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       【摘要】 
       目的建立虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材的生药鉴定方法。方法从形态特征、显微特征、理化性质方面对虎奶菇和虎乳灵芝两种真菌进行系统观察和鉴别，采用紫外－可见光谱（UV-Vis）法对两种真菌的乙醇提取物进行表征区分。结果两者在形态特征、显微特征、理化性质、紫外吸收方面均呈现出不同。结论该鉴定方法操作简便，重复性好，测定结果准确，可作为虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材的鉴定依据。
       【关键词】  虎奶菇 虎乳灵芝 生药鉴定
       Identification of the Sclerotium of Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing and Lignosus rhinoceros(Cooke)Ryv.
       YANG Lan ，FANG Zhijian*
       (Department of Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou,Guangdong 510006,China)
       Abstract:ObjectiveTo evaluate the identification methods for the sclerotium of Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing and Lignosus rhinoceros(Cooke) Ryv.MethodsTo overall survey and distinguish the two Rinds of fungus on morphological, microscopic identification，physical and chemical character,and to determine the absorption of the ethanol extract by UV-Vis spectra.ResultsThe two kinds of fungus were distinct on morphologic, microscopic identification，physical and chemical character,and UV absorption.ConclusionThe method is simple and accurate,which can be used for identification of the sclerotium of Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing and Lignosus rhinoceros(Cooke) Ryv.
       Key words:Pleurotus tuber-regium (Fr.) Sing;  Ligrosus rhinoceros (Cooke) Ryv.;  Identification
       
       虎奶菇为侧耳科植物虎奶菇Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing的菌核，是产于热带和亚热带地区的一种珍稀食药用菌，主产于非洲，在我国只分布于少数地区，如云南省藤冲、章风两县。具有提高人体免疫力、止咳等功效［1］。
       
       虎乳灵芝，为多孔菌科虎乳灵芝Lignosus rhinocerus(Cooke)Ryv的菌核，主要分布于中国、马来西亚、菲律宾、斯里兰卡、澳大利亚和其他国家（东非），我国主要分布于海南省保亭黎族自治县，具有治疗肝癌、慢性肝炎、肝热、胃病的作用［2］。
       
       虎奶菇和虎乳灵芝两种菌类药材有一定的相似性，到目前为止还未见二者的生药鉴定标准。本研究拟通过对虎奶菇和虎乳灵芝进行生药鉴定，从性状特征、显微特征、理化性质等方面进行比较，并用UV-Vis光谱手段进行表征区分。
       1  材料和仪器
       1.1  材料  虎奶菇由广东国康科技实业有限公司提供，经广东药学院房志坚副教授鉴定；虎乳灵芝购于香港，由广东药学院房志坚副教授鉴定。
       1.2   仪器 日本岛津紫外分析仪（Shimadzu2450型）；麦克奥迪数码显微系统（BA300+Maticam3.2型）。
       2   方法与结果
       2.1  性状鉴别虎奶菇菌核呈不规则团块，类圆形或扁球形，大小不一，直径3～6 cm，厚2.5～4.5 cm。表面多黄白色，少数浅黄色，外皮薄且多粗糙，有明显的皱缩纹理，偶见细小横裂纹，或有瘤状突起。体轻，质松，入水能浮于水面，断面不平坦，白色或黄白色，有颗粒性。气微，味淡，嚼之有颗粒感，微黏性。见图1。
       
       虎乳灵芝菌核多为不规则块状或扁球形，大小不一，差异较大，直径1～5 cm，厚1～3 cm。表面呈灰褐色，外皮薄且多粗糙，有不规则裂纹。有瘤状突起及断续的纵皱，偶有空洞。质地坚硬，不易折断。断面不平坦，类白色，呈颗粒性，多浮于水面，少数下沉。气微，味淡，嚼之带黏性。见图2。
       图1  虎奶菇（菌核）（略）      
       图2  虎乳灵芝（菌核）（略）
       2.2  显微鉴别
       2.2.1  虎奶姑粉末菌核粉末灰白色，多粘附在一起，味淡。粉末用水装片，载玻片上水溶液中的粉末多相互粘附，显微镜下可见浅黑色的不规则团块，边缘可见无数菌丝露出，无色菌丝相互缠绕成团块。粉末用5%氢氧化钾液装片，团块溶化，露出菌丝。见图3～4。
       2.2.2  虎乳灵芝粉末粉末灰白色，味淡。粉末用水装片，显微镜下可见类圆形多糖团块，中间透明，边缘近黑色，无色菌丝，相互缠绕附着在上面。粉末用5%氢氧化钾液装片，团块溶化，露出菌丝。见图5～6。
       图3  虎奶菇水装片（略）     
       图4  虎奶菇5%氢氧化钾液装片（略）
       图5  虎乳灵芝水装片（略）       
       图6  虎乳灵芝5%氢氧化钾液装片（略）
       2.3  理化鉴定准确称取虎奶菇和虎乳灵芝粉末各10 g，置于250 ml三角瓶中，加入50 ml的95%乙醇，浸提24 h，将所得提取液置于通风橱中自然挥发近干。以石油醚-醋酸乙酯（7∶3）混合溶液为展开剂，以10%硫酸-乙醇为显色剂进行TLC实验。
       
       如图7～8所示，左边为虎奶菇的乙醇提取液点样，右边为虎乳灵芝的乙醇提取液点样。
       图7石油醚－醋酸乙酯（7∶3）展开后（略）  
       图8   10%硫酸－乙醇显色后（略）
       
       展开后，365 nm下，虎奶菇和虎乳灵芝各有一个蓝色荧光斑，Rf值分别为0.75和0.72，虎奶菇的荧光斑较强（图7）。显色后，在365 nm下观察，虎奶菇被分离的斑点数为3，从上到下Rf值分别为0.75，0.71，0.5，均为绿色荧光斑，Rf值为0.75的斑点荧光较强；虎乳灵芝被分离的斑点数为1，Rf值为0.72（见图8）。
       2.4  紫外－可见（UV-Vis）光谱分析分别称取虎奶菇、虎乳灵芝药材粉末30 g，置于250 ml三角瓶中，用石油醚（60～90℃）超声提取3次，所得药渣置于通风橱中挥干。再用60%乙醇加热回流提取，提取液减压浓缩，蒸干。残渣用乙腈溶解，过滤，所得滤液为样品溶液，以乙腈试剂为参比做紫外-可见光谱扫描，扫描波长范围：190～700 nm（见图9～10及表1）。
       3  讨论
          
       两者显微特征有较大差别。虎奶菇的菌丝多数粗短，分枝，相互缠绕成团块；而虎乳灵芝的菌丝多数细长，不分枝，缠绕及附着于类圆形分泌物上。
       
       薄层色谱结果表明：虎奶菇至少含有4种或4种以上的亲脂性的甾体或萜类成分，虎乳灵芝至少含有两种或两种以上的亲脂性的甾体或萜类成分。
       图9  虎奶菇的UV-Vis光谱图（略）
       图10  虎乳灵芝的UV-Vis光谱图（略）
       表1  UV-Vis光谱数据nm（略）
       紫外吸收光谱表明，虎奶菇和虎乳灵芝的吸收带3均为皂苷含孤立双键的苷元的贡献。
       【参考文献】
         　　［1］ 江枝和，李三暑，郑永标，等.虎奶菇菌核和子实体微量元素及氨基酸分析［J］.食用菌学报，2000，7（2）：47.
       
       ［2］ 黄年来.一种药用菌－虎乳灵芝学名的鉴定［J］.食用菌学报，1999，6（1）：30.