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       【摘要】 
       目的观察翻白草黄酮对糖尿病小鼠血糖和血清胰岛素和胰岛素抵抗的影响。方法翻白草经溶剂提取,聚酰胺柱分离提取得黄酮提取物；用四氧嘧啶腹腔注射造模，将造模成功的小鼠随机分成为高剂量（216 mg·kg-1·d-1）、低剂量（108 mg·kg-1·d-1）、模型对照组。连续给药14 d后，观察翻白草黄酮对糖尿病小鼠体重、血糖、血清胰岛素和胰岛素抗体的影响。结果翻白草黄酮能很好地降低糖尿病小鼠的血糖，提高血清中胰岛素水平，但对血清胰岛素抗体影响不大。结论翻白草黄酮对糖尿病的治疗作用，可能是通过降低血糖水平和提高血清胰岛素水平来实现的。
       【关键词】  翻白草黄酮 胰岛素 胰岛素抗体 血糖
       The Effects of Flavonoids  from  Potentilla  discolor Bunge. on the Levels of Insulin and Insulin Antibody in Serum  in Diabetes Mice
       WANG Xiaomin, ZOU Zhijian, CHEN Yuemei, FENG Jingsong
       1.Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330006, China;
       2. The Fourth Affiliated  Hospital of Nanchang University, Nanchang, 330003 China
       Abstract:ObjectiveTo study the effects of flavonoids from Potentilla  discolor  Bunge.(FPB) on the blood glucose ,the levels of insulin and insulin antibody in serum in diabetes mice and its mechamisms. MethodsFPB were obtained from Potentilla  discolor  Bunge. through solvent extraction and polyamide columnar Chromatography . The model mice of alloxan-diabetes were randomly divided into these groups:high dose group（216 mg·kg-1·d-1）,low dose group（108 mg·kg-1·d-1） and model group. Body weight,blood glucose,the levels insulin and insulin antibody in serum  were measured after 14 days.ResultsFPB decreased blood glucose and  enhanced level of  insulin in serum, but level of insulin antibody in serum  was not significantly changed.ConclusionFPB can decrease blood glucose  by protecting  the islet β cell in diabetes mice.
       Key words: flavonoids from;  Potentilla;  Discolor Bunge
       翻白草为蔷薇科（Potenilla discolor bunge）植物的干燥全草，民间习用翻白草治疗糖尿病，且近年来实验研究和临床报道进一步证实该药有降糖作用［1,2］。翻白草在植物各部分均含有黄酮类化合物［3］。黄酮类化合物对糖尿病及其并发症具有多位点、多个环节、多机制的综合协同作用，从而对它具有一定的防治作用。但关于翻白草黄酮对糖尿病保护作用未见报道。本实验旨在通过研究翻百草的有效成分——翻白草黄酮对糖尿病小鼠血糖及血清胰岛素和胰岛素抵抗的影响，探讨其对糖尿病的保护作用。
       1  器材与方法
       1.1  药物翻白草（采于江西井冈山）经本院中药鉴定室鉴定为中药翻白草的全草。经溶剂提取，聚酰胺柱分离得到黄酮提取物。实验中配成高( 2.16 mg·kg-1·d-1)、低（1.08 mg·kg-1·d-1）剂量的混悬液。
       1.2  动物昆明种雄性小鼠60只，质量18～22 g，江西中医学院实验动物中心提供（动物合格证号：SYXK2004-0001）。自然光照，自由进水进食。
       1.3  试剂与仪器
