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       【摘要】 
       目的考察丹红注射液与10%氯化钾在0.9%氯化钠注射液中配伍的稳定性。方法采用高效液相色谱法（HPLC）梯度洗脱测定配伍液中6 h内丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的含量。并在25℃时24 h测定配伍液的pH值。结果丹红注射液与10%氯化钾配伍后24 h内pH值无显著变化，丹红注射液中有效成分丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的含量6 h内基本稳定。结论配伍液中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的质量和pH值基本稳定。
       【关键词】  高效液相色谱法 丹红注射液 氯化钾 配伍 稳定性
       Study on the Compatible Stability of Danhong Injection with 10% Potassium Chloride Injection by HPLC
       DU Xiufang， LIU Weina，WU Haiyan,ZHANG Meilan，LIU Min，LI Ying
       1.School of Pharmacology, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017，China；
       2.The Second Policlinic of Hebei Department， Shijiazhuang，050051，China
       Abstract：ObjectiveTo study the compatible stability of Danhong Injection mixed with 10% potassium chloride in 0.9% sodium chloride injection. MethodsA gradient HPLC system was used in the quantitative analysis of the Danshensu ，protocatechuic  aldehyde and salvianolic acid B in 6 hours,and its pH was determined at 25℃for 24 hours.  ResultspH value and the contents of Danshensu，protocatechuic aldehyde and salvianolic acid B had no significant change in compatible solution. ConclusionpH and the quality of danshensu，protocatechuic aldehyde and salvianolic acid B is stable.
       Key words:HPLC；  Danhong injection；  Potassium chloride；  Compatibility；  Stability
       
       丹红注射液为丹参、红花水溶液提取精制而成的红棕色澄明液体。现代药理研究表明，其有效成分丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B等具有抑制血小板聚集、抗血栓形成、抗氧化及保护心脏微血管内皮细胞等作用［1］。临床主要用于治疗心脑血管疾病。丹红注射液能否与其它药物配伍应用尚未见相关文献报道。我们模拟临床用药浓度，考察丹红注射液与10%氯化钾在0.9%氯化钠注射液中配伍的pH、外观以及丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B含量的变化，为临床用药提供参考。
       1  仪器与试剂
           
       1200型高效液相色谱仪（美国Agilent公司），包括G1311A四元梯度泵、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1316A二极管阵列检测器、G1322A在线脱气机。pHS-25数显pH计（上海精密科学仪器有限公司)；DK-98-1电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。
        
       丹红注射液（济南步长制药有限公司，规格：10ml支，批号070139）；丹参素钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号110855-200405）；原儿茶醛对照品（中国药品生物制品检定所，批号110810-200506）；丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所，批号：11562-200504）；氯化钾注射液（正大天晴药业，规格10 ml:1 g，批号0603292）；0.9%氯化钠注射液（石家庄四药有限公司，规格500 ml:4.5 g，批号070101113）。甲醇（色谱纯，美国TEDIA公司），磷酸为分析纯，水为超纯水（Milli Q）。
       2  方法与结果［2，3］
       2.1  色谱条件色谱柱为Diamonsil C18(5 μm，150 mm×4.6 mm)；流动相A为甲醇；B为0.1%磷酸水溶液；梯度洗脱: 0～15 min, 10%～25%A，90%～75%B;15～30 min，25%～50%A,75%～50%B；30～40 min，50%～10%A,50%～90%B。柱温 30℃；流速1 ml/min，进样量20 μl, 检测波长281 nm。色谱图见图1～2。
       2.2  标准曲线的制备精密称取丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B对照品适量，分别加50%甲醇水溶液溶解定容，配成1 mg/ml的对照品贮备液。分别精密吸取3种对照品贮备液一定量，加超纯水定容作为混合对照品工作液。在上述色谱条件下，分别自动进样5，10，20，40，60 μl。将进样量换算为浓度， 以峰面积（Y）对浓度(X,μg/ml)进行线性回归，得标准曲线回归方程及相关系数:丹参素为Y=9.864 5X-7.551 9,r=0.999 9;原儿茶醛为Y=77.35X+6.187 7,r=1;丹酚酸B为 Y=16.852X+6.187 7,r=0.999 8。分别在17.64～211.68 μg/ml，4.95～59.4 μg/ml，7.73～92.7 μg/ml范围内线性关系良好。
       2.3  精密度和重复性实验取“2.2”项下中间浓度梯度点，配制丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B的混合对照品溶液，连续进样测定7次，以峰面积计算丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的平均相对标准偏差RSD分别为0.64%，1.57%和0.51%。
        
