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       【摘要】 
       目的探讨红景天超微粉和红景天乙醇提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用，同时比较红景天超微粉和红景天乙醇提取物在相同生药剂量下肝保护作用的差异及量效关系。方法分别以红景天超微粉物和乙醇提取物对以酒精制成急性肝损伤模型应用，测定小鼠血清中ALT，AST 含量，肝脏匀浆中MDA含量，SOD的活性，同时做肝组织切片。结果红景天超微粉物和乙醇提取物明显降低因酒精所致的急性肝损伤小鼠血清中 ALT，AST含量，肝匀浆中MDA含量降低和SOD的活性的升高比模型组有显著性差异（P<0.01）。结论 红景天超微粉对酒精所致急性肝损伤均有保护作用，且红景天超微粉作用优于乙醇提取物。
       【关键词】  红景天超微粉 肝损伤
       Protective Effect of the Ultra Fine Powder of Rhodiola sachalimemsis A.Bor against Acute Liver Injury Induced by Ethanol
       L Huizi,PIAO Guangchun,LI Gao,HUANG Shunfu
       (College of Pharmacology, Yanbian University, Yanji 133000,Jilin,China)
       Abstract：Objective To study the protective effect of the ultra fine powder and the ethanol extract of Rhodiola sachalimemsis A.Bor. against acute liver injury in mice，and compare the protective effect and dose-effect relationship between equal dose of them.MethodsThe mice were perfused with ultra fine powder and ethanol extract of Rhodiola sachalimemsis A.Bor. respectively. The mouse model of acute hapatic injury was induced by ethanol and the serum levels of ALT and AST and the content of  MDA，activity of SOD in liver of the mice were measured, and tissue slice of liver was made.ResultsThe groups of ultra fine powder and ethanol extract of the Rhodiola sachalimemsis A.Bor. significantly reduced the levels of serum ALT and AST which were induced by ethanol, and the content of  MDA, activity of SOD in liver were significant different compared with the model groups (P<0.01).  ConclusionThe  ultra fine powder has a protective effect against hapatic injury, and it was superior to ethanol extract.
       Key words：Ultra fine powder of Rhodiola sachalimemsis A.Bor.    Liver injury
       高山红景天Rhodiola sachalimemsis A.Bor.是景天科红景天属多年生草本植物。红景天全草都可入药，民间常用于清肺止咳、止血、跌打损伤、烧烫伤、阳痿及糖尿病等病症。近几年来的研究表明红景天苷对小鼠实验性肝损伤有很好的保护作用［4］。但用红景天超微粉对小鼠实验性肝损伤的保护研究尚未见报道。本实验用红景天的超微粉对急性肝损伤的保护作用进行了探讨，同时与乙醇提取物进行了比较研究。
