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       【关键词】  血淤证 基因
       血淤证见于多种疾病，是一种综合性病理状态，形成机制非常复杂。现代医学认为,各种致病因子所造成的全身或局部组织器官的缺血、缺氧、血循环障碍以及血液流变性和黏滞性异常而导致各组织器官水肿、炎症渗出、血栓形成、组织变性、结缔组织增生等一系列的病理变化,都可以概括在血淤证的病理实质中。近年来,对血淤证的基础研究成为一个热点。随着分子生物学技术的发展，血淤证与基因的关系日益受到重视，众多学者运用基因芯片技术从基因水平探索血淤证的形成机制。现就近几年血淤证与基因相关性研究的进展概述如下。
       1  冠心病血淤证与基因相关性的研究
          
       冠心病属中医“胸痹心痛”范畴,其病因虽有寒、痰、气、淤之不同,但其基本病机则属于心脉淤阻。大量的临床和实验研究表明，血淤证是冠心病最常见的证型之一。因此，冠心病血淤证与基因相关性的研究成为目前的热点。毛以林等［1］ 探讨了血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与冠心病血淤证的关系。用PCR法检测48例血淤证和52例非血淤证冠心病患者及54名健康人的ACE基因型，结果显示冠心病血淤证组ACE DD基因型及D等位基因频率高于非血淤证组和健康对照组(P<0.01)。研究认为DD型ACE基因可能为冠心病血淤证发病的易感基因。黄献平等［2］ 的研究亦提示ACE－DD基因型和D等位基因的频率增高可能与冠心病心血淤阻证有一定内在联系，认为可能与D等位基因导致血管紧张素Ⅱ异常增多有关。黄献平等［3］ 探讨了凝血因子Ⅶ(FⅦ)基因多态性与冠心病心血淤阻证候及凝血因子Ⅶ活性(FⅦc)的相关性，发现冠心病心血淤阻证组在基因型M1M1和等位基因M1频率分布均显著高于健康对照组(P<0.05)，FⅦ-M1M1基因型的各组受检者FⅦc值的变化呈冠心病心血淤阻证组>非冠心病血淤证组>冠心病非血淤证组>健康对照组递减趋势，而FⅦ-M1M2基因型各组受检者FⅦc值的变化则相反。认为FⅦ基因M1M1多态性和M1等位基因与冠心病心血淤阻证相关。吴依芬等［4］ 用PCR方法检测22例血淤证、23例痰浊证、22例非痰浊血淤证冠心病患者及20名正常人的GNB3基因型，结果显示冠心病痰浊证、血淤证与GNB3基因825TT基因型相关,与其它证型及健康人对照组比较差异显著(P<0.05)。认为 GNB3基因825TT基因型可能是冠心病血淤证的易感基因。吴依芬等［5］ 探讨了不同中医证型汉族男性冠心病患者发病与ABCA1基因多态性相关性。采用聚合酶链式反应结合限制性内切酶片段长度多态性方法检测ABCA1基因型，结果显示血淤证、痰浊证冠心病患者 219KK基因型及 K等位基因频率明显低于非痰浊血淤证患者、健康对照组，认为ABCA1基因K等位基因可能是冠心病血淤证的保护因素。欧阳涛等［6］ 选择冠心病中医痰证、淤证、痰淤互阻证和非痰非淤证(其他证型)患者200例，用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测载脂蛋白E基因第一内含子增强子(ApoEIE1)的基因型。结果发现G/G基因型在痰证和痰淤互阻证中的分布多于淤证和非痰非淤证，G等位基因与apoE第四外显子ε4等位基因密切相关。认为ApoE第一内含子增强子BspLI位点的G/G基因型可能是冠心病痰证及痰淤互阻证的易感基因型之一。 
       2  糖尿病、高血压病血淤证与基因相关性的研究
          
       目前普遍认为，血淤贯穿于糖尿病发展、演变过程的始终，因此糖尿病血淤证与基因相关性的研究得到高度重视。郭聂涛等［7］ 采用PCR+RFLP检测法对2型糖尿病血淤证及非血淤证患者的红细胞补体受体1型免疫分析(CR1)密度基因型及数量表达、黏附活性进行了测定和分析，结果发现2型糖尿病血淤证组基因型高表达人群明显低于非血淤证组和健康对照组，而中、低表达人群则明显高于非血淤证组和健康对照组；CR1数量表达及黏附活性表达，血淤证组明显低于非血淤证组和健康对照组。认为红细胞CR1密度基因型及数量表达、黏附活性变化是2型糖尿病发生血淤证重要的医学基础，也是判断血淤证的一项量化指标。杨丽萍等［8］ 通过一个肾虚糖尿病家系，研究血淤证候的分子生物学基础。对一个糖尿病家系18个成员做理化测试及肾虚血淤诊断后,精选其中3例肾虚血淤证糖尿病患者与该家系中的2例正常人作14 000点的基因芯片杂交测试。结果得到肾虚血淤证糖尿病患者与正常人的差异基因446条，尤其是血栓素A合成酶1等5条基因与血淤证的发生密切相关。认为利用家系研究寻找宏观的证候和微观的差异基因表达具有极强的优势，有助于探讨肾虚血淤糖尿病证候与差异表达基因之间的关系。
       
