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       【关键词】  甘肃金银花
       摘要：目的：考察甘肃金银花的品质。方法：采用高效液相色谱法，测定绿原酸含量；以试管稀释法，考察其体外抑菌作用。结果：通过实验比较，甘肃金银花与流通的正品金银花中的绿原酸含量基本一致，其叶中绿原酸的含量也较高；甘肃金银花有显著的的体外抑菌作用。结论：甘肃金银花绿原酸含量较高，抑菌作用强，有良好开发前景。
       关键词：甘肃金银花；  绿原酸；  体外抑菌
       Research on the Content of Chlorogenic Acid and Antimicrobial Effect of Flos Lonicerae harmsis
       GUO Zhaohui, ZHOU Xueqing, JIANG Shengxiang
       (1.Lanzhou Institute of Chemical Physics，the Chinese Academy of Sciences and Gansu Key Laboratory of Natural Medicines，Lanzhou，Gansu 730000, China; 2.Gansu Provincial Institute for Drug Control，Lanzhou，Gansu 730000, China)
       Abstract:Objective:To investigate on the quality of Flos Lonicerae harmsis.Methods:To determine the content of chlorogenic acid by HPLC and observere the antimicrobial effect of Flos Lonicerae harmsis by the method of tube-dilute.Results:The contents of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis and Flos Lonicerae are similar; Flos Lonicerae harmsis has remarkable antimicrobial effect and is stranger than the Flos Lonicerae"s.Conclusion:The content of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis is higher and it has remarkable antimicrobial effect.It has a good prospect for making use of  local resources.
       Key words:Flos Lonicerae harmsis；  Chlorogenic acid；  In-vitro antimicrobial effect
   
　　金银花原名忍冬，为常用中药。具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。应用历史悠久。金银花植物来源复杂，商品药材品种多，《中国药典》2000年版Ⅰ部收载中药材金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera.japonica Thunb.、红腺忍冬L.hypoglauca Miq、山银花L.confusa DC或毛花柱忍冬L. dasystyla Rehd  4种为法定药用金银花正品，而实际使用远不止于此。甘肃金银花，又称盘叶忍冬，为忍冬科植物叶藏花L. harmsii Gracbnl的干燥花蕾，主要分布在甘肃、四川，收载于《甘肃省中药质量标准（试行）》（1991），是甘肃地方习用品，并且为国家考察品种。但有关甘肃金银花的研究，近年来未见相关报道。本文参考相关文献，采用高效液相色谱法测定了绿原酸的含量并结合体外抑菌实验，对甘肃金银花与正品金银花进行了比较考察，以期对甘肃金银花开发利用提供科学依据。
       1  实验仪器和材料
       1.1  药材甘肃金银花，采自甘肃榆中；正品金银花（为忍冬科植物忍冬 L. japonica Thunb. 的干燥花蕾），安徽亳州，国家抽样品种，经我所中药室鉴定，均为当年鲜品。
       1.2  仪器Waers515泵，2478检测器，7725进样阀，Empower色谱工作站。Hypersile ODS2C18色谱柱（4.6 mm×150 mm），大连依利特公司出品。
       1.3  菌种大肠杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌均购自中国药品生物制品检定所；乙型链球菌由甘肃省人民医院临床检验中心提供。
       2  实验方法和结果
       2.1  绿原酸的测定按《中国药典》金银花项下方法［1］测定，以外标法计算含量，绿原酸峰理论塔板数不低于6 000。结果见表1。表1  样品绿原酸含量（略）
       《中国药典》以绿原酸的含量作为质量评价指标，结果表明甘肃金银花与流通的正品金银花中的绿原酸含量基本一致，且其叶中绿原酸的含量也较高。因此，甘肃金银花是符合药用要求的。
       2.2  体外抑菌作用
       2.2.1  药液的制备取试验药材10 g，加水200 ml，文火煎煮2次，30 min/次，过滤，合并滤液，水浴上浓缩，制成1 g/ml的药液，流通蒸汽灭菌30 min，备用。
       2.2.2  菌液的制备取新鲜培养的菌苔一接种环，接种于营养肉汤中（乙链培养液中需加入0.5 ml白蛋白），35℃培养18 h后，制成105的菌液，备用。
       2.2.3  抑菌实验按试管倍比稀释法［2］倍比稀释成系列浓度，每个小试管中加入1.0 ml药液，然后加入菌液0.1 ml(乙链培养液中需加入0.1 ml白蛋白)，35℃培养24 h，观察记录。重复实验两次，结果见表2。表2  样品抑菌实验结果（略）
       结果表明，甘肃金银花有显著的的体外抑菌作用，对革兰氏阳性菌的作用强于革兰氏阴性菌，对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌的最低抑菌浓度为0.062 5 g/ml；对大肠杆菌、伤寒杆菌的最低抑菌浓度分别为0.5 g/ml和0.25 g/ml。且均强于对照药材。
       　　3  讨论
       3.1  金银花中主要含挥发油，黄酮类、三萜类及有机酸等化学成分。一般认为，金银花的抗菌有效成分为绿原酸类化合物，绿原酸虽具有广谱的抗细菌、抗病毒作用，但其并非是金银花中唯一的抑菌成分，且因绿原酸于体内能被蛋白质灭活，其抗菌作用并不甚强［3］。实验结果表明，甘肃金银花和正品金银花的绿原酸的含量基本一致，而抑菌作用差别明显。因此，本实验从一方面证明了绿原酸并非是金银花中唯一的抑菌成分，提示其抑菌作用还有其他成分的参与，其抗菌作用的真正情况、有效成分和作用机理还有待进一步地深入研究。同时也说明仅以一种成分作为质量评价指标，不能完全衡量金银花的质量。
       3.2  《中国药典》2000年版Ⅰ部收载中药材金银花为忍冬科植物忍冬L. japonica Thunb.、红腺忍冬L. hypoglauca Miq、山银花 L. confusa DC或毛花柱忍冬 L. dasystyla Rehd  4种为法定药用金银花正品，并以绿原酸的含量作为质量评价衡量指标，而盘叶忍冬为国内可供药用47种忍冬属植物之一［3］。本实验，甘肃金银花花蕾和叶片中绿原酸的含量较高，与正品金银花的含量相当，完全符合药典对金银花的要求（《中国药典》规定绿原酸含量不低于1.5％）， 且抑菌作用明显强于对照样品，因此，对甘肃金银花进行全面研究，综合评价，对充分利用开发金银花资源有重要意义。
       　　参考文献：
       ［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［M］.北京：化学工业出版社，2000：177177.
       ［2］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海:上海科学技术出版社,1991：286293.
       ［3］石钺,石任兵,陆蕴如.我国药用金银花资源、化学成分及药理研究进展［J］.中国药学杂志,1999,34(11):724727.
       作者简介：郭朝晖(1968)，男(汉族)，天津人，现任中国科学院兰州化学物理研究所副主任医师，学士学位，主要从事药品检验工作.
       (1.中国科学院兰州化学物理研究所，甘肃省天然药物重点实验室，甘肃 兰州  730000；
2.甘肃省药品检验所，甘肃 兰州  730000)
       收稿日期：20050203