       1  器材与方法
       1.1  材料
       高山红景天购于吉林省安图县药材市场，由延边大学药学院生药学教研部刘永镇教授鉴定为高山红景天Rhodiola sachalimemsis A.Bor.。1kg红景天干燥根用70%乙醇回流提取3次，1h/次，合并3次滤液，减压浓缩得乙醇提取物180 g； 红景天干燥根由四平高斯达纳米材料设备有限公司粉碎，得300 nm,500～1000 nm,1～5 μm 3个粒度的超微粉物。
       1.2  试剂与仪器
       55度白酒（北京顺通三星酒业有限公司），  护肝宁片（吉林省通化天立药业有限公司），ALT，AST试剂盒为北化康泰临床试剂有限公司产品，SOD，MDA试剂盒、考马斯亮兰试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。使用的仪器有生化分析仪（SPOTCHEME2，SP4430），DY89-1型电动玻璃匀浆器（中国宁波）等。
       1.3  动物与分组雄性昆明种小鼠100只，体重22～25 g，由延边大学医学部动物科提供。按随机表法分为空白对照组，模型对照组，红景天超微粉300 nm大，小剂量组，0.5～1 μm大、小剂量组， 1～5 μm大、小剂量组，乙醇提取物组，护肝宁片组，每组10只。
       1.4  给药方法药物组连续5 d给药，空白对照组、模型组以等体积的蒸馏水灌胃，早晚各1次。第6天至第8天各组灌胃相应受试物，30min后除空白对照组外，再灌55度白酒0.12g/10g体重，空白对照组给予同体积的蒸馏水。末次给乙醇后禁食6h后颈动脉取血，分离血清测定ALT，AST活性。取出肝脏，制成10%的肝组织生理盐水匀浆液，离心取上清液，测SOD，MDA含量。 取出肝脏，用10%中性福尔马林溶液固定，做石蜡切片，切片厚度为5μm，用苏木精-伊红（HE）染色法，光镜下观察。
       1.5  统计学处理数据采用SPSS11.5 for windows软件处理，数据结果均以±s表示，组间差异性比较采用两样本均数的t检验。
       2  结果
       2.1  乙醇性肝损伤小鼠血清ALT，AST的影响模型组ALT，AST较空白对照组明显升高，具有显著性差异（P<0.01）。红景天乙醇提取物和超微粉3个粒度能明显降低乙醇所致肝损伤小鼠的AST，ALT活性。结果见表1。表1  酒精所致肝损伤小鼠血清ALT，AST的影响（略）
       2.2  乙醇性肝损伤小鼠肝组织SOD，MDA的影响与空白对照组比较模型组肝组织中SOD含量明显降低，MDA活性明显升高，均具有显著性差异（P<0.01）。纳米大剂量组SOD明显高于模型组，MDA明显低于模型组（ P<0.001）统计学上有显著性差异，且纳米、亚微米、微米剂量之间呈良好的量效关系。结果见表2。表2   酒精所致肝损伤小鼠肝组织中SOD，MDA的影响(略)
       2.3   红景天超微粉和乙醇提取物对乙醇所致小鼠肝组织病理变化的影响 见图1。
       光学显微镜下观察，正常肝组织完好，肝小叶清晰，肝细胞完整，细胞核正常。肝索排列整齐，呈放射状。模型组肝小叶不清，肝索排列紊乱，肝细胞出现散在和片状气球样变，胞浆内出现弥漫脂肪变性。纳米大剂量组肝细胞明显恢复正常；肝小叶清晰，肝索排列整齐，脂肪变性明显减轻，胞核结构清晰，可见明显的肝细胞再生。亚微米大剂量组、亚微米小剂量组、乙醇提取物组部分肝细胞有少量的脂肪变性和颗粒变性，亚微米大剂量组和乙醇提取物组可见肝细胞再生。结果表明，纳米大剂量组、微米大剂量组、亚微米小剂量组和乙醇提取物组对乙醇性肝损伤的病理改变有明显的保护作用，其中纳米大剂量组有显著性效果。
       3  结论与讨论
       对小鼠血清AST，ALT升高具有明显的降低作用， 并呈一定量效关系， 其结果均优于护肝宁片组，纳米大剂量组作用最为明显。
       对肝组织中MDA含量升高有一定的抑制作用，肝组织中的SOD活性的降低有明显对抗作用。
       对肝脏病理损伤程度明显减轻，可使脂变肝细胞数量明显减少，脂变面积减小，脂变程度明显减轻。
       
       对小鼠的肝脏再生系数有明显增加作用，因其产生促进肝细胞生长的因子，参与肝细胞的再生，从而对肝脏进行修复。
       
       本实验表明红景天提取物及超微粉3个粒度对乙醇肝损伤均有一定程度的保护作用，且红景天超微粉物的肝保护作用优于乙醇提取物组。本实验的红景天超微粉物的保肝作用与其粒度和剂量有关。 红景天超微粉物的最佳粒度、最佳剂量以及其作用机制有待进一步研究。