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       【摘要】 
       目的比较不同年份新会陈皮总黄酮和橙皮苷含量的变化规律。方法采用紫外分光光度法测定陈皮总黄酮的含量; 用高效液相色谱法（HPLC）测定陈皮中橙皮苷的含量。结果不同年份新会陈皮贮存期越长，总黄酮含量和橙皮苷含量越高。结论总黄酮是陈皮有效成分之一，橙皮苷则是陈皮总黄酮的主要成分，实验结果验证古人所述陈皮“陈久者良”有一定的道理。
       【关键词】  新会陈皮 不同年份 总黄酮 橙皮苷
       Dynamic Analysis of the Total Flavone and the Hesperidin from Different Specific Years in XinHui Dried Tangerine Peel
       LIN Lin , LIN Zixia ,  MO Yunyan,LIAO Sumei,  HUANG Qinghua
       (Department of Pharmaceutical Analysis，Guangdong College of Pharmacology，Guangzhou，Guangdong 510006，China )
       Abstract：ObjectiveTo compare the total flavone and the hesperidin contents from different specific years in dried tangerine peel paoduced in Xinhui.MethodsThe content of total flavone from bangerine peel was determined by  UV-spectrophotometry, and the content of Hesperidin was assayed by HPLC.ResultsThe longer the storing time is the higher the content of effective constituents of total flavone and hesperidin is. ConclusionTotal flavone is one of the effective constituents in dried tangerine peel and hesperidin is a main component in total flavone. The experimental result explains the people saying “the older the better”.
       Key words：XinHui dried tangerine peel;   Different specific years;   Total flavone ;   Hesperidin
       