       马民等［9，10］ 应用免疫组织化学方法，观察了100例高血压病、2型糖尿病血淤证与60例高血压病、2型糖尿病非血淤证患者白细胞中HSP70、血小板CD62p基因、c-jun基因表达的变化情况, 结果发现c-fos、c-jun基因表达水平在血淤证组比正常对照组和非血淤证组明显增高，c-fos基因表达水平在血淤证各型中以气滞血淤组表达最高，c-jun基因表达水平在血淤证各型中无显著性差异。认为c-fos、c-jun基因的异常表达可能是参与血淤证形成和演变过程中的重要因素。马民等［11］ 选取160例高血压病和2型糖尿病血淤证(100例)和非血淤证患者(60例)，用血液生化指标和实验技术，进行血小板CD62p基因、白细胞HSP70基因的表达的观察、对比、分析，并以健康人为对照。结果显示血淤证患者存在CD62p基因，HSP70基因的异常表达，两者表达水平较健康人显著升高(P<0.01),且基因异常表达水平的高低与血淤证各型之间存在密切关系。认为CD62p基因和HSP70基因为与血淤证有密切相关的基因。马民等［12］ 通过免疫组织化学方法观察148例原发性高血压血淤证患者热休克蛋白70基因表达水平，结果发现在原发性高血压血淤证中热休克蛋白70基因均有较高的表达，具有明显的相关性。
       3  闭塞性动脉硬化症血淤证与基因相关性的研究
           　　
       闭塞性动脉硬化症是临床常见的肢体缺血性疾病,可导致患肢的坏疽和溃烂。马民等［13］ 对闭塞性动脉硬化症患者bc1-2和HSP70，血小板CD62p基因表达与血淤证的关系进行了探讨。观察山东地区患者160例，其中血淤组100例，非血淤组60例，健康对照组15例，结果显示血淤证组白细胞中bcl-2、HSP70基因表达水平明显高于正常对照组与非血淤证组。认为血淤证形成的过程中,存在Bcl-2和HSP70的高水平表达。马民等［14］ 用流式细胞技术检测广东地区160例闭塞性动脉硬化症血淤证、非血淤证患者血小板CD62p基因表达，结果显示血淤证组CD62p基因表达水平明显高于正常对照组与非血淤证组，用行气活血中药治疗后的表达水平低于治疗前。认为闭塞性动脉硬化症血淤证患者存在CD62p基因的异常表达，并且其指标异常与基因表达水平的高低与血淤证各型之间存在密切关系，行气活血中药可有效抑制CD62p基因的异常表达。
       4  肿瘤血淤证与基因相关性的研究
          
       血清可溶性黏附分子CD44v6(sCD44v6)的表达在恶性肿瘤的侵袭、转移中起重要作用。陈曦等［15］ 探讨了胃癌患者sCD44v6术前水平与中医证型之间的关系，发现sCD44v6水平血淤证最高，和脾虚证、湿热证比较差异有显著性，认为血清sCD44v6和血淤证存在着一定的相关性。孙红等［16］ 对80例确诊乳腺癌患者术后检测C-erb-B2癌基因蛋白，结果血淤组C-erb-B2蛋白阳性率72.7%,明显高于其他各组。认为乳腺癌中医辨证分型中血淤证的患者C-erb-B2蛋白阳性率高，提示血淤证乳腺癌预后不良。
       5  其他疾病血淤证与基因相关性的研究
          
       李卫青等［17］ 采用聚合酶链反应(PCR)技术检测65例阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者(35例血淤证、30例非血淤证)及20例正常人的血管紧张素转换酶(ACE)基因型，结果发现OSAHS组血淤证患者ID基因型及Ⅰ等位基因频率明显高于非血淤证和正常对照组 (P<0.05)，认为ACE基因Ⅰ等位基因和ID基因型可能与OSAHS及OSAHS高血压的发病有关，且可能为OSAHS血淤证发病的易感基因。卢良君等［18］ 用序列特异性引物(SSP)法对江浙籍282例白癜风患者进行人类白细胞抗原(HLA)-DQB1等位基因检测，结果显示白癜风风湿蕴热型进展期及久病的淤血阻络型患者DQB1*0303阳性率显著高于对照组(P<0.05)。认为江浙籍汉族白癜风久病的淤血阻络型患者存在较显著的白癜风易感性，HLA-DQB1*0602可能与白癜风遗传易感体质相关。
       6  结语
          
