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       【摘要】 
       目的为了明确冻干和烘干两种加工方法获得的北虫草干粉的有效成分，检测了虫草干粉中虫草素、粗多糖、氨基酸和维生素等含量。方法氨基酸含量测定采用氨基酸分析仪，其他各种有效成分的测定均采用高效液相色谱法。结果冻干处理的北虫草粉中粗多糖、虫草素、SOD及维生素E分别为烘干处理的1.20，1.45，1.23及1.25倍；虫草酸、蛋白质及维生素A的含量分别是烘干处理的0.97，0.97及0.06倍。结论不同的加工方法对虫草中的有效成分有较大的影响，在应用中应针对不同的目的选择不同的处理方法，使所需有效成分最大限度地保留。
       【关键词】  北虫草；有效成分；加工工艺
       The Comparison of Active Components in Cordyceps militaris Powder Processed by Two Different Methods
       YANG Qing, FENG Li, CHU Zheng, WANG Hongjun, ZHANG Zhiqiang, WU Yimin, LI Chunyan
       （1.Center of Disease Prevention and Control ,Shenyang Command, Shenyang, China, 110034； 2.General Hospital of Shenyang Command, Shenyang, China，110016； 3.Shenyang Zhongtian Bioengineering Company,Shenyang,110023,China）
       Abstract：ObjectiveTo determine the levels of active components in Cordyceps militaris powder processed by lyophilization and dryness and to evaluate the two different methods. MethodsThe contents of amino acid and other active components were determined using Amino Acid Analyzer and HPLC, respectively. ResultsPolysaccharide, cordycepin, SOD and Vitamin E from lyophilization Cordyceps militaris powder were 1.20, 1.45, 1.25 and 1.25 times respectively more than those from dryness Cordyceps militaris powder, while cordyceps acid, protein and vitamin A were only 0.97, 0.97, and 0.06 folds of those from dryness Cordyceps militaris powder. ConclusionDifferent processing methods have great effect on the contents of active components in Cordyceps militaris and should be considered before further use.
       Key words：Cordyceps militaris;  Active components;  Processing method
         
