生脉散中五味子醇甲的药动学研究
作者：刘红，胡泽华
作者单位：刘红，胡泽华
《时珍国医国药》 2008年 第7期
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【摘要】
目的研究生脉散中五味子醇甲在大鼠体内药物代谢动力学规律。方法大鼠灌胃给予生脉散2.16 g/kg，在不同的时间点采血样，用 HPLC法测定五味子醇甲浓度的经时变化，以3p97 药代动力学软件进行分析，计算药动学参数。结果五味子醇甲在大鼠体内药动学参数分别是：t1/2(Ka) 为0.245 h, t1/2(Ke)为 1.506 h ，T(peak)为0.767h, Cmax为0.926 mg·L-1 ,AUC为2.863 mg·L-1·h-1。结论生脉散中五味子醇甲可吸收进入体内，其在体内吸收和消除速度均比较快，符合线性动力学规律。
【关键词】 生脉散；五味子醇甲；药物动力学；大鼠；高效液
Pharmacokinetic Study of Schisandrin in Shengmai Powders
LIU Hong , HU Zehua
(Department of Medicine ,Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000,China)
Abstract：ObjectiveTo study the pharmacokinetics of schizandrin in Shengmai powders in normal rats. MethodsAfter ig administration of the drug(2.16 g/kg )for the rats,the plasma was collected at different time points. The schizandrin in Shengmai powders and in the plasma were analyzed by HPLC.Pharmaconetic parameters were calculated from the plasma concentration-time data with the 3p97 software package.ResultsThe main pharmacokinetic parameters were as follows:t1/2(Ka) was 0.245 hour, t1/2(Ke) was 1.506 hour ，T(peak) was 0.767 hour, Cmax was 0.926 mg·L-1,AUC was 2.863 mg·L-1·h-1.ConclusionThe schizandrin in Shengmai powders can be absorbed into body, and its absorption and elimination is rapid.The pharmaconetics of plasma schizandrin complies with linear kinetic course.
Key words：Shengmai powders; Schisandrin; Pharmacokinetics; Rats; HPLC
生脉散最早见于金代张元素的《医学启源》，是著名的中医古方之一,由人参、麦冬、五味子组成,用于治疗“肺中伏火,脉气欲绝”，以其“补肺中元气不足”。生脉散临床用于心血管系统疾病,如心绞痛、心肌梗塞、心率失常、心肌炎等［1］。生脉散有改善心功能、增加冠脉流量、抗心肌缺血、调整心肌代谢、降低耗氧量、保护心肌细胞等药理作用［2］。方中之北五味子性味酸、甘、温，归肺、心、肾经，具有敛肺止咳定喘、滋肾涩精止泻、益气生津敛汗之功，用于气阴两伤所致的心悸等症［3］。现代药理学研究发现北五味子能减弱心肌收缩性、减慢心率、减少心肌耗能、提高心肌对缺氧的耐受性、抗心律失常、降血脂、防治动脉粥样硬化等，可用于心绞痛、高血压病等疾病的治疗［4］。北五味子为《中国药典》2005年版收载品种，除含有机酸挥发油类成分外，主要含有木脂素类成分，其中五味子醇甲含量较高［5］。实验对方中五味子醇甲的药动学规律进行研究，以阐明该方剂有效成分的药物动力学特征，为生脉散的临床应用提供依据。
1 器材与方法
1.1 动物
SD大鼠，雄性，体重 200～250 g。由湖北省实验动物中心提供(医动字第21-68号)，灌胃前禁食12 h，自由饮水。
1.2 仪器
高效液相色谱仪系统（岛津LC-10Avp），LC-10ATvp泵；SPD-10Avp紫外检测器，7725i手动进样阀，TC-100柱温箱（天津特纳科技公司），WML色谱工作站（广西威玛龙色谱科技公司）；超声波清洗器（250W，29～34 kHz；北京医疗设备二厂）。TGL-16G-A型高速冷冻离心机 （上海安亭科学仪器厂），XW-8A 漩涡混合器 （上海医科大学仪器厂）。
