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制川乌与白芍不同配伍比例对总生物碱含量的影响
作者:余成浩,彭成, 余葱葱,郭力    
作者单位:成都中医药大学,四川 成都 610075

《时珍国医国药》 2008年 第1期

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       【摘要】 
       目的研究制川乌白芍配伍药对的不同配伍比例在水煎液环境中对总生物碱含量的影响,探讨配伍规律的科学性和合理性。方法采用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱的含量。结果与制川乌单煎液相比较,制川乌白芍1∶1,2∶1配伍组含量降低,而2∶3,1∶2配伍组含量升高。在各配伍组中,总生物碱含量大小为制川乌白芍2∶3>1∶2>2∶1>1∶1。结论在制川乌配伍白芍各配伍组中,总生物碱含量呈现升高趋势,为不同配伍关系在临床使用的减毒增效科学内涵提供一定的科学依据。
       【关键词】  配伍药对 酸性染料比色法 总生物碱
       The Effect on the Total Alkaloids of Radix Aconiti Preparata(RAP)Combiend with Radix Paeoniae Albae(RPA)in Different Ratios
       YU Chenghao, PENG Cheng*, YU Congcong, GUO Li
       (Chendu University of TCM,Chengdu,Sichuan 610075,China)
       Abstract:ObjectiveTo study the effect on the total alkaloid contents of Radix Aconiti Preparata(RAP)combined with Radix Paeoniae Albae(RPA)in different ratios and circumstance,and to investigate the sciencity and rationality of compatibility disciplines.MethodsAcid dye colorimetry was adopted to determine the total alkaloid contents.ResultsTo compare with RAP decoction,the content of total alkaloids showed step-up tendency in ratios of 2∶3,1∶2,and step-down tendency in ratios of 2∶1,1∶1.In different ratios,the contents of total alkaloids were 2∶3>1∶2>2∶1>1∶1.ConclusionThe content of total alkaloids shows step-up tendency.This study provides scientific foundation of synergia and attenuation for clinic application of different compatibility relationship.
       Key words:Double-drugs compatibility;  Acid dye colorimetry;  Total alkaloids contents
       
       制川乌与白芍配伍在临床上是一常用治疗痹证的配伍药对,最早见于汉代张仲景《金匮要略》中的乌头汤“病历节不可屈伸疼痛,乌头汤主之[1]。”制川乌配伍白芍可以增强镇痛、抗炎、免疫调节等作用,常用于治疗类风湿性关节炎、腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、膝关节积液等[2~6]。本实验通过测定制川乌白芍配伍药对的不同配伍比例在水煎液环境中的总生物碱含量,探讨配伍规律的科学性和合理性。
       1  器材
       1.1  药材制川乌(Radix Aconiti Preparata),本品为川乌的炮制加工品,购自四川江油恒源药业有限公司,经产地采收、加工而得,由成都中医药大学中药鉴定教研室严铸云副教授鉴定。白芍(Radix Paeoniae Alba),为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根,购自成都五块石中药材市场,由成都中医药大学中药鉴定教研室唐声武教授鉴定,产地为四川省中江县。
       1.2  仪器与试剂紫外/可见分光光度计,Perkin-Elmer instru-ments Lambda 35 UV/Vis spectrometer;pHS-2型酸度计(上海雷磁仪器厂);Sartorius BP211D电子天平(德国);R501旋转蒸发器(上海申顺生物科技有限公司);乌头碱(Aconitine 0720-9807)购自中国药品生物制品检定所;溴甲酚绿等。
       2  方法
       