       陈皮是芸香科植物橘Citri reticulata Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，药材分为“陈皮”和“广陈皮” 。“广陈皮”为茶枝柑Citri reticulata ‘Chachi’的干燥成熟果皮，主产于广东新会，是广东十大道地药材之一，具有理气健脾、燥湿化痰的功效。陈皮的主要有效成分为黄酮类化合物和挥发油，其中橙皮苷是陈皮黄酮类化合物的主要成分。中医药传统上认为陈皮“陈久者良”，南宋医学家陶弘景曰“橘皮疗气大胜，须陈久者良”。本文对不同年份新会陈皮的总黄酮和橙皮苷含量进行系统分析比较，验证陈皮“陈久者良”的物质基础，为陈皮的有效开发利用提供依据。
       1  仪器与试药
       1. 1  仪器
       SPD-10AVP高效液相色谱仪（日本岛津公司）; TU1810 紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)等。
       1. 2  材料与试剂 
       橙皮苷(中国药品生物制品检定所,批号110712-200512) ; 甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。陈皮样品由新会陈皮协会提供，并由广东药学院药用植物与中药鉴定学教研室李书渊教授鉴定为茶枝柑Citri Reticulata ‘Chachi’的干燥成熟果皮。样品粉碎成粗粉，置干燥箱于60 ℃烘干12 h以上。于避光、阴凉处存放。
       2  方法与结果
       2. 1  不同年份新会陈皮总黄酮含量测定［1］
       2.1.1  对照品溶液的制备　
       精密称取橙皮苷对照品11.37 mg，用甲醇溶解并定容至50 ml，制成0.227 4 mg/ml的橙皮苷对照品贮备液。
       2.1.2  供试品贮备液的制备　
       取样品粉末约1 .0 g ，精密称定，置索氏提取器中，加80 ml石油醚（30～60℃）60℃提取至无色，放冷，挥去石油醚，再加80 ml 60%乙醇，索氏提取至无色，将提取液转移置100 ml量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混匀，即得。
       2.1.3  测定波长的选择 
       分别精密量取1.5 ml对照品贮备液、0.5 ml供试品贮备液 至25 ml 量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混匀。以60%乙醇溶液为空白，在200～400 nm之间进行扫描，结果见图1，2。由图1可见对照品溶液在285 nm处有吸收峰，图2可见供试品溶液在275 nm处和331 nm处有吸收峰。故选择285nm为测定波长。
       2.1.4  标准曲线的绘制 
       取0.2274 mg/ml的橙皮苷对照品贮备液，精密吸取0.5，1，1.5，2.0，2.5 ml置于25 ml量瓶中，用60%乙醇定容。在285 nm处测定吸光度，并绘制校准曲线。结果表明：在4.548～22.74 μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。回归方程为：A=0.033C+0.013，相关系数r=0.999 3。
       2.1.5  稳定性实验
       精密量取供试品贮备液0.5 置于～25 ml 量瓶中，用60%乙醇定容，在285 nm处进行测定，结果:0 h的A值为0.573，1 h为0.571，2 h为0.568，4 h为0.565，6 h为0.564，24 h为0.546，RSD为1.7%。结果表明，样品溶液在24 h内稳定性良好。
       2.1.6  重现性实验
       取同一样品6份，按 “2.1.2”项制备成供试品贮备液并稀释50倍，在285 nm处连续测定6次A值，RSD为1.7%, 说明本实验的重现性良好。
       2.1.7   回收率实验 
       精密吸取对照品贮备液2.5 ml稀释到25 ml的量瓶中，得到22.74 μg/ml的对照品溶液。精密吸取供试品贮备液3 ml稀释定容到100 ml，再分别精密吸取该溶液1 ml置9个10 ml量瓶，分别加入对照品溶液0.5，1，1.5 ml各3份，稀释定容，在285 nm处测定其吸光度，并计算回收率。结果见表1。表1  回收率实验测定结果（略）
       2.1.8  总黄酮测定　
       取适量不同年份新会陈皮按“2.1.2”项制备成供试品贮备液并稀释50倍，在285 nm处分别测定A值，计算出供试品中总黄酮的含量。结果见表2。表2  不同年份新会陈皮总黄酮含量测定结果（略）
       2. 2   橙皮苷含量测定［2］   
       按照《中国药典》2005版Ⅰ部陈皮项下含量测定方法，用外标两点法对不同年份新会陈皮的橙皮苷进行测定。结果见表3。表3  不同年份新会陈皮的橙皮苷含量（略）
       3  分析与结论
       用橙皮苷作对照品，用紫外分光光度法测定陈皮总黄酮的含量，通过方法学考察，该法操作较简便，准确，重现性较好。
       
       文献研究表明，陈皮提取物具有抗氧化，有效清除自由基的作用 ；陈皮中黄酮类成分除了具有抗氧化作用还有抗衰老作用，能有效延长果蝇的寿命；橙皮苷能有效软化心血管，增加心血管通透性，并能减轻家兔实验性动脉粥样硬化病变［3～5］，证明陈皮中黄酮类成分和橙皮苷都是具有药理作用的活性化学物质。本实验结果证实：新会陈皮的贮存年份越长，总黄酮和橙皮苷的含量越高，说明古人所述陈皮“陈久者良”有一定的道理。
       本实验用不同乙醇浓度进行陈皮总黄酮的提取，结果显示60%乙醇提取的效果最好。
       
       通过水分测定，含量测定结果折合成干燥品的含量 。
       【参考文献】
         　　［1］李小风，张立坚，程荷风，等.中药佛手中总黄酮含量的紫外分析［J］.时珍国医国药，2004,15(10):551.
       
       ［2］国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：132.
       
       ［3］王姝梅，何春兰.陈皮提取物清除氧自由基和抗脂质过氧化作用［J］.中国药科大学学报，1998,29(6):462.
       
       ［4］苏丹，秦德安.陈皮提取液抗氧化及延缓衰老作用研究［J］.华东师范大学学报(自然科学版)，1999,1:100.
       
       ［5］李琴山，娄桂予，钱民章，等. 橙皮苷与芦丁体外抗高密度脂蛋白氧化修饰的作用［J］.中西医结合学报，2004, 3(2)：115.