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       【关键词】  茜草
        摘要：目的：对不同部位及不同炒炭程度的茜草饮片中总蒽醌含量进行比较，为制定合理的茜草饮片炮制工艺和质量指标提供实验依据。方法：酸水解，碱显色和比色法测定总蒽醌的方法。结果：茜草饮片以细根中总蒽醌含量最高；炒炭后含量减少，且随温度升高含量降低明显。结论：茜草饮片切制应注意区分不同部位，炒炭应控制炮制温度及时间。
        关键词：茜草；不同部位；炒炭；总蒽醌；比色法
        The Comparison of the Total Anthraquinones Content in Different Parts of Rubia cordifolia L. Before and After Charcoal
        ZHANG Zhenling, SHI Yanbang, ZHOU Yan
        (Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou, Henan 450008, China)
        Abstract:Objective:To compare the total anthraquinones content in different parts of Rubia cordifolia L. in different degree charcoal and to offer reasonable experiment basis for establishing reasonable preparation technology and quality index.Methods:Acid hydrolysis, base display color and colorimetric method.Results:The content of anthraquinones  is high. in thin Rubia cordifolia L. Its content decreases after parching into charcoal. With the temperature going up, the content reduces obviously.Conclusion:When cut Rubia cordifolia L. medicinal slice, we should distribute different parts. When parch it into charcoal, we should control temperature and time.
        Key words:Rubia cordifolia L.;Different parts;Frying charcoal;Total anthraquinones;Colorimetric method
        中药茜草为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根及根茎，以河南、陕西产量最大，质量最优［1］。茜草为临床常用中药，其主要成分为蒽醌类及其苷类、奈醌类及其苷类、萜类、环烯醚萜类、环己肽类和多糖等［2］。茜草具有凉血、活血祛瘀、通经止痛和止血作用［3］，茜草多用于吐血，衄血，崩漏，外伤出血，经闭瘀阻，关节痹痛，跌扑肿痛等［4］。炒炭增强止血作用。2000版《中国药典》收载了茜草炭炮制方法：“取茜草片或段，置炒制容器内，用武火炒至表面焦黑色，内部焦褐色，取出晾凉”［4］。关于其具体的炮制条件如：炮制温度、炮制时间和合理的质量控制指标，没有明确的规定。蒽醌是茜草主要活性成分之一，茜草中蒽醌的含量直接影响到其临床疗效。本文对不同部位及不同炒炭程度茜草中的总蒽醌含量进行测定比较，确定炒炭对茜草中总蒽醌含量的影响，为寻找合理的炮制工艺和质量控制指标提供实验依据。
           1实验材料
        1.1实验仪器7230G分光光度计，H66025T超声清洗机，FN101-3型鼓风干燥箱，NL-A方型调节式中药切片机，FZ102微型植物试样粉碎机，METTLER AE240型十万分之一电子天平，Sartorius万分之一电子天平，切药刀。
        1.2试剂和药品甲醇(天津科密欧化学试剂开发中心)；浓盐酸，乙醚，氢氧化钠。
        1.3药材购于郑州市药材公司，经河南中医学院鉴定教研室曹继华教授鉴定为茜草科茜草属植物茜草Rubia cordifolia L.。
           2样品制备
        2.1茜草饮片的炮制
        2.1.1茜草的切制取茜草原药材，根据根的粗细分为：A.茜草主根；B.茜草根端膨大部分；C.茜草细根。分别抢水洗，用湿抹布盖上闷润至用弯曲法检查至能对折不断，用药刀把细根切为5 mm段，把较粗根和根端膨大部分用切片机切厚片，于50℃恒温箱中烘干，均过1号筛(10目)。筛下的碎屑合并为D.茜草碎屑细末。170℃茜草细根炒炭编号为C1，200℃茜草细根炒炭编号为C2。
        2.1.2烘制取切制后茜草饮片(不分不同部位)各200 g共5份，一份不烘编号为E，另外4份分别调整温度于烘箱中200℃烘15 min，220℃烘15 min，240℃烘15 min，编号分别为E1，E2，E3，E4。
