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       【摘要】 
       目的探讨炙甘草汤对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤后左心功能及抗氧化酶的影响。方法大鼠随机分为两组，生理盐水对照组和炙甘草汤处理组，分别用生理盐水和炙甘草汤灌胃4 d后，造成缺血-再灌注模型,观察再灌注10，20 min后左心室内压力峰值(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)和左心室内压最大变化速率(±dp/dtmax)；血中超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性、活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）含量的变化。结果再灌注10 min 时，炙甘草汤处理组与生理盐水对照组比较，LVSP及±dp/dtmax明显升高(P<0 01，P<0 05), LVEDP明显降低(P<0 01)；再灌注20min后, 炙甘草汤处理组与生理盐水对照组比较, LVSP明显升高(P<0. 01)、±dp/dtmax变化不显著, LVEDP降低(P<0 05)；炙甘草汤能明显提高再灌注10 min时血中SOD活性(P<0.01)，降低MDA和ROS的含量(P<0.01)。结论炙甘草汤能明显提高缺血-再灌注损伤后的左心功能，可提高血中SOD活性，降低MDA和ROS的含量。
       【关键词】  炙甘草汤 心功能 缺血 再灌注损伤 抗氧化
       The Effects of Zhi Gan Cao Decoction on the Left Cardiac Function and Antioxidative Enzymes in Ischemia-Reperfusion Injured Rats
       YUAN Jie
       (Affiliated Hospital,Medical School of Hubei Institute for Nationalities,Hubei Enshi 445000，China)
       Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Zhi Gan Cao Decoction on left cardiac function and antioxidative enzymes in ischemia-reperfusion injured rats.MethodsRats were divided into two groups:control group and treating group,After the rats were adminstrated with 0.9%NaCl or Zhi Gan Cao Decoction for 4 days,the myocardial ischemia-reperfusion injury model was established. Left ventricular systolic pressure(LVPS), left ventricular end-diastolic pressure(LVEDP) and ±dp/dtmax after reperfusion 10min,20min were measured; the activities of SOD and CAT,the levels of ROS and MDA after reperfusion 10min.ResultsZhi Gan Cao Decoction could obviously increase LVSP,±dp/dtmax after reperfusion 10min(P<0.01,P<0.05), decrease LVEDP (P<0.01) after reperfusion 10min; increase LVSP after reperfusion 20min(Ｐ<0.01), decrease LVEDP (P<0.05) after reperfusion 20min,but had ±dp/dtmax; Zhi Gan Cao Decoction could obviously increase the activity of SOD,decrease the levels of ROS and MDA(P<0.01).ConclusionZhi Gan Cao Decoction can obviously improve the left cardiac function in ischemia-reperfusion injured rats, increase the activity of SOD and decrease the levels of ROS and MDA.
       Key words：Zhi Gan Cao Decoction;   Left cardiac function;   Ischemia-reperfusion injury;   Antioxidative
       在心血管疾病的治疗过程中,有许多治疗措施都不可避免地造成缺血再灌注损伤,如冠脉搭桥、溶栓治疗等,由氧自由基引发的膜脂质过氧化反应可导致或加重心肌组织的损伤，因此缺血再灌注时的心肌保护越来越成为心血管领域的研究热点。炙甘草汤(Zhi Gan Cao Decoction)在《伤寒论》中就用于许多疾病的治疗，具有滋阴补血、益气复脉之功效，常常用来主治“心动悸，脉结代”［1］，至今仍沿用，治疗许多类型的心律失常。实验证明，本方对氯仿致小鼠室颤、乌头碱致大鼠心律失常均有明显抑制作用［2］。本实验在大鼠在体心肌缺血再灌注模型上，观察炙甘草汤对大鼠缺血再灌注后左心功能及抗氧化酶的影响。
       1  材料与方法
       1.1  动物及分组
       取健康SD大鼠20只，由同济医科大学实验动物中心提供，♀♂各半，体重（203±18.4）g，按文献随机分为2组（n=10）：①生理盐水对照组, 常规喂养，并用生理盐水罐胃4 d（11.4 ml·kg-1），1次/d；②炙甘草汤处理组，常规喂养，并用炙甘草汤罐胃4 d（11.4 ml﹒kg-1），1次/d。
       1.2  仪器与药品
       756MC型紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；BL-410系统（成都泰盟电子产品）；活性氧（ROS）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品；DH-1型呼吸机；炙甘草汤，按《伤寒论》原方组成，制成1 g生药/ml的水煎液。
       1.3  方法
       两组用药4 d后，动物以20%氨基甲酸乙酯溶液对大鼠行腹腔注射麻醉(1.0 g·kg-1)，仰卧位固定于鼠台，颈部正中切口，分离气管，作气管插管，接动物呼吸机，呼吸机频率为40 次/min，潮气量为25 ml。分离右侧颈外静脉并插管（便于随时取血测ROS，CAT，SOD和MDA）。于第3，4肋间隙胸骨外缘开口，打开胸腔，剪开胸包膜，于左冠状动脉前降支下方穿线备用。分离左侧颈总动脉，行左心室插管，用BL-410系统描记左心室功能参数：左心室内压力峰值(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)和左心室内压最大变化速率(±dp/dtmax)；结扎冠状动脉10 min，造成心肌缺血，然后将结扎线松开，观察20 min。分别于再灌注10 min和再灌注20 min记录左心室功能参数的变化，并取血测ROS，CAT，SOD和MDA。
       1.4  数据处理再灌注10 min，再灌注20 min时左心室功能参数的变化；SOD与CAT活性、ROS与MDA含量的变化数据以±s表示，以SPSS FOR WINDOWS 11.5软件进行t检验统计学处理。
       2  结果
       2.1  再灌注10 min时左心室功能参数的变化再灌注10 min时炙甘草汤处理组与生理盐水对照组比较, LVSP及±dp/dtmax明显升高(P<0.01，P<0.05), LVEDP明显降低(P<0.01),见表1。表1  再灌注10min时 LVSP, ±dp/dtmax和 LVEDP 的变化（略）
       2.2  再灌注20 min时左心室功能参数的变化再灌注20 min后, 炙甘草汤处理组与生理盐水对照组比较, LVSP明显升高(P<0.01)，±dp/dtmax变化不显著, LVEDP降低(P<0.05),见表2。表2  再灌注20 min时 LVSP，±dp/dt max 和 LVEDP 的变化（略）
       2.3   再灌注10 min时血中SOD与CAT活性、MDA和ROS含量的变化炙甘草汤能明显提高再灌注10min时血中SOD活性(P<0.01)，降低MDA和ROS的含量(P<0.01)，但不能明显提高CAT活性，见表3。表3  再灌注10 min时血中SOD与CAT活性，MDA和ROS含量的变化（略）
       3  讨论
       心肌缺血再灌注损伤是临床上常见的病理生理过程,常为心脏病患者猝死的主要原因之一，其发病机制与钙超载、自由基以及能量代谢障碍有关，心肌缺血-再灌注损伤过程中产生大量的氧自由基，破坏细胞膜上不饱和脂肪酸，形成脂质过氧化物MDA等，导致膜结构和功能破坏，引起严重的心律失常。脂质过氧化作用及能量代谢异常是导致心肌缺血再灌注损伤的两个重要因素，且两者相互影响。细胞内自由基增多是心肌缺血等诸多病理条件下细胞损伤的共同机制之一［3～5］。
       
