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       【关键词】  葛根饮片
        摘要：目的：筛选葛根饮片加工工艺。方法：采用L9(34)正交实验，选择加水量、浸泡时间、饮片厚度、水温4个因素，每个因素设3个水平，以水浸出物量、葛根总黄酮含量、葛根素含量为指标进行正交实验。结果：葛根饮片最佳加工工艺为：取葛根抢水洗净除杂后，加2倍量水，常温下浸泡8 h，切2～3厚饮片，干燥，即得。结论：该法可为葛根饮片的规范化加工提供简便、可行的方法，为葛根饮片的标准化提供参考。
        关键词：葛根；饮片；正交实验
        葛根为豆科多年生落叶藤本植物野葛Pueraria lobata(Willd.) Ohwi及甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的块根，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻的功效，主要用于外感发热头痛、项强、口渴、消渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压颈项强痛。现代研究证明，其有效成分主要为黄酮类物质：如大豆苷、大豆苷元、葛根素等，查阅《中国药典》2000年版Ⅰ部和《全国中药炮制规范》，葛根饮片加工工艺为：“除去杂质，洗净，润透，切厚片，晒干。”叙述较为简单，但可操作性不强。国内大多数文献资料都仅针对葛根的不同炮制方法对成分的影响进行了相关报道，但极少针对影响葛根质量的饮片加工工艺条件进行研究，造成葛根饮片加工工艺不规范，葛根饮片质量不稳定。据此，我们采用L9(34)正交设计试验，选择影响葛根饮片加工工艺的四个重要因素，即加水量、浸泡时间、饮片厚度、水温，每个因素设三个水平，以水浸出物量(干膏率)、葛根总黄酮含量、葛根素含量为指标进行正交试验，并根据实际情况并参照常用比例将水浸出物量、葛根总黄酮含量、葛根素含量的权重系数分别定为0.2，0.4，0.4，从而筛选最佳饮片加工工艺，现将试验方法及结果简介如下。
           1仪器与材料
        1.1仪器SPD－10A型紫外检测器，岛津LC－10A高效液相色谱仪，SPD－PAV紫外检测器：葛根素对照品(供含量测定用，批号为752－200108，由中国药品生物制品检定所提供)；甲醇为色谱纯，其他试药均分析纯。
        1.2药材本实验所用葛根药材购于四川省中药材公司，经成都中医药大学中药鉴定教研室鉴定为豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth的块根。
           2方法与结果
        2.1饮片制备按所选因素及水平(见表1)，采用L9(34)正交表设计试验(见表2)进行葛根饮片的加工炮制，得9种葛根饮片样品，干燥备用。
        2.2样品溶液的制备称取9种葛根饮片样品各10 g，置250 ml烧瓶中，加10倍量水，煎煮3次，1 h/次，滤过，合并滤液，浓缩至100 ml，放冷，备用。
        2.3干膏收得率的测定精密吸取上述备用液30 ml，分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中干燥3 h(105℃)，取出，置于干燥器中放置30 min，称重，计算干膏收得率。
        2.4葛根总黄酮含量测定照紫外分光光度法［1］测定。精密量取葛根素对照品溶液(0.102 mg/ml)0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml，分别置于10 ml量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，以蒸馏水作为空白液。于250 nm处测定A值，以浓度(mg/ml)对吸收度(A)回归。得回归方程：A＝59.591 0C－0.012 6(r＝0.999 9)。精密度量取备用液0.5 ml于100 ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品液，测定，计算，即得。
        2.5葛根素含量测定照高效液相色谱法［1］测定。色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18(5 μm，150 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇－0.015%磷酸溶液(23∶77)；流速：1.2 ml/min；柱温：35℃；检测波长：249 mm(见图1)；灵敏度：0.001AUFS。
精密量取葛根素对照品溶液(10 μg/ml)2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0 μl进样，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归，得标准曲线方程为：C＝2.591 4×10-7A＋1.935 9×10-3，r＝0.999 9。精密量取备用液1 ml于100 ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品液，测定，计算，即得。
        2.6实验结果实验结果采用中国医统软件包(PEMS)进行处理分析，结果见表2，表3。
        表1因素水平水平  （略）
        表2正交实验设计及结果序号（略）
        表3方差分析方差来源   （略）
           3结论
        从以上方差分析结果可以看出：B因素有显著的影响，影响因素B＞C＞A＞D；且B3、C3、A2、D1为最佳，故葛根饮片最佳加工工艺为：取葛根抢水洗净除杂后，加2倍量水，常温下浸泡8 h，切2～3厚饮片，干燥，即得。
           4讨论
        葛根饮片加工时，应对葛根进行抢水洗净除杂，加少量水浸泡，且浸泡时间不宜过长，主要目的在于减少葛根酚等水溶性物质的损失，提高葛根饮片的质量。
           参考文献：
        ［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2000：273273，附录ⅤA，ⅥD.
        ［2］中华人民共和国药政管理局.全国中药炮制规范［S］.北京：人民卫生出版社，1988：102102.
        ［3］于少军，王月敏，李绍华，等.葛根炮制前后化学成分的对比［J］.中国中药杂志，1992，17(9)：534536.
        ［4］解统新.浅谈葛根炮制［J］.山东中医杂志，2003，22(8)：496497.
        ［5］刘舒平，王静竹，刘春生.HPLC法测定葛根炮制品中葛根素的含量［J］.中国中药杂志，1998，23(12)：723725.
        (1.西华大学生物工程学院，四川 成都610039；2.成都中医药大学药学院，四川 成都610075)