       近年来, 血淤证与基因相关性的研究取得了可喜的成绩,从研究中可以看出，同是血淤证，不同的疾病，可以与相同的基因存在密切的相关性，如HSP70，CD62p，ACE，c-fos基因等；而不同疾病血淤证也可能有各自特异基因的异常表达。这证实血淤证与某些基因之间确实存在密切的关系，对揭示血淤证的客观实质有重要意义。但目前运用分子生物学技术研究血淤证多是涉及一两个基因产物如受体、酶类、细胞因子等的功能，少有从整体上来揭示证的实质，且研究大多为小样本。而基因之间相互关系的复杂性决定了血淤证与多个基因相关,某一基因可能与多个证候相关，这使得研究结论常常缺乏特异性和敏感性，在临床实践中缺乏可行性和指导性。在以后的研究中，需严格血淤证的诊断标准、纳入标准、排除标准, 选择多个相关基因进行大样本研究，这样才能进一步阐释血淤证的实质，对血淤证的预防、诊断和治疗将有更大的指导意义。
       【参考文献】
         　　［1］ 毛以林，袁肇凯，黄献平，等. 冠心病血淤证与血管紧张素转换酶基因多态性的相关性研究［J］.中国中西医结合杂志，2004，24（9）：776.
       
       ［2］ 黄献平，袁肇凯，谭光波，等. 冠心病血淤证患者血管紧张素转换酶基因多态性的检测分析［J］.中医杂志，2007，48（1）：65.
       
       ［3］ 黄献平，袁肇凯，毛以林，等. 冠心病血淤证凝血因子Ⅶ基因多态性的检测分析［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2006，4（2）：97.
       
       ［4］ 吴依芬，周迎春，王 刚，等.冠心病中医证型与GNB3基因C825T多态性的关联性分析［J］.四川中医，2006，24（4）：23.
       
       ［5］ 吴依芬，周迎春，张学森.中国汉族男性冠状动脉粥样硬化性心脏病患者中医证型与ABCA1基因R219K多态性的关联性［J］.中国临床康复，2006，10（7）：7.
       
       ［6］ 欧阳涛，宋剑南，李 林，等.冠心病痰淤证候与载脂蛋白E第一内含子增强子基因多态性关系的研究 ［J］.中国中医基础医学杂志，2005，11（6）：414.
       
       ［7］ 郭聂涛，祝向红，林 棉，等. 2型糖尿病血淤证患者红细胞CR1密度基因型表达、数量表达及黏附率临床分析［J］.中国中西医结合杂志，2004，24（6）：537.
       
       ［8］ 杨丽萍，王米渠，孙丽婷，等.肾虚糖尿病家系中的血淤证研究［J］.中华中医药杂志，2006，21（8）：476.
       
       ［9］ 马 民，陈利国, 屈 援，等. 高血压病、2型糖尿病血淤证与非血淤证患者白细胞中c-fos基因表达的研究［J］.新中医，2004，36（5）：22.
       
       ［10］ 马 民.高血压病、2型糖尿病血淤证与非血淤证患者辨证分型与白细胞中c-fos等基因表达的相关性研究［J］.中医杂志，2004，45（12）：930.
       
       ［11］ 马 民，陈利国. 血淤证患者血小板CD62p基因、白细胞HSP70基因的表达［J］.中国中西医结合杂志，2005，25（4）：307.
       
       ［12］ 马 民. 原发性高血压血淤证患者的热休克蛋白70 基因及c-fos基因——基因表达与微观辨证的关联［J］.中国临床康复，2005，9(23):246.
       
       ［13］ 马 民，张桂娟.闭塞性动脉硬化症血淤证患者bcl-2和HSP70基因的表达［J］.辽宁中医杂志，2006，33（3）：260.
       
       ［14］ 马 民，张桂娟，陈利国.行气活血复方对闭塞性动脉硬化症血淤证患者CD62p基因表达的调控［J］.江苏中医药，2006，27（4）：22.
       
       ［15］ 陈 曦，欧阳学农，戴西湖，等.胃癌患者sCD44v6表达与中医证型的关系及胃泰胶囊对其影响［J］. 中国中西医结合杂志，2005，25（1）：12.
       
       ［16］ 孙 红，李萍萍. 乳腺癌中医证候分类与预后相关性的初步研究［J］.中国中医基础医学杂志，2003，9（2）：72.
       
       ［17］ 李卫青，谢梦洲，李常青，等. 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血淤证与血管紧张素转换酶基因多态性的关系［J］.中国中医药科技，2006，13（2）：65.
       
       ［18］ 卢良君，许爱娥，李永伟，等. 白癜风中医证型与HLA-DQB1的相关性研究［J］.现代中西医结合杂志，2006, 15(14)：1873.