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晋产远志品种资源多糖含量测定
作者:赵云生 严铸云 李占林 毛福英 张丽萍

《时珍国医国药》 2005年 第9期

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       【关键词】  品种
        摘要:目的:研究山西道地药材晋产远志品种资源多糖类含量。方法:应用苯酚-硫酸显色法测定。结果:大部分远志药材的总糖含量达22%以上,其中可溶性多糖含量一般在12%以上,粗多糖含量大都在10%以下。结论:不同资源的多糖含量有显著性差异。
        关键词:远志;多糖;含量测定
        The Determination of Polysaccharides Content in the Different Polygala tenuifolia Willd Resources from Shanxi
        ZHAO Yunsheng1, YAN Zhuyun2, LI Zhanlin1, MAO Fuying3, ZHANG Liping1
        (1.Institute of Cash Crop Research, Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Fenyang,Shanxi 032200, China; 2.College of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicne and Materia Medica,Chengdu,Sichuan 610075, China; 3.Fenyan Disease Control Center, Fenyang, Shanxi 032200, China)
        Abstract:Objective:To study the polysaccharide"s content in the different Polygala tenuifolia Willd resources from Shanxi.Methods:The polysaccharide"s content was determined by the colorimetric with sulfuric acid and phenol.Results:The total polysaceharide content of the most medicinal materias from Polygala tenuiflia Willd is below 10% mostly.Conclusion:There is significance difference in different resources.
        Key words:Radix Polygala tenuifolia Willd;Polysaccharide"s;Content determination
        远志为常用中药之一,药用历史悠久,在《神农本草经》中列为上品,具有安神益智、祛痰、消肿之功。临床应用范围较广,疗效确切。关于远志的化学成分已有大量研究,含有皂苷、酮、糖类、木脂素、生物碱等多种成分。以前认为远志主要的药效成分是远志皂苷和酮,但现代药理研究表明对远志中糖类成分的研究,开辟了该种药材化学研究的新领域,不仅加深了对其多种药理活性的理解,而且对于抗老化和脑保护新药的开发具有重要意义,也合理地解释了远志的宁心安神、益智的传统疗效,因而可选多糖作为控制远志药材质量的指标成分,本实验对山西道地药材远志16份品种资源进行了糖类含量测定。
           1实验仪器与材料
        1.1仪器7530G分光光度计(安捷伦科技上海仪器有限公司),KQ50型超声波清洗器,电子天平,HZ3型循环水真空泵,电热恒温水浴锅。
        1.2材料葡萄糖、浓硫酸、盐酸、无水乙醇、苯酚,铝片和NaHCO3等均为分析纯。
           2方法与结果
        2.1远志糖类供试液制备
        2.1.1可溶性糖的提取精称烘至恒重的远志药材0.5 g样品(40目粉)于100 ml具塞三角瓶,加70%乙醇 45 ml,浸泡30 min,超声提取30 min,静置,于100 ml容量瓶中滤过,重复提取1次,滤过,洗涤滤纸,以70%EtOH定容至刻度,备用。
        2.1.2粗多糖的提取将2.1.1中提取的药渣在水浴80℃以下蒸干,加20%的盐酸45 ml,沸水浴提取1 h,充分放冷,于100 ml定容至刻度,备用。2.25%苯酚试剂的配制取苯酚100 g,加铝片0.2 g和NaHCO3 1.0 g,蒸馏,收集182℃馏分,称取12.5 g,加适量水溶解,转移至250 ml容量瓶中,加水至刻度,置冰箱内备用。
        2.3标准曲线的制备
        2.3.1标准液的配制将葡萄糖于60℃烘1 h,再逐渐升温至105℃干燥至恒重,精密称取500 mg,置500 ml容量瓶中,用蒸馏水溶解并稀释至刻度。
        2.3.2标准曲线的绘制精密吸取标准液0.5,2.5,5.0,7.5,10.0 ml分别置于50 ml容量瓶中,用蒸馏水定容,分别得10,50,100,150,200 μg/ml的试液。精密吸取上述各浓度葡萄糖溶液1.0 ml于具塞试管中,分别加入苯酚试剂1.2 ml,浓硫酸6 ml,混匀,放置15 min,再置100 ℃水浴中放置15 min,取出,另以蒸馏水1.0 ml,加入苯酚试剂和浓硫酸同上操作,488 nm处测定吸收度,以吸收度为纵座标,葡萄糖浓度为横坐标,作回归处理得回归方程:Y=0.003 3X0.026 7,r=0.999 5,n=5,葡萄糖浓度在10 ~200 μg/ml范围内与吸收度呈良好线性关系。
        2.4样品液的制备与测定
        2.4.1可溶性多糖的测定取可溶性多糖提取液1.0 ml,置10 ml容量瓶中,用70%的乙醇稀释至刻度,混匀定容,精密吸取该溶液1.0 ml于具塞试管中,分别加入苯酚试剂1.2 ml,浓硫酸6 ml,混匀,放置15 min,再置100 ℃水浴中放置15 min,取出,另取70%乙醇1.0 ml,加入苯酚试剂和浓硫酸同上操作,于488 nm处测定吸收度。
        2.4.2粗多糖的测定取粗多糖提取液1.0 ml,置于10 ml容量瓶中,用2%的盐酸稀释至刻度,混匀定容,精密吸取该溶液1.0 ml于具塞试管中,分别加入苯酚试剂1.2 ml,浓硫酸6 ml,混匀,放置15 min,再置100 ℃水浴中放置15 min,取出,另取70%乙醇1.0 ml,加入苯酚试剂和浓硫酸同上操作,于488 nm处测定吸收度。
        2.5含量计算按标准曲线制备项下方法测定,从回归方程中求出供试液中葡萄糖含量,按下式计算样品中糖含量:糖含量(%)=C×D×106/W×100%式中C为回归方程所测糖浓度(μg/ml),D=10×100 ml为供试液的稀释倍数,W为供试品重量(g),按上式可分别计算出远志可溶性糖和粗多糖的含量,两者之和即为所求远志总多糖的含量见表1。
        表1晋产远志各品种资源糖类含量%样品编号  (略)
           3小结
        本实验测定方法的原理是先用70%乙醇提单糖、低聚糖等可溶性糖类成分,再用稀盐酸提取水解其中的多糖类成分,然后两种提取方法所得糖类和苯酚缩合成有色化合物,用分光光度法于适当波长处测定其糖类含量。用苯酚一硫酸比色法测定远志多糖含量,2 h内吸收值稳定。10~200 μg范围内线形关系良好,回收率为97.56%,RSD为2.74%,可作为该药材质量的分析方法。该方法简便,灵敏度高,重现性较好,但操作必须规范,否则对实验结果有影响。实验结果表明,晋产不同远志品种资源糖类含量差异较大,达显著水平(0.05%),提示需加强远志各品种资源质量研究。
           参考文献
        [1]石俊英,李宝国.山东地产药材北沙参多糖含量测定[J].山东中医药大学学报,2002,26(2):139142.
        [2]万丽,刘玮琦.不同产地白术的多糖含量测定[J].世界科学技术一中医药现代化,2003,5(2):4949.
        [3]刘友平,李祖伦.分光光度法测定川牛膝中多糖含量[J].1997,20(4):4951.
        (1.山西省农科院经济作物研究所,山西 汾阳032200;2.成都中医药大学药学院,四川 成都610075;3.山西省汾阳市疾病控制中心,山西 汾阳032200)

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