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阿娜尔阴道泡腾片的药效学研究
作者:徐磊,孙玉华,李涛,张云珍,李建娥, 顾政一    
作者单位:1.新疆维吾尔自治区药物研究所,新疆 乌鲁木齐 830004;2.新疆农业大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830000

《时珍国医国药》 2008年 第4期

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       【摘要】 
       目的观察阿娜尔阴道泡腾片的抗炎、止痒、抑菌作用。方法建立急性炎症、慢性炎症动物模型,家兔阴道炎模型观察阿娜尔阴道泡腾片的抗炎、止痒、抑菌作用。结果阿娜尔阴道泡腾片(10%,20%)能够抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,抑制大鼠棉球肉芽肿的形成,抑制由角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀,提高豚鼠的致痒阈,和对照组比较有显著性差异,阿娜尔阴道泡腾片能消除家兔阴道炎模型阴道充血、水肿、糜烂、分泌物增多的病变,抑制霉菌生长,明显减轻阴道局部组织病理学改变。结论阿娜尔阴道泡腾片具有较好的抗炎、止痒、抑菌等作用。
       【关键词】  阿娜尔阴道泡腾片 抗炎 止痒 抑菌
       阿娜尔阴道泡腾片由石榴皮、苦豆子等组成。为了探讨其药效作用,笔者进行了实验动物的抗炎,止痒,抑菌作用的研究,以期为阿娜尔阴道泡腾片用于临床治疗阴痒、阴道炎、宫颈炎提供实验依据。
       1  材料
       1.1  药品与试剂 
       阿娜尔阴道泡腾片,0.75 g/片,含生药1.49 g/片,批号041010,由新疆西部加斯特斯药业公司提供。洁尔阴泡腾片,成都恩威制药有限公司产品,批准文号:国药准字210930008,批号040601。二甲苯,西安化学试剂厂,批号030701。角叉菜胶,美国Sigma公司产品。磷酸组织胺,卫生部药品生物制品检定所提供,批号030309。白色念珠标准菌株(ATCC10231),由新疆医科大学提供。
       1.2  动物  
       昆明种小鼠,Wistar大鼠,豚鼠,雌性新西兰家兔,体重2.0~2.5 kg。均购自新疆医科大学动物实验中心。
       2  方法与结果
       2.1  小鼠耳廓二甲苯致炎实验[1~3]取昆明种小鼠50只,雌雄各半,体重(20.0±1.4)g,按动物体重、性别随机均分为NS对照组、阳性对照药洁尔阴泡腾片组(10%溶液)、阿娜尔妇洁阴道泡腾片低、中、高3个剂量组(5%,10% ,20%溶液)每组10只。各给药组大鼠涂药1次/d(0.05 ml/20 g),涂于右耳,连涂5 d,空白对照组涂以等量的蒸馏水。末次涂药30 min后, 各给药组以蒸馏水洗去药液,用棉球擦净,给小鼠右耳涂以二甲苯0.03 ml/20 g,左耳为对照。30 min后,将小鼠断颈处死,用直径8 mm的打孔器,将双耳相同部位各打下一片,用电子天平分别称重,以左、右耳片重量之差作为肿胀度,计算各组肿胀程度,求出肿胀率。结果见表1。表1  阿娜尔阴道泡腾片对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(略)
       2.2   对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响取大鼠50只,体重(149.5±19.9)g,雌雄兼用,按体重、性别随机均分为生理盐水组、阳性对照药洁尔阴泡腾片组(10%溶液)和3个不同剂量的阿娜尔阴道泡腾片组(5%,10%,20%),每组10只。各给药组大鼠右后足涂抹给药,0.1 ml/100 g,1次/d,连续5 d。末次给药30 min后,测量右后足跖厚度,然后每鼠右后足跖注射1%角叉菜胶溶液50 μl,注射后每隔1 h以千分卡尺测量1,2,3,5,7 h各组大鼠右后足跖厚度,依其差值表示肿胀度。结果见表2。表2  阿娜尔阴道泡腾片对大鼠角叉菜胶足跖肿胀的影响(略))
       2.3  对大鼠棉球肉芽肿的影响取Wistar大鼠50只,体重(154.0±12.0)g,雌雄各半,按体重、性别随机均分为生理盐水组、阳性对照药洁尔阴泡腾片、3个不同剂量的阿娜尔阴道泡腾片组,给药剂量与实验“2.2”相同。取棉球(20±1)mg/个,高压消毒,每棉球注入氨苄青霉素0.1 ml,60℃烘干。在乙醚浅麻状态下,各组大鼠左右前肢腋下皮肤无菌切小口1 cm,塞入一个棉球缝合。当天开始直肠给药0.1 ml/100 g,1次/d,连续7 d。末次给药后2 h打开原切口,将棉球及周围结缔组织一齐取出,剔除脂肪,80℃干燥,称重,减去原棉球重即得肉芽肿重,计算药物对肉芽肿的抑制率。结果见表3。表3  阿娜尔阴道泡腾片对棉球肉芽肿的影响(略)
