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       【关键词】  酸枣仁
        摘要：目的：研究比较酸枣仁生品和炒品及总黄酮和总皂苷的镇静催眠作用。方法：采用小鼠活动记数法和协同阈下剂量戊巴比妥钠镇静催眠法。结果：酸枣仁生品以20 g/kg剂量及酸枣仁炒品以10 g/kg剂量灌胃给药，可显著减少小鼠自发活动次数；酸枣仁生品和炒品以10 g/kg和20 g/kg剂量灌胃给药均可协同阈下剂量戊巴比妥钠使入睡小鼠数目显著增多。总皂苷以240 mg/kg和480 mg/kg剂量给药可显著减少小鼠自发活动次数，以480 mg/kg剂量给药可显著增加阈下剂量戊巴比妥钠所致翻正反射消失小鼠数；总黄酮以300 mg/kg剂量给药可显著减少小鼠自发活动次数、增加阈下剂量戊巴比妥钠所致翻正反射消失小鼠数。结论：酸枣仁生品和炒品均有抑制小鼠自发活动及协同戊巴比妥钠镇静催眠作用，且炒酸枣仁中总黄酮和总皂苷均有抑制小鼠自发活动和协同戊巴比妥钠镇静催眠作用。
        关键词：酸枣仁；总黄酮；总皂苷；镇静催眠
        Comparative Studies on the Sedative and Hypnotic Effect of the Crude and Processed Semen of Ziziphi Spinosa, and the Effect of Total Flavonoid and Saponin
        WU Yulan, XU Huiqin, CHEN Sen
        (Nanjing University of TCM, Nanjing, Jiangsu 210029, China)
        Abstract:Objective:To study the pharmacological effect of the crude and parched semen of Ziziphi Spinosa; To compare the effect between the total flavonoid and saponin from the parched semen.Methods:To observe the spontaneous motion and hypnosis in mice.Results:The crude and parched semen of Ziziphi Spinosa, and the sections from the parched semen could inhibit spontaneous motion and promote sleep coordinating with pentobarbital sodium of subthreshold dose.Conclusion:Both the crude and parched semen, both the total saponin and the total flavonoid are effective for sedative and hypnotic effects.
        Key words:Semen of Ziziphi Spinosa;Total flavonoid;Total saponin;Sedative and hypnotic effects
        酸枣仁为鼠李科植物酸枣Zizyphus jujuba Mill.var.spinosa(Bge.)Hu ex H.F.Chou的干燥成熟种子，味甘，性平，具宁心安神、养肝、敛汗生津之功效。主治虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗，津伤口渴，为常用中药。酸枣仁主要含有黄酮［1］和皂苷［2］等镇静催眠有效成分，临床上酸枣仁主要以生品和炒制品入药。本文对生酸枣仁和炒酸枣仁以及炒酸枣仁中提取出的总皂苷和总黄酮进行研究比较其镇静催眠作用。
           1实验材料
        1.1仪器自主活动记录仪，北京医科院。
        1.2实验样品与试剂酸枣仁，经本校鉴定教研室王春根教授鉴定为鼠李科植物酸枣Zizyphus jujuba Mill.var.spinosa(Bge.)Hu ex H.F.Chou的干燥成熟种子。样品呈扁圆形，一面微凸起，外部紫褐色，内部乳白色。炒酸枣仁，取上述酸枣仁在140℃下炒制6 min即得。样品呈扁圆形，表面微鼓起，外部浅棕褐色，有少量焦斑，内部浅黄色。酸枣仁水煎液，取酸枣仁粉末适量，加6倍体积水煎煮3次，合并滤液并浓缩至相当于药粉浓度为0.25，0.5，1 g/ml的溶液。炒酸枣仁水煎液，取炒酸枣仁粉末适量，加6倍体积水煎煮3次，合并滤液并浓缩至相当于药粉浓度为0.25，0.5，1 g/ml的溶液。安定，江苏济川制药有限公司，批号020224，配制成含西地泮0.25 mg/ml水溶液。戊巴比妥钠，北京化学试剂公司，批号020402，配制成4 mg/ml水溶液。
        1.3实验动物昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，由南京中医药大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证：SYXK(苏)2002-0053。
        1.4数理统计方法小鼠活动记数法结果以±s表示，显著性检验用t检验。协同戊巴比妥钠法结果用x表示，显著性检验χ2检验。
           2方法与结果
        2.1生、炒酸枣仁的镇静催眠作用比较
