不同品种黄芪中的氨基酸和微量元素含量的比较
作者:叶福媛 毛泉明 张蕾 杨秋美
《时珍国医国药》 2005年 第9期
多个检索词,请用空格间隔。
【关键词】 黄芪
摘要:目的:为合理开发利用黄芪的植物资源提供参考。方法:各品种黄芪经适当提取分离后,采用6300氨基酸自动分析仪测定游离氨基酸的含量和采用原子吸收光谱来测定微量元素。结果:游离氨基酸总含量云南栽培黄芪为1.737 3%,梭果黄芪为0.560 8%,金翼黄芪为0.374 1%;不同品种黄芪中含Cu,Fe,Zn,Mg,CO,Al等元素。结论:游离氨基酸含量云南栽培黄芪为最高,金翼黄芪为最低;不同品种黄芪中微量元素含量有差异。
关键词:黄芪;微量元素;游离氨基酸
Comparison on Amino Acids and Trace Elements in Different Kinds of Astragalus membranaceus
YE Fu yuan, MAO Quan ming, ZHANG Lei, YANG Qiu mei
(Shanghai Traditional Chinese Medical University,Shanghai, 201203, China)
Abstract:Objective:To provide reference for rational exploiting and utilizing the plant of Radix Astragali (Huang-qi).Methods:After extracting and separating Radix Asrtagali,free amino acids in these herbs were determined by 6300 High Performance Amino Acid Analyzer were 1.734 3%,0.560 8% and 0.374 1% in proper order in Yun-nan Huang-qi, A ernestii.These trace elements was determined by atomic absorption spectrometry. Results:Contents of the free amino acids Comb.(Suo-guo Huang-qi),and A.Chrysopterus Bge.(Jin-yi Huang-qi).the content of Cu、Fe、Zn、Mg、Co、Al in different kinds of Astragalus membranaceus.Conclusion:The highest contents of free amino acids was in Yun-nan Huang-qi,the lowest was A chrysopterus Bge.There were differences among the contents of these elements in different kinds of Astragalus membranaceus.
Key words:Radix Astragali;Element;Free amino
黄芪是一味主要的补气药,在我国使用的历史悠久,功效显著。它不仅具有补气,固表的功能,现代医学已证明它有降压、利尿、强心、抗菌,提高血糖作用,并能增强机体的免疫功能和抗衰老的作用。目前已广泛应用于临床。如治疗病毒性心肌炎,脑梗塞,慢性肾炎、蛋白尿等疾病[1~3]。20世纪70年代以来,国内外学者对黄芪及同属近缘植物的化学成分,生物化学和药理作用等方面进行了大量的研究[4~8],但对黄芪中的微量元素成分研究却很少[9,10]。黄芪为豆科植物蒙古黄芪和膜荚黄芪干燥根(中国药典[11]规定为正品药)。该属植物全世界有1 600种,在我国有130种以上。不同产地的黄芪所含化学成分差异很大,考察不同品种黄芪的质量,可进一步评估黄芪的药用价值。本课题选用不同产地的黄芪进行游离氨基酸和微量元素含量的测定,为合理开发、利用黄芪的植物资源提供实验依据。
1实验器材
1.1仪器美国贝克曼6300氨基酸自动分析仪,HP3390A积分仪,日立Z-8000原子吸收分光光度计。
1.2试剂缓冲液Na-S;再生液Na-R;标准液:17种氨基酸(美国贝克曼公司全部配套试剂);HClO4(GR),HNO3(GR)。
1.3材料金翼黄芪(购于山西药材公司),梭果黄芪(购于四川塘理县药材公司),云南栽培黄芪系膜荚黄芪的引种(购于昆明市药材公司)。
2实验方法与结果
2.1样品处理
2.1.1用去离子水将药材表面泥沙、杂质洗去,置40~60℃烘箱烘干,然后粉碎并过40孔尼龙筛,将粉碎药物放入加盖烧杯中,再置40~60℃烘箱干直至恒重。
