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       【摘要】 
       目的测定苦参水煎液中微量元素铜的含量。方法采用分光光度法测定，并与火焰原子吸收光谱法进行对比。结果两种方法的测定结果吻合，平均回收率分别为95.2％和101.6％，相对标准偏差分别为1.82%和1.18%。结论分光光度法测定结果可靠，操作方法简便，适用范围广，可用于实际样品的测定。
       【关键词】  苦参 铜 分光光度法
       Determination of Copper in the Water Decocted Solution of Kushen
       ZENG Liang
       (Wuhan Bioengineering Institute, Wuhan 430415，China)
       Abstract：ObjectiveTo determine the content of trace elements of copper in the water decocted solution of Kushen．MethodsThe determination was performed by spectrophotometry, and compared with flame atomic absorption spectrometry．ResultsThe average recovery rate with standard addition mode of these two methods were 95.2％ and 101.6，and the relative-standard deviations for the determination were 1.82% and 1.18%．ConclusionThe method of spectrophotometry is simple and reliable.It can be used for the determination of practical samples．
       Key words：Kushen；  Copper；  Spectrophotometry
       
       中药苦参是豆科槐属植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根，具有清热燥湿、杀虫利尿的功效。随着微量元素在医药学中的出现，元素医学的引入，“中药与微量元素”已形成一门边缘学科，是当前生命科学研究领域的课题之一［1］。中药中微量元素的研究，对进一步揭示中药的作用机理，有一定的指导意义。中药中微量元素的含量测定方法主要有原子吸收光谱法、等离子体发射光谱法、荧光分光光度法、微分电位溶出法、离子选择电极法、能量色散X射线分析法、催化示波极谱法等。本实验以二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）为显色剂，在氨性溶液中，与铜离子生成有色配合物，在450 nm波长处测定吸光度，建立了分光光度法测定苦参水煎液中微量元素铜含量的方法。
       1  仪器与试药
       1.1  仪器TU-1810紫外可见分光光度计，TAS-986原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；SK2200H超声波清洗机（上海科导超声仪器有限公司）。
       1.2  试药铜标准贮备液1 000 μg/ml（北京国家环境保护总局标准样品研究所）；二乙基二硫代氨基甲酸钠，酒石酸钾钠，氨水，淀粉，硝酸，过氧化氢均为分析纯；水为二次蒸馏水；苦参药材购自湖北金贵中药饮片有限公司。
       2  方法
       2.1  样品处理先将苦参饮片用自来水冲洗后，用蒸馏水反复洗净，再用二次蒸馏水洗涤。放入烘箱内于60 ℃下烘干后，粉碎成粗粉。准确称取20 g置250 ml烧杯中，在超声波清洗机上超声提取1 h，然后将其置于电炉上加热至沸，保持微沸1 h后，冷却，过滤，将滤液定容至100 ml，精密吸取25 ml于100 ml烧杯中，用硝酸-过氧化氢体系消化至溶液无色透明，调节溶液pH值为5～6之间，定容至50 ml待测。
       2.2  绘制标准曲线
       2.2.1  将铜标准贮备液稀释至一系列溶液，分别置于50 ml容量瓶中，依次加入氨水1.5 ml，50%酒石酸钾钠0.5 ml，0.25%淀粉溶液0.5 ml，0.1%DDTC3.5 ml，加水至刻度，摇匀，静置10 min后，以1号瓶为空白，在450 nm波长处测定吸光度，以各测得响应值对浓度回归，得回归方程为A= 0.1702C-0.0042，相关系数r=0.9948。
       2.2.2  将铜标准贮备液稀释一系列溶液，在测定波长324.7 nm，灯电流3.0 mA,燃气流量2.0 L·min-1，负高压291.0 V，通带宽度0.4 nm，燃烧器高度6 mm的工作条件下分别测定其吸光度，以各测得响应值对浓度回归，得回归方程为A= 0.1541C-0.006 5，相关系数r=0.999 8。
       3  结果
       3.1  分光光度法测定条件的选择
       3.1.1  测定波长的选择按实验方法，在350～550 nm之间进行光谱扫描，发现在450 nm 处最大吸收，故选取450 nm为测定波长。
       3.1.2  氨水用量的选择实验结果表明，氨水加入量在1.0～3.0 ml时，吸光度基本不变，但随着氨水加入量继续增大，吸光度会下降，故选取氨水的加入量为1.5 ml。
       3.1.3  淀粉用量的选择实验结果表明，不加淀粉时，显色体系不稳定，吸光度很快会下降。加入淀粉时，显色体系稳定性显著提高，而且吸光度升高。当加入0.25%淀粉溶液0.5 ml时，吸光度在12 h内基本不变，故选取淀粉的加入量为0.5 ml。
       3.1.4  络合剂二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）用量的选择随着DDTC的加入量的增大，吸光度也相应增大，在含有20μg铜（Ⅱ）离子的溶液中，当加入3.0～4.0 ml 0.1%DDTC时，吸光度达到最大且恒定，故选取DDTC的加入量为3.5 ml。
       3.1.5  共存金属离子的影响及消除按实验方法，研究了苦参水煎液中共存金属离子对铜测定的干扰情况。实验结果表明，钾、钠、钙、镁、钡等离子对测定无影响，铁、铝、锰离子的干扰可用酒石酸钾钠掩蔽，在0.5 ml 50%酒石酸钾钠存在下，当测定20 μg铜（Ⅱ）相对标准偏差不超过±5%时，500倍量铝、锰，200倍量铁均不干扰测定。
       3.2  试样分析待测样品分别用分光光度法和原子吸收光谱法进行测定，并将各个样品用标准加入法进行回收实验，平等测定5次，计算铜的质量分数、平均回收率和相对标准偏差（RSD）。结果见表1。表1  测定结果（略）
       4  讨论
       据报道，铜能帮助合成胶原蛋白，具有抵御炎症(主要是关节炎)，防止机体发生肿瘤等作用［2］，这与苦参的抗炎，抗肿瘤作用相符［3］。本文采用分光光度法对苦参水煎液中铜的含量进行了测定，并与原子吸收光谱法进行了对比，两种方法测定结果接近，平均回收率和相对标准偏差都较为理想。原子吸收光谱法仪器复杂，价格昂贵，而分光光度法仪器简单，投资少，有利于普遍推广。本文为苦参水煎液中微量元素铜的含量测定提供了一个操作简便、结果准确、适用范围广的新方法，对探讨苦参的药理功效及临床用药也具有一定的指导意义。
       【参考文献】
         　　［1］王富丽，罗跃娥，刘 斌．浅析中药与微量元素［J］.时珍国医国药，2004，15（7）：449.
       
       ［2］吴茂江，涂长信．铜与人体健康［J］.微量元素与健康研究，2005，22（5）：64.
       
       ［3］刘伟，唐金花 ，王亚娣．苦参的研究进展［J］.时珍国医国药，2006，17（5）：829.