        2.1.1对小鼠自发活动次数的影响昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，随机分为8组，每组10只，分别为：①空白组：20 ml/kg蒸馏水，②炒酸枣仁煎剂小剂量组5 g/kg，③炒酸枣仁煎剂中剂量组10 g/kg，④炒酸枣仁煎剂大剂量组20 g/kg，⑤生酸枣仁煎剂小剂量组5 g/kg，⑥生酸枣仁煎剂中剂量组10 g/kg，⑦生酸枣仁煎剂大剂量组20 g/kg，⑧安定组5 mg/kg。各组每日灌胃给药1次，连续5 d，并于末次给药后45 min记录小鼠5 min内自发活动次数。结果见表1。结果表明，炒酸枣仁煎剂和生酸枣仁煎剂均可使实验动物自发活动次数减少，且随着剂量增加活动次数减少。其中炒酸枣仁煎剂的中剂量组和大剂量组及生酸枣仁的大剂量组与空白组比较具有显著差异。可见，枣仁的生品和炒品均有抑制小鼠自发活动作用。结果表明，总皂苷的两个剂量组、总黄酮大剂量组及安定组与空白组对照均有显著差异(P＜0.05或P＜0.01)。说明总黄酮组与总皂苷组均有抑制小鼠自发活动作用。
        2.1.2协同戊巴比妥钠镇静催眠作用昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，随机分为8组，每组18只，组次同上，每天灌胃给药，连续5 d，并于末次给药后45 min，ip戊巴比妥钠溶液剂量为24 mg/kg，然后观察其翻正反射的消失，以30 min内翻正反射消失，且翻正反射消失持续时间达1 min以上者为阳性，记录翻正反射消失动物数。结果见表2。
        表1生、炒酸枣仁对小鼠自发活动次数影响组别 （略）
        表2生、炒酸枣仁协同阈下剂量戊巴比妥钠作用实验结果组别 （略）
        结果表明，酸枣仁的生品和炒品均可使入睡小鼠数目增加，且随着剂量增加，入睡动物数增多。其中炒酸枣仁和生酸枣仁的中剂量组和大剂量组与空白组对照均有显著差异，小剂量组与空白组对照均无显著差异；炒酸枣仁和生酸枣仁中剂量及大剂量组与安定组对照无显著差异，小剂量组与安定组对照均有显著差异。
        2.2炒酸枣仁中总皂苷和总黄酮的镇静催眠作用比较
        2.2.1样品液的制备取炒酸枣仁粉末适量，加6倍体积的石油醚回流脱脂3次，药渣干燥后加6倍体积的70%乙醇回流提取3次。提取液浓缩至无醇味，残余物加水分次溶解，离心除去不溶物，水层以水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇层，用5%NaOH溶液洗涤，正丁醇层浓缩干燥，称重，计算提取物得率为2.4%。取适量该提取物配制成相当于原药材浓度为0.5 g/ml和1 g/ml的溶液，作为总皂苷的两个剂量组试液碱水层加5%HCl调至pH值4～5，以水饱和的正丁醇层萃取3次，合并正丁醇浓缩干燥，称量，计算提取物得率为1.5%。取适量该提取物溶于水配制成相当于原药材浓度为0.5 g/ml和1 g/ml的溶液，作为总黄酮的两个剂量组试液。
        2.2.2对小鼠活动次数的影响昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g随机分为6组，每组10只，分别为：①空白组：20 ml/kg蒸馏水，②粗总皂苷小剂量组240 mg/kg，③粗总皂苷大剂量组480 mg/kg，④粗总黄酮小剂量组150 mg/kg，⑤粗总黄酮大剂量组300 mg/kg，⑥安定组5 mg/kg。各组每天灌胃给药1次，连续5 d，并于末次给药后45 min记录小鼠5 min内自发活动次数。结果见表3。
        表3总皂苷和总黄酮对小鼠自发活动次数影响组别（略）
        2.2.3协同戊巴比妥钠镇静催眠作用昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，随机分为6组，每组18只，组次同上，每天灌胃给药，连续5 d，并于末次给药后45 min，ip戊巴比妥钠溶液剂量为24 mg/kg，在后观察其翻正反射消失，以30 min内翻正反射消失，且翻正反射消失持续时间达1 min以上者为阳性，记录翻正反射消失动物数。结果见表4。
        表4总皂苷和总黄酮协同戊巴比妥钠镇静催眠作用实验结果组别  （略）
        结果表明，炒酸枣仁中总黄酮和总皂苷均有协同戊巴比妥钠使入睡小鼠数目增加的作用。其中总黄酮和总皂苷大剂量组与空白组对照均有显著差异，小剂量组与空白组对照均无显著差异；总黄酮和总皂苷大剂量组与安定组对照无显著差异，小剂量组与安定组对照均有显著差异。
           3讨论
        酸枣仁不宜过度炒，久炒易使其有效成分含量降低［3］，药效减弱。实验中所用炒酸枣仁炮制条件为140℃炒制6 min，实验结果为生、炒酸枣仁均有抑制小鼠自发活动及协同阈下剂量戊巴比妥钠镇静催眠作用，二者作用无显著差异，与文献报道一致，表明炒制后主要药效作用―镇静催眠作用未降低，说明此炒制条件适宜。本实验对炒酸枣仁中总黄酮和总皂苷的镇静催眠作用进行研究。实验结果表明，炒酸枣仁中黄酮和皂苷这两个活性部位均可抑制小鼠自发活动和协同阈下剂量戊巴比妥钠使入睡鼠数目增加，实验结果未显示出二者有显著差异。
           参考文献：
        ［1］郭胜民，范晓雯，何建伟，等.酸枣仁总黄酮的中枢抑制作用［J］.中药材，1998，21(11)：578579.
        ［2］郭胜民，范晓雯，宋少刚，等.酸枣仁总皂苷中枢抑制作用［J］.西北药学杂志，1996，11(4)：166168.
        ［3］张朝华，周好田.炒制程度对酸枣仁黄酮苷类含量的影响［J］.山东医药工业，1998，17(5).
        (南京中医药大学，江苏 南京210029)