       四氧嘧啶（由sigma公司生产）；葡萄糖试剂盒（北京中生生物公司）；碘〔125Ⅰ〕胰岛素放射免疫分析药盒（北京科美东雅生物公司）；碘〔125Ⅰ〕胰岛素抗体放射免疫分析药盒（北京北免东雅生物公司）；GS-911γ放射免疫计数器（中国科学技术大学科技实业总公司）；UV-2102C型紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）；TD4001B电子天平（余姚市金诺天平仪器有限公司）。
       1.4  方法
       1.4.1  动物模型建立及分组小鼠称重标记后禁食12 h。将四氧嘧啶溶解到生理盐水中分别以 200 mg/kg腹腔注射。腹腔注射后2h灌胃50％葡萄糖液0.5 ml∕只。自然状态饲养 3 d后,禁食12 h眼眶取血测血糖。血糖浓度高于11.1 mmol/L的为糖尿病小鼠［4］。将造模成功60只的小鼠随机分为高剂量组、低剂量组、模型对照组。
       1.4.2  给药方法正常对照组和模型对照组给予生理盐水0.4 ml/只，高剂量组给予翻白草黄酮216 mg/kg灌胃，低剂量组给予翻白草黄酮108 mg/kg。两周后禁食12 h称体重后摘眼球取血清，测血糖、血清胰岛素和胰岛素抗体数值。
       1.4.3  检测方法
       血糖采用酶法，血清胰岛素和胰岛素抗体采用放射免疫法。
       1.4.4  统计方法
       各组实验数据采用±s表示，用SPSS13.0 软件包处理，各组比较用单因素方差分析，P＜0.05为有统计学意义。
       2  结果
       2.1  一般状况及体重情况在造模3 d后，都出现了“三多一少”的现象。给药后高剂量组、低剂量组的情况都有好转。高剂量组、低剂量组体重有所上升；而模型对照组体重下降，与高剂量组、低剂量组比较均有显著性差异(P＜0.05）。结果见表1。表1  翻白草黄酮对四氧嘧啶糖尿病小鼠体重的影响（略）
       2.2  翻白草黄酮对血糖的影响模型对照组、高剂量组和低剂量组血糖均有下降，其中高剂量组小鼠血糖下降最为显著，低剂量组和高剂量组血糖下降均达到正常水平，而模型对照组小鼠血糖水平仍高于正常水平。低剂量组和高剂量组血糖水平与模型对照组比较均有显著性差异(P＜0.05）。结果见表2。表2  翻白草黄酮对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响（略）
       2.3  翻白草黄酮对血清胰岛素和胰岛素抗体的影响模型对照组血清胰岛素水平下降，血清中胰岛素抗体结合率明显升高。高、低剂量组胰岛素水平均升高，但高剂量组胰岛素水平与模型对照组比较有显著性差异(P<0．05)。而正常对照组和给药组血清中胰岛素抗体结合率均有下降，但与模型对照组比较无显著性差异。结果见表3。表3  翻白草黄酮对四氧嘧啶糖尿病小鼠血清胰岛素和胰岛素抗体的影响（略）
       3  讨论
       糖尿病属于祖国医学“消渴”病范畴。祖国医学认为，该病基本病机是阴津亏损、燥热偏胜，以阴虚为本，燥热为标，两者互为因果。在治疗上以清热润燥、养阴生津为基本治则［5］。翻白草有清热润燥、凉血解毒、止血消肿、止痢之功效。翻白草因可清除“消渴”患者的燥热，燥热既除，则津液自生，达到清热润燥、养阴生津之目的，故能有效缓解“消渴”之症状。
       自由基与糖尿病及其并发症的发病密切相关。黄酮类具有抗氧化和清除自由基作用。黄酮类化合物可降低糖尿病大鼠血清过氧化脂质含量，增强谷胱甘肽过氧化物酶的活力，抑制脂质过氧化反应，对抗四氧嘧啶所致的胰岛β细胞损伤，促进胰岛β细胞修复和再生［6］，而且黄酮类化合物有刺激胰岛素释放、促进胰岛素与靶细胞上专一受体结合作用，增加外周糖的利用等机制而发挥降低血糖的作用。本实验结果表明翻白草黄酮能使糖尿病小鼠的血糖迅速下降，并且高剂量要略强于低剂量，表明翻白草黄酮具有良好降糖作用，且翻白草黄酮能够使四氧嘧啶破坏胰岛β细胞得以修复和再生，促进胰岛素释放，提高血清中的胰岛素水平，但血清中胰岛素抗体结合率水平有所下降，与模型对照组比较无显著性差别，可能与给药时间较短有关。翻白草黄酮降低血糖作用可能是通过促进破坏胰岛β细胞修复和再生，增加胰岛素水平来实现的。
       【参考文献】
         　　［1］王晓敏，邹志坚，王建红，等.翻白草水提液对糖尿病小鼠降血糖作用［J］.江西中医学院学报，2005，17（2）：53.
       
       ［2］马瑛,温少珍．翻白草治疗Ⅱ型糖尿病50例疗效观察［J］.中草药, 2002, 33(7):644.
       
       ［3］孟令云，杨 玲，王佳祥,等.翻白草中黄酮类化合物的液相色谱分析［J］.中草药，2005，36（3）：445.
       
       ［4］季敏,吴国球. 橄榄叶提取物对正常及糖尿病小鼠血糖和血脂和水平的影响［J］.东南大学学报（医学版），2003,22(4):236.
       
       ［5］朱爱勤. 糖尿病证治八法［J］.黑龙江中医药，2001，（4）：5.
       
       ［6］Miyake Y,yamamoto K,Tsujihara N,et al.Protective effect of lemon flavonoids on oxidative stress in diabetic rats［J］.Lipids,1998；33(7): 689.