醇－水（30∶70）；检测波长：230nm；柱温：室温；压力：73 MPa；流速：1.0 ml/min；进样量：10 μl(仪器自动进样量为10 μl)；理论塔板数以芍药苷峰计应不低于2 000［2～3］。
       2.4  样品测定按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按已确定的色谱条件测定峰面积，并求出各水煎液中芍药苷的相应含量，结果见表2，方差分析见表3。
       2.5  正交实验结果与方差分析经实验分析，可确定出水煮提取的最佳工艺为A1B2C3。即：以6倍量水提取3次，时间为1.5 h/次。
       
       从表2、表3的数据可知，芍药苷的R值表明影响因素排列顺序为C>A>B>D，直观分析结果即可得出最佳工艺为：A1B2C3；芍药苷的方差分析结果显示仅C因素具有显著性意义。考虑到生产实际，故煎煮时间不按芍药苷的方差分析结果选择1.5 h，而是选择1 h。故水煮提取的最佳工艺确定为A1B1C3。即：以6倍量水提取3次，时间为1.0 h/次。
       3  讨论
       3.1   中药乳康平立法及组方原则  乳腺增生病属中医“乳癖”范畴，每遇情志不遂,乳房疼痛发作或加重。复方乳康平遵循中医“木郁达之”的治则，采用疏肝健脾、行气活血治法，选用柴胡疏肝解郁；白芍养肝柔肝共为君；玫瑰花、当归疏肝养肝辅佐柴芍为臣；炒白术、茯苓健脾补中，以促气血生化，且可杜生痰之源为佐使。诸药相合，使肝体得养，肝气得舒，痰凝得化，郁结得散。
       表2  正交实验设计（略）
       表3  方差分析（略）
       3.2   中药乳康平剂型的选择  复方乳康平原方为汤剂，是李春香教授多年临证总结的良方，常用治乳腺增生、子宫肌瘤、卵巢囊肿等。临床观察表明，本方可以有效调节激素水平，改善或消除乳房疼痛症状，明显缩小或消除乳腺增生肿块。故在保证传统汤剂药效基础上改进为胶囊剂型。胶囊不仅具有携带方便、掩盖药物的不良气味、提高药物的稳定性和生物利用度、定时定位释放药物等特点［4］，更适合临床广泛应用。
       3.3   中药乳康平检测指标的确定  白芍具有养肝、柔肝和泻肝等作用，且为本方君药,芍药苷为其有效成分,芍药苷含量的多少可以间接反应制剂工艺及疗效,故选择芍药苷作为该药的测定指标。
       
       本实验参照文献中白芍项下芍药苷的含量测定方法［5］，选择波长230 nm进行测定，结果表明芍药苷在此波长下无明显干扰。
       【参考文献】
         ［1］ 林 毅,司徒红林,陈芬军.乳腺增生病与中医药周期疗法［J］.中医药信息, 2003, 20(1): 7.
       
       ［2］ 匡宏枫,张艳海,吴瑶庆. HPLC法测定乳腺冲剂中芍药苷的含量［J］.中医药学报,2006,34(2):24.
       
       ［3］ 罗 潇，李雪艳.HPLC法测定益肾壮骨胶囊中芍药苷的含量研究［J］.中医药导报，2007,13(8): 79.
       
       ［4］ 张兆旺，范碧亭.中药药剂学［M］.北京：中国中医药出版社，2003：211.
       
       ［5］ 张菊红,王志伟,金吉琴,等.高效液相色谱法测定益妇胶囊中芍药苷的含量［J］.中成药,2001,23(6):409.
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