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生晒参膨化炮制实验研究
作者:张翠英,王存林,莫志玲,彭娅,祁斌,张瑛,王盛民    
作者单位:(西南交通大学药学院,四川 峨眉 614202 )

《时珍国医国药》 2008年 第7期

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       【摘要】 
       目的考察膨化炮制对生晒参有效成分人参皂苷的影响。方法借鉴食品膨化原理,对生晒参进行膨化处理,并与生晒参生品进行外观性状、TLC鉴别、含量测定等对比实验。结果在相同提取次数下,生晒参膨化品每次提取10,20,30 min,生品每次提取2 h,膨化品每次提取10 min的提取方法所得的人参皂苷量与生品比较,两者存在显著性差异(P<0.05),其他两者之间比较均无显著性差异(P>0.05)。结论生晒参膨化炮制后,可显著缩短提取时间,提高其浸提效率。
       【关键词】  生晒参; 膨化炮制; 人参皂苷
       Experimental Studies on the Expanded Process of Sun-dried Ginseng
       ZHANG Cuiying, WANG Cunlin, MO Zhiling, PENG Ya, QI Bin, ZHANG Ying, WANG Shengmin
       (School of Pharmacological Sciences,Southwest Jiaotong University, Sichuan 614202, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the effects of the expanded process on ginsenoside.MethodsBased on the puffed food principle, the expanded process was conducted on the sun-dried ginseng , and compared with the traditional processed products on appearance, TLC and contents. ResultsUnder the same extracted times, Puffed sun-dried ginseng was extracted for 10min,20min,30min at a time, sun-dried ginseng was extracted for 2h one time, there were marked differences in contents of ginsenoside between 10min method and 2h method, but there was no marked difference in contents of ginsenoside between others . ConclusionBy the expanded process ,it is easy to extract active ingredients and shorten the extraction time notably.
       Key wordsSun-dried ginseng;  Expanded process;  Ginsenoside
       
       生晒参为五加科人参Panax ginseng C.A.Mey. 的干燥根,其性微凉,味甘,有补气养阴、生津之功效。适用于体质虚弱者,高血压病、糖尿病、癌症、肝炎、肾炎等慢性疾病患者[1]。实验研究证明,人参皂苷是生晒参的标志成分。但由于生晒参质地坚硬,直接采用煎煮法、温浸法、乙醇回流法提取人参皂苷都较费时,而且煎煮法温度较高,煎煮时间过长,对有效成分破坏较大[2]。为此,笔者借鉴食品膨化原理,运用单螺杆挤压膨化机对生晒参进行膨化处理,继而采用乙醇回流法提取人参皂苷,对生晒参膨化前后在不同的提取时间下,进行了含量比较[3~5]。现报道如下。
       1  材料与仪器
       1.1  不同炮制品的制备
       1.1.1 生晒参生品 
       购自成都市荷花池中药材批发市场,经本院中药鉴定室王盛民教授鉴定为五加科人参属植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根。
       1.1.2 生晒参膨化品 
       取生晒参干燥根,将其切片,粉碎,过1号筛(8~10目),加入少量的水(含水量大约为15%左右),启动单螺杆挤压膨化机,用大米预热,有成型的膨化大米出来后,用生晒参代替大米,除去大米-生晒参交接的膨化部分,收集膨化饮片,备用。
       1.2  仪器及试剂
       1.2.1 仪器
       PH-42单螺杆挤压膨化机;旋转蒸发器RE-52,上海亚荣生化仪器厂产品;DK-S26型电热恒温水浴锅;KQ-100型超声波清洗器;日本岛津LC-20A HPLC仪;电子分析天平(德国,赛多利斯sartorius,型号BS224S)。
       1.2.2  试剂高效液相使用甲醇(色谱纯,天津科密欧化学试剂公司),乙腈(色谱纯,美国Fisher公司),水为高纯水;其他所用试剂为分析纯。
       1.2.3  对照品为中国药品生物制品检定所提供人参皂苷Rg1,批号110703-200424,供含量测定用;人参皂苷Re,批号110754-200421,供含量测定。
       2 方法与结果
       2.1  生晒参膨化前后形态比较见表1和图1~2。表1  生晒参膨化前后性状特征(略)
       2.2 提取工艺研究 
       乙醇回流法:将生晒参生品和膨化炮制品粉碎,过40目筛,分别取10.0 g,加8倍量70%乙醇,水浴回流提取,温度为85℃,合并提取液,回收乙醇,用10倍量蒸馏水溶解,蒸馏瓶用少量蒸馏水洗涤,再用乙醚脱脂2次(60 ml,30ml),合并到分液漏斗中,用水饱和过的正丁醇萃取3次(60 ,40,30 ml) ,合并正丁醇萃取液。加入约1/2量的蒸馏水减压浓缩至干,残渣用甲醇溶解,定容至5 ml,作为供试品溶液,待用[6,7]。表2  生晒参膨化前后提取时间及提取次数(略)
       2.3 TLC鉴别 
       取人参皂苷标准品,称量人参皂苷Rg1 5.03 mg,人参皂苷Re 5.00 mg,用甲醇溶解,分别定容到5    ml容量瓶中,作为标准品溶液。分别吸取上述供试品溶液,将提取次数相同的4个供试品溶液点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿∶正丁醇∶甲醇∶水(13∶10∶10∶8)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰[8]。结果见图3~6。
       2.4 人参皂苷的含量测定
       2.4.1 色谱条件 
       色谱柱为Hypersil ODS柱,规格4.0 mm×200 mm,类型C18 5u,大连中汇达科学仪器公司;流动相为乙腈-0.05%磷酸(体积比19.7∶80.3);柱温30℃;检测波长203 nm;流速1.0 ml/min。
       2.4.2  标准曲线的制备及回收率
       实验结果精密称取人参皂苷Rg1对照品7.90 mg,人参皂苷Re对照品5.90 mg,置5 ml容量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,待用(每毫升混合液含人参皂苷Rg11.58 mg/ml,人参皂苷Re 1.18 mg/ml)。精密吸取混合对照品溶液1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0 ml注入液相色谱仪进行测定,测得各峰面积。以人参皂苷Rg1对照品溶液的浓度(mg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程为Y=3.359 3×106X- 90 780,r=0.999 9;以人参皂苷Re对照品溶液的浓度(mg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程为Y=3.321 4×106X-65 982 ,r=0.999 9。表明人参皂苷Rg1在0.158~1.580 mg/ml范围内线性关系良好;人参皂苷Re在0.118~1.180 mg/ml范围内线性关系良好。加样回收率实验结果显示回收率达到99.85%(n=6),RSD=1.25%。
       2.4.3 供试品溶液的制备 
       分别吸取“2.2”项提取工艺中的供试品溶液各1 ml,加甲醇定容至5 ml,经0.45 Μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为人参皂苷含量测定用的供试品溶液。
       2.4.4 样品含量测定 
       取“2.4.3”项下供试品溶液,进行含量测定。结果见表3。表3  生晒参皂苷含量测定结果(略)
       2.5 结果分析 
       预实验结果表明,生晒参在乙醇回流提取条件下,采用2 h×3次提取法,可取得较好的提取效果。在此基础上,本实验拟采取对生晒参膨化品提取10 min×3次,20 min×3次,30 min×3次,并对其中每次的实验结果进行了含量测定。运用spss11.5统计软件,对所得的数据进行单因素完全随机设计的方差分析。结果表明:① 在提取次数相同的情况下,膨化品每次提取10,20,30 min,生品每次提取2 h,膨化品每次提取10min的提取方法所得的人参皂苷量(指人参皂苷Rg1和Re的总量)与生品比较,两者存在显著性差异(P<0.05),其他两者之间比较均无显著性差异(P>0.05);② 在提取次数相同的情况下,人参皂苷Rg1的提取量间无显著性差异(P>0.05);膨化品人参皂苷Re提取量之间亦无显著性差异(P>0.05),但和生品比较,具有极显著性差异(P<0.01);③ 在单次提取时间相同的情况下,提取1,2,3次所得的人参皂苷量之间无显著性差异(P> 0.05);其中提取1次的人参皂苷Rg1含量和3次比较具有显著性差异(P<0.05),而1次与2次,2次与3次比较,人参皂苷Rg1提取量均无显著性差异(P>0.05);人参皂苷Re的提取量间亦无显著性差异(P>0.05)。
       3 讨论
        当把中药置于单螺杆挤压膨化机中,由于机械挤压和摩擦生热,机腔内温度升高,压力增大,药物中的水分呈过热状态,当由一定的高压而降至常压时,药物内部水蒸气瞬间膨胀,使细胞壁破碎,形成质地疏松的空心网状结构。因此在中药浸提过程中,有效成分更易溶解和释放出来,缩减了提取时间。表明生晒参经膨化处理后更有利于有效成分的浸提。
       