1.3 药品与试剂
五味子醇甲标准对照品购于中国药品生物制品检定所。生脉散由湖北民族学院中医药研究所提供。甲醇为色谱纯，实验用水为超纯水，其它试剂为分析纯。
1.4 色谱条件
色谱柱为Kromasil C18 (200 mm×5.0 mm，5 μm大连依利特)；流动相为甲醇∶水（60∶40）；流速1 ml/min；柱温40℃；检测波长230 nm。
1.5 血样的预处理
抗凝后血液立即离心分离血浆,低温冰箱冷藏待测,测定时微量加样器精取冻融血浆0.5 ml置具塞离心管中,精密加入乙腈2 ml旋混60 s，5 000 r/min离心15 min,精取上层乙腈,约60℃水浴中用氮气吹干,用100 μl甲醇溶解残留物,进样20μl。
1.6 血浆五味子醇甲浓度测定方法学考察
1.6.1 专属性
五味子醇甲标准对照品、空白血浆、给药后血浆样品测定结果显示血浆中内源性成分及代谢物不干扰生脉散中成分的检测。
1.6.2 线性范围及检测限
配制五味子醇甲浓度分别为0.53，1.06，2.65，5.30，10.6 mg·L-1的标准血浆5份,按血浆样品进行预处理,用HPLC法测定峰面积，以浓度为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,进行线性回归,得标准曲线方程Y=3 644.9X+1 054.4,r=0.999 1。结果血清五味子醇甲浓度在0.26～10.6μg范围内,峰面积与血浆浓度间线性关系良好。以信噪比S/N≥3测定检测限，结果为0.10 mg·L-1。
1.6.3 精密度实验配制浓度为0.53，2.65，10.6 mg·L-1高，中，低浓度五味子醇甲血清,在1 d内测定5次,计算RSD(%),结果为日内精密度;连续5 d，每天测定1次,计算RSD(%)，结果为日间精密度。高、中、低3种浓度样品的日内精密度分别为3.8％，5.2％，2.9％;日间精密度分别为5.9％，5.6％，4.8％。
1.6.4 回收率实验制备血清浓度为0.53，2.65，10.6 mg·L-1高、中、低浓度系列含药血清,按血清预处理方法处理,HPLC法测定峰面积,计算回收率。3个浓度的回收率分别为（86.32±1.7）％，（81.36±4.5）％，（78.66±2.5）％。
1.7 药物动力学实验
取大鼠15只,分别给予生脉散(给药量2.16 g/kg体重,相当于临床剂量2倍);实验前12 h禁食,给药前取空白血清，给药后于0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6 h将大鼠用1%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔麻醉,经动物眼内眦静脉丛采血(肝素抗凝)。
2 结果
2.1 血药浓度
采用HPLC法测定不同时间点的五味子醇甲血药浓度。结果见表1。表1 五味子醇甲血药浓度测定结果(略)
2.2 药动学参数血药浓度－时间数据经397药代动力学软件处理,得药代动力学参数。结果见表2。表2 大鼠口服生脉散五味子醇甲药物动力学参数（略）
3 讨论
五味子醇甲的血药浓度－时间数据以3p97药动学软件处理，分别以一，二，三室模型，权重系数1，1/c，1/c2计算，得出9种结果，以最小AUC判断，结果生脉散中五味子醇甲在大鼠体内过程为一房室模型，权重系数选1/c2。
中药复方的药物动力学研究相对复杂，还处于探索性阶段，对绝大多数中药复方的药物动力学规律不清楚，对复方在人体内的有效成分变化及药动学规律更不清楚；目前对中药复方新药研究尚未有药物动力学方面的要求，因而，在临床上开展中药复方药物动力学研究存在很大的难度。本文对生脉散在大鼠体内的有效成分变化及药动学规律进行了一些研究，以期对中药复方在大鼠体内的药物动力学研究方法进行探索。由于中药复方的复杂性，全面阐明中药复方的药物动力学规律难度很大。本课题研究复方可吸收的成分及其动态变化和有效成分在体内的代谢变化，对于阐明中药复方的药效物质基础、配伍规律和指导剂型改革及临床用药具有一定的意义。
【参考文献】
［1］赵永平.生脉散临床新用举隅［J］.甘肃中医，2005，23（3）：123.
［2］朱贤慧，陈晓虎. 生脉散应用于冠心病研究概况［J］.江苏中医药2005，26（12）：68.
［3］刘筱虹，王佛华.五味子药理［J］.河北中医药学报，1999，14（2）：35.
［4］应国清,俞志明,单剑峰,等.北五味子有效组分的研究进展［J］.河南中医，2005，25(6):84.
［5］杨放，袁军，付平.五味子的研究概况［J］.华西药学杂志，2003，25（6）：89.