       2.4  止痒作用实验[4]
       取豚鼠60只,体重(351.1±13.5)g,雌雄各半,将豚鼠随机分为6组,每组10只,给药剂量与实验“2.2”相同。实验前一日,各组豚鼠右足后背剔毛,涂药0.1 ml/100 g,实验当日用粗纱布擦伤右后足背剃毛处面积1 cm2,再涂药1次,对照组给予等量蒸馏水。涂药后10 min,开始在创面滴0.01%磷酸组织胺0.05 ml/只,此后每隔3 min依0.01%,0.02%,0.03%,0.04%……递增浓度,每次均为0.05 ml/只,直至出现豚鼠回头舔右后足,以出现豚鼠回头舔右后足时给予的磷酸组织胺总量为致痒阈,记录并比较各组的致痒阈。结果见表4。表4  阿娜尔阴道泡腾片对磷酸组织胺致痒反应的影响(略)
       2.5  抑菌实验[5]
       2.5.1  菌种
       取白色念珠标准菌株(ATCC10231),接种改良沙氏琼脂培养基孵育。临用时,用0.9%生理盐水将菌苔洗净,调整浓度为3×108/ml备用。
       2.5.2  造模
       取雌性新西兰家兔先用接种针,再用接种环分别在阴道口内2~4 cm处用“连续划线法”接种白色念珠菌(浓度为3×108/ml),连续3 d。于接种后第6天,取阴道分泌物涂片,染色镜检,镜检下可见白色念珠菌感染者为阳性。
       2.5.3  给药
       取造模成功动物40只,随机分为5组:模型组,阳性对照药组,阿娜尔阴道泡腾片小、中、大剂量组,另取8只为正常对照组。各组动物均阴道给药,给药时,家兔均倒置,扩张阴道,将药物置入阴道内,保证药物与粘膜充分接触至少4 h。阳性对照药组家兔阴道内置入洁尔阴泡腾片药粉10 mg/kg;低剂量阿娜尔阴道泡腾片组家兔阴道置入药粉10 mg/kg(相当于20 mg生药/kg);中剂量阿娜尔阴道泡腾片组家兔阴道置入药粉20 mg/kg(相当于40 mg生药/kg);高剂量阿娜尔阴道泡腾片组家兔阴道置入药粉40 mg/kg(相当于80 mg生药/kg);模型组家兔和正常对照组给予温生理盐水冲洗,1次/d,连续14 d。
       2.5.4  观察指标对动物进行一般性观察,观察记录阴道局部病变。药后第3,7,15天取阴道分泌物镜检。末次给药后24 h处死动物,取阴道组织做组织病理学检查。
       2.5.5  一般状态观察实验家兔的毛色正常,四肢健壮,进食正常,体重有所增加,各组给药动物在给药期间无一只死亡。
       2.5.6  阴道局部组织病变肉眼观察实验家兔接种白色念珠菌后,阴道充血、水肿,分泌增多,甚者阴道糜烂。给药后各给药组与模型组相比家兔阴道局部充血、水肿糜烂等病变逐渐好转,分泌物逐渐减少。阴道涂片检查:药后第3天和第7天各给药组均检出白色念珠菌,药后14 d各给药组均未检出白色念珠菌,模型组家兔各时段均检出白色念珠菌。对阴道炎模型阴道病变的影响见表5~6。表5  阿娜尔阴道泡腾片对家兔阴道局部的影响(略)表6  阿娜尔阴道泡腾片家兔阴道涂片检查(略)
       3  小结
       实验结果表明,阿娜尔阴道泡腾片(10%,20%)能够抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,抑制大鼠棉球肉芽肿的形成,能够抑制由角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀,能够提高豚鼠的致痒阈,和对照组比较有显著性差异,阿娜尔阴道泡腾片能消除家兔阴道炎模型阴道充血、水肿、糜烂、分泌物增多的病变,抑制霉菌生长,明显减轻阴道局部组织病理学改变,提示阿娜尔阴道泡腾片具有较好的抗炎、止痒作用。通过以上急性炎症、慢性炎症、止痒实验表明,阿娜尔阴道泡腾片具有较好的抗炎、止痒、抑菌作用。以上实验为阿娜尔阴道泡腾片用于临床治疗阴痒、阴道炎、宫颈炎的有效性提供充分的实验依据和保障。
       【参考文献】
           [1]徐叔云. 药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:717,719.
       
       [2]陈奇 . 中药药理研究方法学,第2版[M].北京:人民卫生出版社,1994:336,695.
       
       [3]唐瑛,杨 李,王晓昆,等.玉洁栓的药理作用研究[J].中药材,2004,27(8):605.
       
       [4]郭胜典 . 妇炎康洗剂的抗炎、止痒实验研究[J].中国实验方剂学杂志,1998,4(4):33.

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