       炙甘草汤又名复脉汤，有益气养血、滋阴振阳复脉的作用。《温病条辨》说：“温病误用升散，脉结代，甚则两至者，重与复脉，虽有他证后治之”“下焦温病，热深厥甚，脉细促，心中憺憺大动，甚则心中痛者，三甲复脉汤主之。”脉结代、心动悸有三种情况：一是心动悸脉结，二是心动悸脉代，三是心动悸脉既结又代。炙甘草汤加减能治疗脉结、代、促 与既结又代等多种脉象。
       
       本实验结果表明炙甘草汤可以提高SOD活性，降低ROS和MDA的含量，提示炙甘草汤可以增强心肌的抗氧化能力，从而减少膜的脂质过氧化损伤，最终达到保护心肌的作用，同时, 炙甘草汤明显提高再灌注10 min时LVSP和±dp/dtmax，降低LVEDP;明显提高再灌注20 min时LVSP, 降低LVEDP，说明炙甘草汤具有保护缺血-再灌注损伤心肌的作用，这种作用可能与炙甘草汤能提高抗氧化酶活性、清除过多氧自由基有关，从而保护了心肌细胞结构和功能的完整，有效地保护了心肌的收缩和舒张功能。炙甘草汤提高LVSP和±dp/dtmax、降低LVEDP的具体机制还不十分清楚，有待进一步研究。本实验提示, 炙甘草汤能清除体内活性氧，减少膜脂质过氧化，增强左心室的功能，从而保护心肌缺血-再灌注损伤。
       【参考文献】
         　　［1］冯大千.炙甘草汤治疗心律失常的临床观察［J］.湖北中医杂志, 2003, 25(12)：29.
       
       ［2］李兴高，陈 奇，黄梦雨，等．炙甘草汤拆方抗心律失常作用的实验研究［J］.江西中医学院学报，2002，14(3)：7.
       
       ［3］王怡，王少峡，任 明，等. 首乌丹参方预处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用研究［J］.天津中医药,2006,23(5):413.
       
       ［4］ZHOU Pei hua，LV Juan xiu，ZHU Da nian. Effects of acupuncture at acupoint neiguan(PC6) and intravenous Injection of Larginine on the Improvement of Acute Myocardia ischemia［J］.Joural of Acupuncture and Tuina Science,2006,4(3):136.
       
       ［5］Smetana R,Wink K．Magnesium.acute myocardial infarction and reperfusion injury［J］.Clin Calcium，2005，15(2)：261.