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       【摘要】 
       目的观察玉液汤对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞因子瘦素（Leptin）和肿瘤坏死因子（TNFα）的影响。方法用高脂饲料复制胰岛素抵抗大鼠动物模型,采用放射性免疫法，观察玉液汤对脂肪细胞因子Leptin，TNFα的影响。结果玉液汤可明显改善Leptin，TNFα的表达。结论玉液汤通过改善Leptin，TNFα的表达，从脂肪细胞因子的角度改善了胰岛素抵抗。
       【关键词】  玉液汤 胰岛素抵抗 瘦素 肿瘤坏死因子 α
       The Influence of Yuyetang on the Fat Cytokines in Insulin Resistance Rats 
       FU Xueyan, DONG Lin,ZHANG Yiwei, YU Fusheng
       1.Ningxia Medical College, Yinchuan, 750021, China;
       2.Heilongjiang Agricultural Settlement Hospital,Haerbin, 150088, China
       Abstract:ObjectiveTo observe the influence of Yuyetang on the fat cytokines(TNF-α，Leptin) in insulin resistance rats. MethodsThe diabetes model was induced by high fat diet and the TNFα and leptin were observed by radio immucoassay . ResultsYuyetang could significantly improve the expression of TNFα and leptin.ConclusionYuye Tang can improve insulin resistance by modulating the expression of TNF－α and lepsin.
       Key words:Yuyetang；  Insulin resistance；  Leptin;   TNFα
       本实验组前期工作证实，玉液汤高剂量组能够明显地改善胰岛素抵抗。本实验在此基础上，观察了玉液汤对胰岛素抵抗大鼠肿瘤坏死因子α（TNFα）及瘦素（Leptin）表达的影响，从脂肪细胞因子的角度揭示玉液汤能够有效治疗胰岛素抵抗的作用机制。
       1  器材与方法
       1.1  动物   
       Wistar大鼠，体重（200±20）g，雄性，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
       1.2  药材　
       玉液汤由生山药、生黄芪、知母、生鸡内金、葛根、五味子、天花粉组成，均购于黑龙江省世一堂中药饮片厂，水煎提取浓缩至每毫升含生药0.828 g，置冰箱保存备用。
       1.3  试剂　
       肿瘤坏死因子－α放射免疫试剂盒、瘦素放射免疫试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供；罗格列酮购自人民同泰药店，灌胃时用生理盐水配成混悬液。
       1.4  仪器
       TGL-16G台式高速离心机，上海医用分析仪器厂产品；GMJ型全自动放射免疫γ计数器，江苏省医疗电子研究所产品；MDF-U5OV型低温冰箱，日本三洋产品。
       1.5 方法
       随机取10只大鼠为正常对照组。利用高脂饲料复制胰岛素抵抗动物模型，模型复制成功后，将大鼠随机分为4组，分别为模型组、阳性药组、玉液汤高、低剂量组，每组10只。高剂量组按1.35 g/kg生药（低剂量组为其1/2）灌胃给药，给药时间为2周；阳性对照组给罗格列酮，按0.20 g/kg给药；正常对照组、模型组给同体积的生理盐水10 ml/kg。两周后将大鼠处死，摘眼球取血2m1，静置30 min后，4℃离心(3 000 r/min)15 min，吸取上部血清，-20℃保存待测。
       1.5.1  对TNF-α的影响分别以缓冲液溶解抗TNF-α血清、125I-TNF-α及TNF-α标准品，并依照试剂盒说明加入分离剂后充分混匀，室温放置20 min,4℃；3 500 r/min离心25 min，吸取上清液。在γ计数器上测定cpm值。
       1.5.2   对Leptin的影响Leptin测定：设立总管、非特异管、标准管和样本管，按说明书依此加入温育液、标准品、样品、125I－Leptin和Leptin抗体，摇匀，4℃放置20 min以上，加入分离试剂，摇匀，室温放置15 min后3 500 r/min离心20 min，吸去上清液，用γ测量仪测定各管沉淀物的cpm，B/Bo%= (B-NSB) /(Bo-NSB)×100%，以各标准管浓度取对数做横坐标，以B/Bo%取对数做纵坐标绘制标准曲线，根据各样本的B/Bo%对数值，计算各所测样本的浓度。
       2  结果
       2.1  对TNF-α的影响实验结果显示模型组TNF-α高于正常对照组，且有极显著性差异。玉液汤组及罗格列酮组与模型组相比均有极显著性差异。罗格列酮组TNF-α与玉液汤低剂量组比较有显著性差异，与高剂量组比较无显著性差异，与正常对照组比较有显著性差异。
       2.2  对Leptin的影响 模型组Leptin与正常对照组比较有极显著性差异;罗格列酮组Leptin与玉液汤组比较均无统计学意义；罗格列酮组、玉液汤组Leptin与模型组比较有极显著性差异。结果见表1。表1  玉液汤对胰岛素抵抗大鼠TNF-α及Leptin的影响(略)
       3  讨论
       在体和离体的研究结果均表明，在脂肪和肌肉组织中，TNF-α可明显抑制胰岛素的作用，导致胰岛素抵抗的发生［1］。在脂肪细胞中，Leptin可抑制胰岛素对葡萄糖转运、糖原合成和脂肪合成等的促进作用；在肝脏，Leptin可降低胰岛素对肝糖原异生的抑制作用；在骨骼肌，Leptin可抑制胰岛素对糖原合成的促进作用；Leptin尚可对胰岛素受体后的信号传递途径产生影响［2］，因此，可以认为，Leptin与胰岛素抵抗的发生密切相关［3］。本实验研究证实玉液汤有改善TNF-α，Leptin表达的作用，因此，可认为玉液汤正是通过改善TNF-α,Leptin的表达来改善胰岛素抵抗的。
       【参考文献】
         　　［1］Rober Zell,Peter Geck,Karl Werdan,et al.Tnf-αand IL-α inhibit both pyruvate dehydrogenase activity and mitochondrial function in cardiomyocytes:Evidence for primary impairment of mitochondrial function［J］.diabetes,1997,46:265.
       
       ［2］Fineberg SE,Huang J,Brunelle R,et al .Effect of long-term exposure to insulin lispro on the induction of antibody response in patients with type 1 or type 2 diabetes［J］.Diabetes care,2003,26:89.
       
       ［3］Fineberg NS,Fineberg SE,Anderson JH,et al.Immunologic effects of insulin lispro(Lys(B28),Pro(B29) human insulin) in IDDM and NIDDM patients previously treated with insulin［J］.diabetes,1996,45:1750.