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玛咖提取物的激素样活性实验研究
作者:张永忠, 程华    
作者单位:武汉科技大学医学院,湖北 武汉 430061

《时珍国医国药》 2008年 第8期

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       【摘要】 
       目的初步研究玛咖提取物的激素样活性作用。方法采用雄性去势小鼠,经灌胃玛咖不同提取物22 d后,观察各组小鼠前列腺和精囊腺的重量并测定血清中睾丸酮的含量。用幼龄雌性小鼠,灌胃玛咖醇提物10 d后,观察各组小鼠子宫、卵巢重量以及阴道上皮角化细胞。结果玛咖提取物可以显著提高雄性去势小鼠前列腺和精囊腺重量,但并不升高血清睾丸酮水平。玛咖醇提取物对雌性幼年小鼠子宫、卵巢重量以及阴道上皮角化细胞没有显著影响。结论玛咖具有弱的雄激素样作用,但对幼年雌性小鼠未显示雌激素样活性。
       【关键词】  玛咖 雄激素样作用 雌激素样作用
       Experimental Study of Hormone-like Activity of Extract of Maca(Lepidium meyenii Walp. )
       ZHANG Yong-zhong, CHENG Hua
       (Medical College of Wuhan University of Science & Technology, Wuhan 430061, China)
       Abstract:ObjectiveTo study the testosterone-like and estrogen-like effects of extract of Maca(Lepidium meyenii Walp.) in vivo.  MethodsAqueous,ethanol and ethereal extracts of Maca were orally administered castrated mice for 22 days. The testosterone-like effects were measured by prostate & seminal vesicle weight, and serum testosterone level. Infancy female mice were administered to ethanol extract of Maca for 10 days. The estrogen-like effects were measured by uterus and ovary weight, and the ratios of keratinocyte in vaginal smear. ResultsMaca extract significantly increased prostate & seminal vesicle weight of castrated mice, while had no effect on the serum testosterone level. There was no remarkable effect on uterus and ovary weight, as well as on the ratios of keratinocyte of vaginal epithelial cell. ConclusionMaca has weak testosterone-like effect, but no estrogen-like effect on infancy female mice.
       Key words:Maca(Lepidium meyeni Walp);  Estrogen-like effect;  Testosterone-like effect
         