        2.1.3粉碎用粉碎机把各样品分别粉碎为100目细粉，磨口三角瓶盛装以备用。
        3总蒽醌含量的测定
        3.1测定条件的确定7230G型分光光度计，检测波长490 nm。
        3.2对照品溶液的制备精密称取1，8二羟基蒽醌对照品0.005 01 g置于100 ml容量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀，每1 ml含1，8二羟基蒽醌对照品50.1 μg/ml。
        3.3检测波长的选择吸取一定量对照品溶液，挥干乙醚，加5%NaOH溶液10 ml显色，在7230型分光光度计上测定从475～520 nm处的吸收值，最大吸收峰为490 nm。
        3.4线性化范围实验用移液管精密吸取对照品溶液(50.1 μg/ml)1，2，3，4，5 μl于蒸发皿中，挥干乙醚，加5%NaOH溶液10 ml显色，测定其吸收度。结果见表1。以吸收值为纵坐标，对照品量(μg)为横坐标绘图，过原点绘制标准曲线(见图1)。结果表明在0～250.5 μg线性良好，回归方程为Y=0.003 3X+0.018 3，相关系数r=0.999 0。
        3.5稳定性实验用移液管精密吸取对照品溶液4 ml，挥干乙醚，加5%NaOH溶液10 ml，测定其吸收值，每10 min测1次，历时1 h，算出含量，见表2，结果表明总蒽醌在1 h内基本稳定。
        表1总蒽醌线性化范围实验（略）
       
    图1标准曲线图（略）
        表2总蒽醌稳定性实验（略）
        3.6精密度实验用移液管精密吸取对照品溶液6份各3 ml，挥干乙醚，各加5%NaOH溶液10 ml，测定吸光度，算出含量，结果见表3，表明精密度良好。
        表3总蒽醌稳定性实验（略）
        3.7加样回收率实验取样品C1各0.05 g 6份，精密称定，加大叶茜草素对照品，按样品液的制备过程处理，测其吸收值，算出含量，得加样回收率。结果见表4。
        表4加样回收率实验（略）
        3.8样品含量的测定取A，B，C，D，A1，B1，C1，C2，C3样品各0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20 μl，称定重量，浸泡过夜，超声振荡30 min，再称定并用甲醇补足减失的重量，混匀后离心，吸取上清液4 ml，挥尽甲醇，残渣加10 μl水溶解，加浓盐酸1 ml，沸水中水解30 min，乙醚萃取5次，10 ml/次。合并乙醚液，挥干乙醚，5%NaOH溶液1 ml显色，摇匀，测其吸收值。由标准曲线算出含量。
        4结果
        4.1由表5可知茜草不同部位中，总蒽醌含量由高到低依次为：茜草细根、茜草根端膨大部分、茜草碎屑细末、茜草主根、茜草原生粉。
        4.2由表6可知茜草不同程度炒炭中，总蒽醌含量依次为：茜草细根炭炒170℃＞茜草炭烘200℃＞茜草细根炭炒200℃＞茜草炭烘220℃＞茜草炭烘240℃＞茜草炭烘260℃。
        4.3由表5和表6比较可知不同部位的茜草饮片炒炭后总蒽醌含量均比炒炭前减少，且随温度的升高含量逐渐减少。
           5讨论
        5.1茜草切片后总蒽醌含量比原药材细粉升高，说明茜草临床以饮片入药是符合一定的科学道理的。其原因可能是切制过程中抢水洗去了泥土杂质，并且低温干燥，使其含水量降低，有效成分相对提高所致。
        表5茜草不同部位总蒽醌含量测定（略）
        5.2茜草中含有的蒽醌易升华，本实验结果也证明，不同部位茜草饮片炒炭后总蒽醌含量均减少，并且随温度升高含量降低明显。这与文献报道茜草炒炭时有彩色烟相一致。炒炭过程中有浓郁的香气散发，也可能与茜草中蒽醌类成分升华后含量降低有关。
        5.3茜草生品具有凉血活血作用。有药理实验研究证明，茜草蒽醌具有较强的解热和镇痛作用［5］，很强的抗炎免疫作用［6］，并能明显降低小鼠血清凝血素的含量，抑制机体免疫反应，改善局部炎症反应而发挥抗炎抗风湿作用［7］。炒炭后其总蒽醌含量明显减少，减少了其降低血清凝血素的作用，其凝血作用就会增加，这和茜草传统炒炭用来增强止血效果相一致。
           参考文献：
        ［1］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海：上海人民出版社，1977：15671568.
        ［2］楼之岑，秦波.常用中药材品种整理和质量研究，第2册［M］.北京：北京大学医学出版社，1995：883934.
        ［3］雷载权.中药学［M］.上海：上海科学技术出版社，1995：189189.
        ［4］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：187187.
        ［5］冯秀香，许兰芝，高尔，等.茜草总蒽醌的解热镇痛作用［J］.潍坊医学院学报，2002，24(1)：67.
        ［6］陈维宁，许兰芝，冯秀香，等.茜草总蒽醌的抗炎免疫作用［J］.潍坊医学院学报，2002，24(1)：810.
        ［7］许兰芝，赵世琴，胡庆伟，等.茜草总蒽醌的抗炎抗风湿作用及机制［J］.潍坊医学院学报，2002，24(1)：1113.
        (河南中医学院，河南 郑州450008)