 
       2.1  pH 6.1±0.1溴甲酚绿染料的配制取27.16 g醋酸钠(NaAC·3H2O),加入900 ml水使溶解,用冰醋酸缓缓调节pH至6.1±0.1,加水至1 000 ml,备用。取溴甲酚绿约100 mg,用0.05 mol/L氢氧化钠3.5 ml充分研磨溶解后,再加入pH 6.1±0.1的醋酸-醋酸钠缓冲液至200 ml,过滤,取滤液备用[7]。
       2.2  对照品溶液的制备取乌头碱对照品约10 mg,精密称定,置100 ml量瓶中,用二氯甲烷使其溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
       2.3  最大吸收峰位的确定取溴甲酚绿与乌头碱形成离子对的氯仿溶液,照分光光度法[8]在紫外分光光度计上从200~700 nm波长范围内扫描,其最大吸收峰位在414~416 nm,与文献报道一致[9]。乌头碱紫外扫描图见图1。
       图1  乌头碱紫外扫描图(略)
       2.4  标准曲线的绘制精密量取乌头碱标准液0.00,0.50,1.00,1.25,1.50,2.00,2.50 ml,分别置于分液漏斗中,并精密加入氯仿至20.0 ml。以第1份为空白对照,然后各加入10ml pH(6.1±0.1)溴甲酚绿染料,充分振摇,静置1 h,氯仿液过滤至25 ml容量瓶中并用氯仿稀释至刻度。于415 nm波长处,分别测定空白、供试液的吸收度。结果见表1。以生物碱量与吸收度值作图并经直线回归处理,得线性方程式Y=3.093 1X-0.023 1,r=0.999 4。结果表明,乌头碱在51.0 ~255.0 μg 范围内,线性关系良好。乌头总生物碱标准曲线图见图2。
       表1  总生物碱标准曲线测定结果(略)
       图2  乌头总生物碱标准曲线(略)
       2.5  制川乌配伍白芍样品溶液的制备
       2.5.1  制川乌单煎液制川乌粉碎成粗颗粒,称取100 g 置于圆底烧瓶中,加水10 倍量,浸泡30 min,回流,煮沸后煎煮2 h,趁热过滤,用适量水洗涤残渣3 次,合并洗液和滤液,置于旋转蒸发器中,在70℃下减压浓缩至1∶1 体积,备用。
       2.5.2  制川乌白芍=2∶1 配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100 g,置于圆底烧瓶中,加水10 倍量,浸泡30 min,回流,煮沸后1 h,加入已用10 倍量水浸泡30 min 的白芍颗粒50 g,共同煎煮1h,趁热过滤,用适量水洗涤残渣3 次,合并洗液和滤液,置于旋转蒸发器中在70℃下减压浓缩至1∶1 体积,备用。
       2.5.3  制川乌白芍=1∶1 配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100 g,白芍粗颗粒100 g,煎煮及浓缩方法同“2.5.2”项。
       2.5.4  制川乌白芍=2∶3 配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100 g,白芍粗颗粒150 g,煎煮及浓缩方法“2.5.2”项。
       2.5.5  制川乌白芍=1∶2 配伍水煎液称取制川乌粗颗粒100 g,白芍粗颗粒200 g,煎煮及浓缩方法“2.5.2”项。
       2.6  含量测定方法取制川乌水煎液、制川乌白芍2∶1,1∶1,2∶3,1∶2 配伍水煎液适量,用氨水调pH =9,用乙醚-氯仿(3∶1)的混合液萃取3 次,混合液置蒸发皿中,水浴蒸干,残渣加适量氯仿溶解,转移至分液漏斗中,加氯仿至20 m1,即得。自“2.4”项“加入10 ml pH(6.1 ±0.1)溴甲酚绿染料”起至“415 nm 波长处”依法测定,计算求得总生物碱含量。
       3  结果
       
   
       与制川乌单煎液相比较,配伍白芍后能够部分降低或增加各组中总生物碱的含量,制川乌白芍1∶1 降低6.5%,2∶1 降低4.4%,而2∶3 则升高18.7%,1∶2 升高13.4%。
       
       在各配伍组中,制川乌白芍2∶1 比1∶1 组的总生物碱含量略高(2.2%),但二者基本保持在同一水平;制川乌白芍2∶3 比1∶2 组的总生物碱含量略高(4.7%),但两者基本在同一水平;各组总生物碱含量大小为制川乌白芍2∶3 >1∶2 >2∶1 >1∶1。结果见表2 及图3 ~5。
       表2  制川乌白芍配伍对总生物碱含量的影响(略)
       图3  制川乌单煎液紫外扫描图(略)
       
       图4  制川乌白芍配伍紫外扫描图(略)
       图5  制川乌白芍配伍对总生物碱的影响(略)
       4  讨论
       
   
       川乌、草乌配伍白芍具有重要的意义,其一是可以防止郁而化热,且能监制温燥伤阴;其二是既可以增强宣痹通经之力,又能防止寒凝伤络;其三是形成了寒热配伍、增效减毒的配伍结构。
       
       通过对《中医方剂大辞典》发现208 首川乌与白芍配伍的方剂,进行统计分析表明:川乌配伍白芍1∶1 的方剂占59.96%,川乌配伍白芍1∶2,川乌配伍白芍2∶1 和川乌配伍白芍2∶3 的方剂共占15.29%。乌头配伍白芍配伍地位也有君臣佐使不同,大多是用于风湿病关节疼痛、中风麻木疼痛、跌打损伤疼痛等证。所以本实验选择4 个配伍比例(2∶1,1∶1,2∶3,1∶2)进行研究。
       【参考文献】
           [1] 李克光.金匮要略讲义,第1 版[M].上海:上海科学技术出版社,1991:62,111 .
       
       [2] 王绍海.乌头汤加味治疗类风湿性关节炎[J].天津中医学院学报,2000,19(1):26.
       
       [3] 陈立富.增效乌头汤治疗腰椎间盘突出症105 例[J].河北中医,1995,17(1):27.
       
       [4] 钱邦平.加味乌头汤内服配合牵引治疗腰椎间盘突出症[J].新疆中医药,2000,18(2):25.
       
       [5] 陈邦芝.细辛乌头汤治疗坐骨神经痛52 例[J].辽宁中医杂志,1995,22(7):318.
       
       [6] 郗西军,姚登强.乌头防己汤治疗膝关节囊积液37 例[J].内蒙古中医药,1997,16(2):8.
       
       [7] 乌兰娜日,王玉华,王 伟,等.酸性染料比色法测定附子理中丸中总乌头生物碱的含量[J].现代应用药学,1996,13(4):30.
       
       [8] 国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005:附录ⅣA.
       
       [9] 中华人民共和国卫生部.药品标准中药成方制剂,第1 册[ M].WS3 -B -0046 -89,46.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)