2.1.2称取黄芪粗末25.0 g,加水400 ml,回流1.5 h,提取3次。合并溶液,浓缩至50 ml,浓缩液加2倍量95%乙醇(100 ml)冷藏过夜,过滤,滤液减压浓缩至小体积后,通过强酸性阳离子交换树脂(4.5 cm×60 cm),用水洗至无色,洗液弃去,再用5%的氨水洗脱,收集洗脱液并用茚三酮试剂检查(检查前先挥去NH3),共收得阳性部分约650 ml,减压浓缩后用蒸馏水定容125.0 ml,即得总游离氨基酸样品液。
2.1.3称取黄芪约1 g于20 ml石英坩锅,并加5 ml HNO3过夜,第2天再加5 ml HNO3放置电热板上加热消化,然后加3 ml HClO4继续加热至有浓白烟产生,样品溶液呈浅黄色或白色结晶,说明已消化完全。冷却后用去离子水溶解,并转移至25 ml容量瓶中定量待测。
2.2游离氨基酸的测定
2.2.1条件缓冲液流速20 ml/h;反应液流速10 ml/h;分离柱Na型、5 u、20 cm;紫外检测波长λ1=570 nm,λ2=440nm;柱温50℃-65℃-77℃程序升温,反应槽温度138℃,进样量50μl。
2.2.2测定精密吸取上述供试液1.0 ml,在60℃水浴上挥发水分,用pH2.2的稀释液1.0 ml溶解,过滤(过滤器为0.22μm),经适当稀释后用6300氨基酸自动分析仪测定。上样量50μl,经内标法计算。结果见表1。
表1游离氨基酸含量%氨基酸名称 (略)
2.3微量元素含量测定用空气乙炔火焰原子吸收法测定Cu,Mn,Fe,Ca,Mg,Zn等元素;用石墨炉法测定Al,Co。结果见表2。
2.4回收率实验称取一定量的梭果黄芪于石英坩锅中,然后加入一定量标准品用处理样品一样的消化、测定。结果Cu,Mn,Ca,Mg,Zn,Fe的平均回收率分别为98.57%,102.99%,104.37%,96.81%,113.01%,118.24%。
三种黄芪都含有相当量的游离氨基酸,被测出15种氨基酸其总含量以云南栽培黄芪为最高(1.734 3%),梭果黄芪为其次(0.560 8%),金翼黄芪较低(0.374 1%)。
表2各种黄芪中主要微量元素的含量(略)
3讨论
3.1三种黄芪中,天门冬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、精氨酸的含量均较高,三种黄芪均不含苏氨酸与胱氨酸。云南栽培黄芪除不含苯丙氨酸外,其他氨基酸含量均比金翼黄芪及梭果黄芪高,云南栽培黄芪是否可充作正品药,可在疗效及有效成分含量上与膜荚黄芪比较后再作评价。
3.2从三组黄芪中Ca,Mg,Al,Fe四种元素含量较高,Co含量偏低。与中子活化分析法测定的黄芪中的微量元素含量比较,Cu,Mn,Zn,Fe,Co都在同一数量级,含量相差不大[11],从以上结果得出,虽然测定的方法不同,但结果相接近,进一步证实了此方法的可靠性,另一方面也可看到不同品种的黄芪各微量元素含量基本上在一定范围内。现代医学研究证实,铁、铜参与造血机制,影响血红蛋白的生成。Co能刺激造血。已证实Zn有清热、凉血、消炎,生肌的作用,它不仅参与机体的免疫过程,同时又参与多种酶的合成;不仅能增强免疫,又能增强创伤组织的再生能力。黄芪中Ca、Mg含量最高,这在人体中属必需元素,对调节人体各部分的机能具有一定的积极作用。关于Al元素研究目前尚少,正常人铝总量在45~150 mg之间,可拮抗铅的毒性作用,能阻碍磷的吸收,防止肾结石的形成等。在人体内各元素间的平衡起一定的作用,但Al含量过高对中枢神经系统有不良影响。三种黄芪中可含氨基酸和各种微量元素均在一定的范围内,这对以后研究其他品种黄芪可提供参考的依据。
参考文献:
[1]宋相周.黄芪及其有效成分抗衰老研究概况[J].中药材,1990,13(8):42 42.
[2]朱丽.黄芪注射液的临床应用[J].黑龙江医药,2001,14(2):129 129.
[3]任品成.黄芪桂枝五物汤临床新用[J].黑龙江医药,15(1):47 48.
[4]曹正申.膜荚黄芪的化学成分的研究[J].中草药,1985,16(6):38 38.
[5]齐宗韶.黄芪化学成分的研究概况[J].中草药,1987,18(5):41 41.
[6]王顺春.黄芪多糖的化学和药理研究进展[J].上海中医药大学学报,2000,14(3):61 61.
[7]沈文英.中药黄芪元素的灰色关联分析[J].厦门大学学报,2000,39(6):813 813.
[8]许红心.野生黄芪与栽培黄芪甲含量的比较[J].黑龙江医药,2001,14(5):347 347.
[9]刁国平.中子治疗化分析法测定中药黄芪中的微量元素[J].中草药,1982,13(2):9 9.
[10]周继桂.中成药微量元素的含量测定及其意义[J].中成药研究,1986,9:33 33.
[11]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2000:249 250.
[12]孔详.必需微量元素的营养、生理及临床意义[M].合肥:安徽科学出版社,1999.
(上海中医药大学201203)