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针刺对抑郁模型大鼠行为学的影响
作者:周胜红    
作者单位:山东省中医药研究院,山东 济南 250014;山东中医药大学2005级博士研究生,山东 济南 250014

《时珍国医国药》 2008年 第1期

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       【摘要】 
       目的实验观察针刺对抑郁模型大鼠行为学的影响。方法以 220 V,0.8 mA的方波刺激Wistar大鼠15 s,间隔45 s/次,共60次,总刺激时间15 min,进行不可逃避的前休克动物(pre-shocked animals)制作,形成学习无助大鼠模型,采用Open-Field法进行动物行为学敞箱实验及条件回避实验,观察针刺对模型大鼠行为学的影响。结果针刺对学习无助模型大鼠水平及垂直运动均有明显改善,且显著提高大鼠的逃避成功次数、缩短逃避潜伏期(P<0.01)。结论针刺可明显改善抑郁症状,促进抑郁症恢复。
       【关键词】  针灸疗法 抑郁症
       Effects of Acupuncture on Behavior Changes  of Depressed Model Rats 
       ZHOU Sheng-hong
       (Shandong Academy of Traditional Chinese Medicine, Jinan,Shandong 250014, China; Doctoral Student, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan, Shandong 250014, China)
       Abstract:ObjectiveTo observe the effect of acupuncture on behavior changes in the Wistar rats of depression.Methods40 male Wistar rats were randomly divided into 4 groups,namely acupuncture group, drug group, model group and normal control group.The rats were stimulated 15 minutes by quadratal wave of 220v, 0.8mA to make Wistar rat model of studying helplessness.The animal behavioral spacious box testing and conditioned  avoidance testing were performed with the method of Open-Field.Results The crossing and rearing score of model rats were obviously improved and the time of successful avoidance was obviously enhanced by acupuncture,as well as shorten avoidance latent period(P<0.01).ConclusionAcupuncture can obviously improve the symptoms of depression.
       Key words:Acupuncture and moxibustion therapy;  Depression
       
       抑郁症是一种常见的情绪障碍性疾病,表现为一种持久的抑郁状态,以心境低落、躯体不适和睡眠障碍等为主要症状[1]。是危害全人类身心健康的常见病,其终生患病率为6.1%~9.5%[2]。据专家预测,到2020年,精神疾病在人们的疾病负担中将列首位,而抑郁症则占精神科疾病的47%[3]。抑郁症及其治疗引起内外广大学者的广泛重视。本研究旨在通过观察针刺对抑郁模型大鼠行为学的影响,评定针刺抗抑郁疗效。
       1  器材
       1.1  药品多虑平:南京白敬宇制药厂产品,批号:20040912。
       1.2  动物(200±20)g Wistar雄性大鼠,由山东大学实验动物中心提供,合格证号:鲁动质字:20040816。
       1.3  器材“华佗”牌32号1.0寸针灸针,苏州医疗用品厂产品;穿梭箱:山东中医药大学中西医结合基础研究室提供,根据文献介绍制备[4],大鼠穿梭箱有两室,每室30 cm×30 cm× 20 cm,可人为开闭,箱底为不锈钢栅条,条间距离为1 cm,两室栅条可错时通电,一室与刺激器接通时,另一室为安全室;敞箱:根据文献介绍,自行制备[5],标准为40 cm×80 cm×80 cm,周壁、底面为黑色,底面以白线划分为面积相等的25块。
       2  方法
       2.1  模拟临床建立大鼠学习无助模型将大鼠放入穿梭箱,中间通道关闭,通过底部的金属栅条给予220V,0.8 mA的方波刺激,刺激15 s,间隔45 s/次,共60次,总刺激时间15 min,进行不可逃避的电休克即前休克动物(pre-shocked  animals)制作[1]。
       2.2  分组及给药(200±20)g  Wistar雄性大鼠40只,按体重均衡随机分为空白对照组、模型对照组、阳性药多虑平组、针刺组,每组10只。空白组及模型对照组分别给予凉开水1 ml/100 g,ig;多虑平对照组给予多虑平3 mg/kg,生理盐水配成30%水溶液1 ml/100g·ig ;空白对照组大鼠只放入穿梭箱内而不进行电刺激,时间相同。第2天除重复进行前一天实验并开始给药,连续给药14 d。最后一次给药后24 h,采用Open-Field法进行动物行为学敞箱实验及条件回避实验,记录并统计实验数据。
       2.3  针刺取穴及操作方法针刺组根据《实验针灸学》[6]大鼠穴位定位方法,选择百会、内关、神庭、三阴交穴,并参照人和动物的穴位解剖结构特点,在动物针灸穴位图谱的基础上,于大鼠前正中线上,额顶骨缝交界线前方处定位神庭穴。其他穴位仿人取穴。针刺方法: 穴位常规消毒,百会穴向前斜刺,神庭穴向上斜刺,进针深度约为0.2 cm。内关直刺0.3 cm,三阴交直刺0.2 cm。每穴行均匀捻转刺激30 s,留针10 min,每日治疗1次,连续14 d。最后一次治疗后24 h,采用Open-Field法进行动物行为学敞箱实验及条件回避实验,记录并统计实验数据。
       2.4  敞箱实验将各组大鼠依次放入自制敞箱,以动物穿越底面块数为水平运动(crossing)得分,直立次数为垂直运动(rearing)得分,记录其水平运动、垂直运动次数,每只动物测定1次,测定时间为3 min/次,记录水平运动得分和垂直运动得分情况。
       2.5  条件回避实验(conditioned  avoidance  testing)继敞箱实验后,大鼠放入穿梭箱后适应5 s,进行铃声刺激,非条件刺激为足电休克0.8 mA,在铃声响起3 s后开始方波输出电刺激,当动物逃到安全室后停止铃声和刺激,如未能逃避时刺激达30 s时停止。1次/min,共进行30次,刺激间隔为27 s。测定回避成功次数和逃避潜伏期。 动物在铃声开始3 s内逃到安全室,记录回避成功一次,逃避潜伏期为0;刺激后才逃避的,其潜伏期记录是从刺激开始到逃避完成的时间;到最后未能逃避的,则潜伏期为30 s。
       2.6  统计学处理所有实验数据用 ±s表示,计量资料采用t检验、q检验进行差异显著性检验;计数资料采用四格表的确切概率法检验。
       3  结果
       3.1  针刺对学习无助模型大鼠敞箱实验的影响
       3.1.1  水平运动针刺组、多虑平组、空白组均优于模型组。结果见表1。
       表1  对大鼠水平运动的影响(略)
       为避免统计学上第2类错误,出现假阳性结果,本组数据采用q检验。结果见表2。
       表2  q检验结果(略)
       由此可见,空白组与模型组有显著性差异,说明此造模方法成功;针刺组及多虑平组与模型组有显著性差异,其差异具有统计学意义;而前两组与空白组的差异及前两组间的差异不具有统计学意义,说明针刺与多虑平均有改善抑郁模型大鼠水平运动状态的作用,且二者作用相似。
       3.1.2  垂直运动各处理因素对实验动物垂直运动的影响无显著差异。结果见表3。
       表3  对大鼠垂直运动的影响(略)
       为避免统计学上第2类错误,出现假阳性结果,本组数据采用q检验。结果见表4。
       表4  q检验结果(略)
       由此可见,各处理因素对大鼠的垂直运动的影响无统计学意义。
       3.2  针刺对学习无助模型大鼠条件回避实验(conditioned  avoidance  testing)的影响
       3.2.1  回避成功空白组、多虑平对照组、针刺组大鼠,回避成功次数较多。结果见表5。
       表5  回避成功次数(略)
       本组数据采用q检验。结果见表6。
       表6  q检验结果(略)
       由此可见,模型组与空白组具有非常显著性差异,说明造模成功。针刺组与模型组有显著性差异,其差异具有统计学意义,说明针刺可以显著提高实验动物的回避成功次数,同时与多虑平组差异也无统计学意义。多虑平组与模型组有非常显著性差异,说明多虑平可以明显提高实验动物的回避成功次数,但仍与空白组有显著性差异。
       3.2.2  回避潜伏期空白组、多虑平对照组、针刺组,回避成功较多,部分回避不成功的大鼠回避潜伏期也较短。结果见表7。
       表7  回避潜伏期基本数据(略)
       本组数据采用q检验。结果见表8。
       表8  q检验结果(略)
       由此可知,模型组与空白组具有非常显著性差异,说明模型成功;针刺和用药组与模型组都具有非常显著性差异,其差异具有统计学意义,而针刺与用药组之间的差异不具统计学意义;这两组与空白组间的差异也不具统计学意义,即针刺与多虑平均可使实验动物的由于抑郁状态而影响的回避潜伏期的改变恢复正常。
       4  讨论
       