       由于膨化过程是瞬间的高温高压,因此对中药的有效成分影响较小。在生晒参的膨化实验中,可以看出膨化炮制对人参皂苷Rg1无影响;但是膨化后人参皂苷Re的浸提量却减少了,可能是由于膨化过程中具备一定的温度和水分,人参皂苷Re转化为人参皂苷Rg2,Rh1和Rg1。据文献报道,在加工红参过程中,人参皂苷Re可以水解生成人参皂苷Rg2,Rh1和Rg1,其转化率依次为48.73%,11.28%,0.002%[9]。
        生晒参含有丰富的营养价值,亦可治疗多种疾病。生晒参膨化加工后,由于比表面积增加,孔隙率增大,不需煎煮,用热水浸泡即可服用,简单易行,且携带亦方便。
        膨化技术可用于含淀粉较多的中药膨化加工,其膨化效果较好。
       【参考文献】
           [1]刘郁,刘连新.人参功效再认识[J].时珍国医国药,2006,17(2):289.
       
       [2]张崇禧,郑友兰,张春红,等.不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究[J].人参研究,2003,10(4):5.
       
       [3]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005.
       
       [4]周立艳,梁生旺,冯素香,等.优肝宁胶囊中人参皂苷Rg1,Re的含量测定[J].广东药学院学报,2006,22(2):146.
       
       [5]曹泰山,王丹.人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究[J].时珍国医国药,2005,16(8):739.
       
       [6]张玲,单卫华,梁瑞雪,等.人参提取工艺研究[J].时珍国医国药,2000,11(9):777.
       
       [7]张晶,陈全成,弓晓杰,等.不同提取方法对人参皂苷提取率的影响[J].吉林农业大学学报,2003,25(1):71.
       
       [8]周漩,冯毅凡,郭晓玲.主成分分析法用于人参皂苷薄层色谱分离的研究[J].广东药学院学报,2003,19(2):101.
       
       [9]李向高,富力,鲁歧,等.红参炮制加工中的皂苷水解反应及其产物的研究[J].吉林农业大学学报,2000,22(2):1.

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