       精密吸取同一批次（070139）的丹红注射液0.8 ml置10 ml容量瓶中，加超纯水至刻度，平行配制6份供试液，连续测定6次，以峰面积计算丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的平均相对标准偏差RSD分别为0.60%，0.14%和0.57%。
       2.4  加样回收率实验精密吸取已知含量的丹红注射液0.4 ml，置10 ml容量瓶中，分别加入一定量的丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B对照品贮备液，加超纯水定容，混匀，平行配制6份，即为加样回收率实验供试液，连续测定6次，以峰面积计算丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的平均回收率分别为100.8%，99.5%和100.5%，RSD分别为1.40%，1.56%，1.41%。
       2.5  配伍稳定性实验
        
       2.5.1  配伍液的制备模拟临床用药浓度，精密吸取丹红注射液4 ml于50 ml容量瓶中，加10%氯化钾注射液2 ml，加0.9%氯化钠注射液至刻度。
       2.5.2  pH值的测定按“2.5.1”项下方法配制的配伍液，在恒温25℃条件下，分别于0，1，2，3，4，6，8，12，24 h测定配伍液的pH值，并观察其外观变化情况。结果配伍液在6 h内均为浅黄棕色澄明液体，颜色无变化，无浑浊、沉淀及气泡产生，pH值无显著变化。结果见表1。表1  （25±1）℃条件下丹红注射液与10%氯化钾在0.9%氯化钠注射液中配伍的pH值变化（略）
         
       2.5.3   含量测定取“2.5.1”项下的配伍液经0.45 μm微孔滤膜过滤后，按“2.1”项下述色谱条件，分别在0，1，2，3，4，5，6 h自动进样20μl，测定其峰面积。所得数据代入回归方程，以0 h的含量为100%，计算各时间段的相对百分含量，结果在6 h内3种有效成分的峰形、含量和保留时间均无明显变化。结果见表2。表2  丹红注射液与10%氯化钾在0.9%氯化钠注射液中配伍3种成分的含量变化（略）
       3  讨论
           
       氯化钾注射液在高效液相色谱图中无吸收峰，对丹红注射液的色谱图无影响。本实验经过反复实验选定的色谱条件，吸收峰数目多，峰形对称，3种定量成分的色谱峰均能有效的分离，保留时间适宜，丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B对照品的保留时间tR(min)分别为8.69，12.97，32.76。丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B 均属于水溶性酚酸类成分，具有弱酸性，在流动相中加入少量磷酸能调节pH值抑制其在溶液中的电离。对照品丹参素钠是钠盐形式，但在流动相为酸性的条件下高效液相色谱法所测得的实际是丹参素的色谱峰和数据，应按1 mg丹参素钠相当于0.9 mg丹参素进行浓度换算。
       【参考文献】
         　　［1］潘英妮，袁 丹，付文卫，等. HPLC法测定丹参类注射液中4种水溶性成分含量［J］.沈阳药科大学学报，2004，21（3）：196.
       
       ［2］韦英杰，李 萍，李松林.高效液相二极管列检法同时测定复方丹参制剂中7个成分的含量［J］.分析化学，2006，34（12）：1702.
       
       ［3］薛国菊，时 涛，钱文璟，等. 注射用丹参与输液配伍的稳定性考察［J］.现代食品与药品杂志,2006,16(3)：18.