       北虫草是国内外公认的可以食药两用的一种真菌，其有效成分与我国名贵传统的强壮滋补药材冬虫夏草基本相似［1］。虫草真菌能够产生多种生物活性物质，如多糖、虫草酸、虫草素、超氧化物歧化酶（SOD）、维生素、多种氨基酸等，具有广泛的药理作用，在肿瘤、自身免疫性疾病、炎症、心脑血管疾病、糖尿病等疾病的治疗中起着重要作用。虫草中的各种活性成分具有不同的功效，比如：虫草氨基酸是虫草补益强壮作用和增强免疫功能的物质基础之一［2］；虫草中的多糖及核苷类有效成分能够抗肿瘤、保护肝脏、延缓衰老［3］；虫草酸可以预防血栓的形成，对各种类型的肺部疾病和支气管哮喘也有很好的疗效；虫草素作为细胞毒性物质具有增强免疫力、抗肿瘤等药理作用。目前，在虫草的开发应用中加工的方法很多，但有关冻干和烘干两种加工方法对虫草中各种有效成分的影响尚未见报道。本文实验观察了冻干和烘干两种加工北虫草方法，并对虫草粉中有效成分进行了对比分析，为虫草干粉产品的科学应用提供参考。现将结果报道如下。
       1  器材与方法
       1.1  样品来源及处理
       人工培植北虫草购自沈阳地区虫草种植农户。样品1:将虫草置60 ℃烘干，然后用高速组织捣碎机粉碎，进一步烘干，使样品含水量约为10 %。样品2：将虫草置冻干机中冻干后用高速组织捣碎机粉碎。
       1.2 仪器与试剂
       HITACHI835-50 型氨基酸分析仪（日本）, SKFG-01电热恒温鼓风（湖北），FZ102 微型植物试样捣碎机（湖北），SHB-BA95 型循环水式多用真空泵（河南），Jasco高效液相分析仪（日本）。HCl 、十氢萘、茚三酮、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、乙二醇等均为国产分析纯。虫草素标样购自Sigma公司。
       1.3  分析方法
       1.3.1  氨基酸分析样品水解 准确称取样品200 mg ，置于酸化管中, 加浓度6 mol/L 盐酸溶液4 ml，抽真空至0.08 MPa ，充氮气，封管。 在（110 ±1） ℃条件下放置24 h , 然后用0.45 μm 滤膜过滤， 取滤液1 ml ，放入55 ℃烘箱，干燥后加1 ml 双蒸水，烘干(重复1次) ，用0.02 mol/L HCl 稀释50倍于容量瓶中，上样测氨基酸含量。分析程序采用蛋白质水解分析标准程序，分析周期70 min。
       1.3.2 色谱分析色谱柱为C18柱(4.06 mm ×250 mm , 5 μm)；流动相为磷酸盐缓冲溶液(pH 6.5)-甲醇(85∶15)；流速1 ml/min；进样量10 μl；紫外检测波长260 nm。
       2 结果
       2.1 氨基酸分析结果见表1。表1  两种加工方法的北虫草干粉中氨基酸含量检测结果mg·(略)
        上述测定结果表明不同处理方法得到的北虫草干粉中均含有17 种氨基酸，均不含色氨酸。其中冻干处理的干粉中氨基酸总量高于干燥处理的干粉氨基酸总量，两者均以谷氨酸含量最高。两种方法处理的样品中蛋白质含量基本相等。
       2.2   有效成分分析结果见表2。表2  两种加工方法的北虫草干粉中活性成分检测结果（略）
       结果表明冻干虫草粉中虫草素和SOD含量明显高于干燥虫草粉中两者的含量，而维生素A含量明显偏低。
       3  讨论
        真菌中含有丰富的氨基酸和蛋白质，这也是衡量真菌营养价值的一个重要指标。本文检测的17种氨基酸含量显示，采用冻干后粉碎工艺，北虫草粉中总的活性物质成分优于烘干后粉碎工艺，且必需氨基酸含量亦较丰富。这也是冻干虫草在强壮滋补方面优于烘干虫草的物质基础。有报道显示北虫草中多数氨基酸含量略低于冬虫夏草，但考虑到虫草的来源及价格，北虫草在食用、药用上还是很有优势的。虫草素(Cordycepin) 即3 " - 脱氧腺苷( 3 " -Deoxyadenosine)是虫草的重要有效成分之一，具有多种生物活性和医疗保健功效，如抑菌作用、抗肿瘤作用、抑制病毒作用、免疫调节作用、杀灭蚊子幼虫作用等，因此对虫草素的研究已形成热潮［4，5］。从表2可看出，北虫草中虫草素含量很高，这和许多文献报道相符［6］。其中冻干干粉比干燥虫草粉含量高45%，说明不同的处理方法对虫草素含量影响巨大。本实验选用的北虫草为大米培养基人工栽培，虫草素含量略低于蚕蛹培养基栽培获得的虫草［7］。有文献报道，认为可能是蚕蛹的丝腺蛋白大大增加了蛹虫草菌的营养供给，而且特别有利于蛹虫草菌代谢产生虫草素的缘故，但蛹虫草在应用上可能会引起过敏变态反应。表2 显示冻干处理的虫草粉中粗多糖、SOD及维生素E分别为烘干处理的1.20，1.23及1.25倍。说明冻干处理方法在对这组成分的保护上也优于干燥处理的方法。本实验中发现冻干处理方法对维生素A的破坏很大，冻干处理得到的干粉中维生素A的含量仅为干燥处理的0.06倍，分析原因可能与样品工艺有关，可见两种方法各有千秋，在应用中可综合考虑使用目的、工艺成本等选择不同的处理方法。北虫草的生物有效成分较丰富, 对增强机体免疫、氧自由基的净化、延缓衰老、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化和性功能恢复等方面均有着重要的作用。本文提示在虫草的开发应用中要充分考虑加工工艺与保护有效活性物质的问题。
       【参考文献】
         　　［1］陈顺志. 冬虫夏草和北虫草研究进展［J］.中国生化药物杂志，1995,16(5):242.
       
       ［2］石继红,党化宇,万 一，等.冬虫夏草菌丝体与天然冬虫夏草蛋白成分的分析比较［J］.药物生物技术,2003,10(5):303.
       
       ［3］刘东颖.冬虫夏草诱导乳癌细胞MCF-7凋亡的实验研究［J］. 河北中医,2007,29(1):66.
       
       ［4］刘强,侯积寿. 虫草影响慢性肾功能衰竭进展的实验研究［J］. 中华肾脏病杂志,1995 ,11 (2) :81.
       
       ［5］Zhang W, Yang J, Chen J, et al. Immunomodulatory and antitumor effects of exopolysaccharide fraction from a cultivated Cordyceps sinensis (Chinese caterpillar fungus) on tumor-bearing mice［J］. Biotechnol. Appl. Biochem,2005,42(1):9.
       
       ［6］李欣,王京滨,莫艳玲,等.蛹虫草子实体水提取物对辐射损伤的保护作用研究［J］.华南预防医学,2006,32（3）：58.
       
       ［7］孙诗清,李多伟,任 静,等.RP - HPLC测定不同产地人工蛹虫草中虫草素的含量［J］.西北药学杂志,2005,20（6）：244.