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正交设计优选黄芪中黄芪甲苷提取工艺
作者:邢俊波 吴禾 刘云

《时珍国医国药》 2005年 第9期

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       【关键词】  设计
        摘要:目的:优选黄芪中黄芪甲苷的提取工艺。方法:以黄芪甲苷的含量为指标,应用正交实验设计筛选黄芪的最佳提取工艺条件。结果:最佳提取工艺为D3A2B3C2,即用7倍量的70%乙醇热回流提取3次,90 min/次。结论:优选得到的工艺稳定可行。
        关键词:黄芪;黄芪甲苷;提取工艺
        Study on Extract Technology of Astranoside A in Radix Astragali by Orthogonal Design
        XING Junbo, WU He, LIU Yun
        (Institute for Drug and Instrument Control, Health Dept GLD of PLA , Beijing 100071, China)
        Abstract:Objective:To optimize the extraction process for astranoside A in Cortex Phellodendri.Methods:To determine the content of astranoside A in extract solution by orthogonal design. Results:The optimum extracting condition was D3A2B3C2, that is, adding eight times amount of 70% alcohol and refluxing and extracting for 90 min  (totally extracting for 3 times).Conclusion:The optimized process is stable and highly efficient.
        Key words:Cortex Phellodendri;Astranoside A;Extract technology
        黄芪为一常用中药,具有补气固表、利尿托毒之功效。黄芪甲苷为其主要有效成分之一。为更好地发挥其药用功效,我们采用乙醇回流提取的方法,用L9(34)正交表设计实验,优化黄芪的最佳提取工艺。
           1材料与仪器
        1.1岛津Class-VP高效液相色谱仪LC-10AD (Shimadzu) 型泵;迪马公司SEDEX 75蒸发光散射检测器。
        1.2黄芪甲苷对照品(批号0781-200109,供含量测定用, 中国药品生物制品检定所提供)。试剂:乙腈为色谱纯,水为超纯水。
        实验材料经作者鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.)Hsiao的干燥根。
           2方法与结果
        2.1黄芪甲苷的含量测定
        2.1.1对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品适量,加甲醇制成每毫升含0.25 mg的对照品溶液,即得。
        2.1.2样品制备及测定采用HPLC法,根据每次实验中黄芪甲苷的浓度不同,将滤液稀释至适当浓度进行测定。
        色谱条件:色谱柱:Phenomenex Kromasil 100A(250 mm×4.6 mm,5 μm)分析柱流动相为乙腈∶水(36∶64);检测波长345 nm;柱温为40℃;流速1 ml/min。
        2.1.3线性关系的考察配制每毫升中含黄芪甲苷0.298 mg的对照品溶液,精密吸取4,6,8,8,10,12,14,16 μl,注入液相色谱仪,按上文所述色谱条件测定峰面积,以黄芪甲苷进样量(μg)的常用对数为横坐标(X),峰面积积分值的常用对数为纵坐标(Y),绘制标准曲线,计算回归方程。回归方程为Y=1.539 6X+5.438 7,R2=0.998 2。结果表明:黄芪甲苷在1.192~4.768 μg范围内有良好的线性关系。
        2.1.4出膏率的测定精密吸取滤液10 ml,水浴蒸干,105℃烘至恒温,精密称定,计算浸膏得率。
        2.2正交实验筛选黄芪中黄芪甲苷的提取工艺
        2.2.1正交实验设计选用L9(34)正交实验表,以黄芪甲苷含量为指标,选取醇浓度、醇用量、回流提取时间及提取次数对其影响。因素水平见表1。
        2.2.2实验结果通过正交实验,结果与方差分析见表2~4。
        表1因素水平水(略)
        表2L9(34)正交实验结果实验(略)
        表4黄芪甲苷含量方差分析方差来源 (略) 
   
    3讨论
        3.1提取条件的优选由表2~3可看出,因素D对浸膏提取量影响最大,影响因素D>A>C>B,且以D3A2C2B3 为佳。由表2,4可看出,因素A和D对黄芪甲苷含量有显著影响,影响因素D>A>C>B,且以D3A2C2B3 为佳。显然因素D影响最显著,故确定黄芪中黄芪总苷的最佳提取工艺为D3A2B3C2,即用7倍量的70%乙醇热回流提取3次,90 min/次。
        3.2因黄芪甲苷没有紫外吸收,故选用蒸发光散射监测器测定,
           参考文献
        [1],经过优化,采用本实验方法进行含量测定,分离好,操作简便,稳定性好。
        (中国人民解放军总后卫生部药品仪器检验所,北京100071)

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)