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       【摘要】 
       目的研究中药十大功劳在小鼠体内的抗氧化作用。方法用不同浓度十大功劳水煎液喂养小鼠4周，眼眶取血，用超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒和丙二醛（MDA）试剂盒测定小鼠血清SOD活性和MDA含量。结果与对照组比较，喂药组小鼠血清SOD活性升高，MDA含量降低。结论十大功劳在小鼠体内具有抗氧化作用，能升高血清SOD的活性，降低血清过氧化脂质产物MDA的含量。
       【关键词】  十大功劳 小鼠 超氧化物歧化酶 丙二醛
       Effect of Mahonia on the SOD Activity and MDA Content in Serum of Mice
       YU Qinggao, YAN Danhua, LIU Jiepin, XIONG Zhiqing
       （Xiangtan Vocational ＆ Technological College，Xiangtan，Hunan 411102，China）
       Abstract：Objective：To study the antioxidative effect of mahonia.Methods： The mice were fed with Mahonia water decoction in different concentrations for four weeks,the blood samples from the orbit were collected and the SOD(Superoxide Dismatase) activity and MDA(Malondialdehyde) content serum of mice were measured by using SOD kit ＆ MDA kit. Results：Compared with the control group,the SOD activity in serum in the experiment groups was inereased,the MDA content was decreased.Conclusion：Mahonia has antioxidative effect by inereasing the SOD activity of serum and lowering  the content of serum lipid peroxidation product MDA.
       Key words：Mahonia；  Mice；  Superoxide Dismatase；  Malondialdehyde
       
       众多的研究资料表明，炎症、衰老、肿瘤及呼吸系统、心血管系统、消化系统等多种系统疾病的发生及病理改变都与体内自由基产生过多或清除自由基能力下降有关［1～3］，因此临床上将自由基清除剂用于这些疾病的治疗并取得一定疗效［4～6］，自由基清除剂的寻找及合成也成为当前医药研究的主要方向之一，而中药的天然、丰富及低毒更受人们的青睐。国外学者研究发现十大功劳的茎皮萃取物和生物碱具有清除自由基、抑制脂氧化酶及抗脂质过氧化的功能［7，8］，国内研究人员从阔叶十大功劳中提取出抗氧化物质总黄酮［9］，但国内尚未发现十大功劳抗氧化作用的研究报道。笔者最近进行了十大功劳体外清除氧自由基的实验，结果表明十大功劳具有清除超氧阴离子自由基（O-2·）及羟自由基（·OH）的作用［10］。本实验则通过测定小鼠血清SOD活性及MDA含量来反映十大功劳在生物体内的抗氧化作用。
       1  器材与方法
       1.1  药品及试剂 
       十大功劳（购于湖南省湘潭市福寿堂大药房），SOD试剂盒、MDA试剂盒（南京建成生物工程研究所生产），冰乙酸（广东省汕头市西陇化工厂生产），无水乙醇（安徽安特生物化学有限公司生产）。
       1.2 动物 
       采用湘潭职业技术学院动物饲养场喂养的4周龄健康昆明系小鼠60只，雌雄不限，体重为（20.0±2.0）g。
       1.3  仪器 
       752N紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司生产），DK-600S三用恒温水浴箱（上海精密实验设备有限公司生产）。
       1.4方法
       1.4.1 制备十大功劳浓缩液 
       先用蒸馏水将中药十大功劳浸泡120 min，然后煎煮两次，第1次煎煮120 min，第2次煎煮90 min，合并煎液过滤、浓缩，配制成低、中、高3种浓度的十大功劳水煎液。
       1.4.2 不同浓度十大功劳水煎液喂养小鼠  将60只小鼠随机分成4组：喂药1组、喂药2组、喂药3组及对照组，喂药1，2，3组分别喂低、中、高浓度的水煎液0.3 ml，对照组则喂蒸馏水0.3 ml，均用小鼠灌胃器灌入，1次/d，喂养时间4周。喂养期间，各组小鼠均自由进食及进水。
       1.4.3 测小鼠血清SOD活性及MDA含量  十大功劳喂养小鼠4周后，眼眶取血，4℃冰箱过夜，3 000 r/min离心10 min得血清。按SOD试剂盒及MDA试剂盒说明操作，测定小鼠血清SOD活性及MDA含量。
       1.5  统计学处理 
       组间采用t检验，数据以±s表示。
       2结果
           
       如表1所示，喂药各组小鼠血清SOD活性明显高于对照组，有高度显著性差异；并且1组2组小鼠血清SOD活性又高于3组。喂药各组小鼠血清MDA含量明显低于对照组，有高度显著性差异；1组又明显低于2组和3组。表1  各组小鼠血清SOD活性及MDA含量的比较（略）
       3  讨论
           
       十大功劳有清热燥湿，泻火解毒的功能，用于湿热泻痢、黄疸、目赤肿痛、胃火牙痛、疮疖、痈肿、痢疾等［11］。人们对其化学成分的研究发现，十大功劳含有生物碱、挥发油、总黄酮等多种有效成分［9，12，13］，具有抗菌、抗病毒、抑制角质细胞增生、抗突变、抗氧化等功能［7，8，14～17］，我们此前的研究也证实了它在体外清除氧自由基的作用［10］。本次研究显示了十大功劳在生物体内的抗氧化作用，与对照组比较，十大功劳能使喂药组小鼠血清SOD活性升高，MDA含量降低。但实验中并没有表现出明显的量-效关系，可能与起始剂量过高有关。另外，结果显示药物剂量太高反而使它的这种作用降低，如喂药3组小鼠血清SOD活性低于喂药1组和2组，喂药2组和3组血清MDA含量则高于喂药1组，其原因有待于进一步研究，但这种结果可为临床用药提供参考。生物体内产生的自由基主要是O-2·，O-2·还可进一步衍生为·OH 和H2O2。它们化学性质活泼，可作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，加速组织的衰老过程，并可导致体内代谢紊乱而引起疾病。机体对O-2·的清除主要靠SOD，SOD可催化2分子O-2·生成H2O2和O2，H2O2又在过氧化氢酶的催化下还原为H2O：2O-2· +2H+→H2O2+O2，2H2O2→2H2O+O2。MDA是体内脂质过氧化的产物，当体内自由基增多时，MDA含量则升高。本实验结果表明，十大功劳可使小鼠体内SOD活性升高，而使MDA含量降低，显示了十大功劳在生物体内的抗氧自由基作用。十大功劳在我国资源丰富，临床上应用广泛，它的抗氧化功能研究，可为该药的临床应用机制提供新的理论依据，并有望在临床及卫生保健方面开辟新的应用领域。
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