   
       抑郁症属祖国医学“郁证”范畴。综合历代医家文献,结合现代医学对抑郁症的特点和诊断标准的认识,认为情志不舒是抑郁症的主要致病因素,肝气郁结、气郁伤神为其主要病机,属标本俱实之症,其病位在肝,涉及心神,肝郁伤神是抑郁症发病的关键。因为情志不舒可影响肝的疏泄功能,而致肝气郁结,气机不畅,久郁心神不得所养而致伤神,从而出现精神抑郁、胸胁胀痛、易怒易哭等症状,故治疗当以疏肝理气、解郁安神为主。方中神庭为督脉穴位,督脉入络脑,与脑相连,脑居颅内,为元神之府,故取之可以起到宁心安神,醒神开窍之功效;百会亦为督脉穴位,是诸阳经与督脉的交会穴,能清利头目;三阴交属足太阴脾经经穴,有调理、健壮脾胃的功能,取之可健脾和胃、补益气血;内关为手厥阴心包经络穴,气通三焦,三焦主气,取之可宽胸理气、行气开郁。诸穴合用,共奏理气、解郁、安神之功效。
       
       现代医学认为第二信使系统及其最初接收胞外信号的G蛋白都与抑郁症的病理生理有密切的关联[7]。近年的研究发现抑郁症的发生还与细胞免疫功能降低,免疫细胞数目减少或免疫细胞因子水平升高有关。此外 ,5-羟色胺和去甲肾上腺素的降低也与抑郁症的发病密切相关[8,9]。
       
       我们实验观察了针刺对抑郁模型大鼠行为学的影响,实验结果显示:针刺可以显著改善实验动物的水平运动(P<0.05),与正常大鼠及多虑平组无差异 (P>0.05)。在本实验中,各处理因素对实验大鼠垂直运动的影响,不具统计学意义(P>0.05);条件回避实验提示针刺可显著提高实验动物的逃避成功次数(P<0.05),针刺对逃避成功次数的提高与多虑平组无明显差异(P>0.05)。对于未逃避成功的实验大鼠,针刺也可以显著缩短其逃避潜伏期(P<0.01),使其与正常大鼠及多虑平组无差异(P>0.05)。说明针刺可明显改善抑郁症状,为临床治疗抑郁症提供了新的思路和方法,但针刺抗抑郁机理以及最佳疗程等诸多问题还需在今后的实验和临床研究中进一步探讨。
       【参考文献】
           [1] 沈渔村.精神病学[M].北京:人民卫生出版社,1998: 358.
       
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经典中医古籍

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