       玛咖(Maca)为十字花科独行菜属植物Lepidium meyenii Walp.的形似萝卜的地下根茎[1],原产于海拔3500~4500m的南美安第斯山区,在南美已有五千八百多年的食用历史,传统上作为食物和草药,可改善性功能、提高生育力、抗疲劳、抗肿瘤和用于治疗女性更年期综合征等,有“南美人参”和“秘鲁人参”的美誉[2]。近十年来,以玛咖为主要原料的保健品风靡全球。玛咖的这一系列功效是否与激素样作用有关,尚无实验研究报道。本文采用雄性去势小鼠和幼年雌性小鼠观察玛咖提取物的雄性激素和雌性激素样作用。
       1   材料与仪器
       1.1  药物 
       玛咖水提物制备:称取50 g玛咖粉(由玛雅生物工程湖北有限公司提供),用600 ml 30%乙醇溶液分两次提取,提取3 h/次,3 000 r/min 离心,取上层溶液用旋转蒸发器浓缩到100 ml,每毫升溶液相当于玛咖粉0.5g。实验时用蒸馏水稀释到0.1 g/ml和0.05 g/ml备用。
       玛咖乙醇提取物的制备:称取玛咖粉50 g,用600 ml 90%乙醇溶液分两次提取,3 h/次,过滤后,用旋转蒸发仪回收乙醇,得棕色浸膏5.5 g。实验时用1%吐温-80研磨助溶,配成0.25 g干粉/ml备用。
       玛咖乙醚提取物的制备:称取玛咖粉50 g,用600 ml乙醚分两次提取,3 h/次,过滤后,蒸馏器回收乙醚,得大约1.5 g棕色油状物。实验时用1%吐温-80研磨助溶,配成0.25 g干粉/ml和0.1 g干粉/ml备用。
       甲基睾丸素,镇江吉贝尔药业有限公司,批号为010901。临用时用1%吐温-80研磨助溶,蒸馏水配成0.5 mg/ml备用。己烯雌酚片,天津力生制药股份有限公司,批号:0311011,使用时研磨成细粉,加蒸馏水配成一定浓度的混悬液备用。
       睾丸酮磁酶免测定试剂盒由加拿大Serozyme-I公司提供。
       1.2  动物昆明种雄性小鼠,6周龄左右,体重18~20 g;幼年雌性小鼠,3周龄,体重8~12 g,由湖北省预防医学科学院实验动物中心提供。实验动物生产许可证号为SCXK(鄂)2003-0005,实验动物使用许可证号为SYXK(鄂)2003-0014。动物饲养室温度为22~24℃ ,湿度为65% ~80%。
       1.3  仪器RE-52AA旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;Serono diagnostics 磁酶免测定仪,加拿大Serozyme-I公司产品。
       2  方法
       2.1  雄性激素样活性实验取雄性小鼠70只,背位固定于蛙板上,将睾丸处皮肤用碘酒和酒精先后消毒,剪开皮肤,分离皮下组织,将睾丸拉出,结扎睾丸下所连接的透明系睾膜,将两侧睾丸连同附睾一并剪除,缝合创口。术后第2天,将小鼠随机分组,每组10只。玛咖水提物高、低剂量组剂量分别为2.0,1.0 g/kg;乙醇提取物组剂量为5.0 g/kg;乙醚提取物高、低剂量组剂量分别为5.0,2.0 g/kg;阳性药甲睾素组剂量为10 mg/kg;另设模型对照组与正常对照组。均为口服灌胃给药,1次/d,连续给药22 d。末次给药后30 min ,摘眼球取血,分离前列腺和精囊腺称重,计算脏器指数。血液静置40 min后,离心,吸取血清置-20℃冰箱贮存。用磁酶免测定法(IEMA)测量血清中睾丸酮水平。
       2.2  雌性激素样活性实验幼年雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10只。对照组给予等体积蒸馏水;玛咖醇提取物高、低剂量组分别灌胃剂量为0.5,0.2 g/kg;阳性药组灌胃己烯雌酚0.1 mg/kg。连续给药10 d。末次给药后,取小鼠逐只进行阴道涂片:左手背位固定小鼠,右手取一棉签细心插入小鼠阴道内2~3 mm,转动,抽出,涂在事先已加有1滴生理盐水的玻片上,苏木素染色,显微镜下进行细胞学检查,计数角化上皮细胞。按角化上皮细胞占细胞总数50% 分类,大于50% 为阳性,小于50% 为阴性。颈椎脱臼处死动物,迅速取子宫,卵巢称重[3]。
       2.3  统计方法阴道内上皮角化细胞计数作χ2检验,其余采用t检验,用SPSS12.0软件进行统计学处理。
       3  结果
       3.1   玛咖提取物对雄性去势小鼠的雄激素样作用雄性小鼠行睾丸摘除手术22d后,精囊腺和前列腺重量极显著降低,玛咖水提物大剂量、乙醇提取物和乙醚提取物大剂量组的重量与模型组相比有显著增加。甲基睾丸素组的重量在去势小鼠中为最大。由磁酶免检测结果可知,小鼠摘除睾丸后,模型对照组和玛咖提取物各组血清睾丸酮水平急剧下降,含量<0.1,超出仪器检测范围,阳性药甲基睾丸素组的血清睾丸酮水平略高,但与正常组相比,仍处于很低水平。各组小鼠体重无显著性差异。结果见表1。表1  玛咖提取物对雄性去势小鼠前列腺和精囊腺重量以及血清睾丸酮水平的影响(略)
       3.2  玛咖醇提物对幼年雌性小鼠的雌激素样作用幼年雌性小鼠给药10 d后,各组小鼠体重无显著性差异,玛咖给药组小鼠子宫、卵巢重量指数以及阴道上皮角化细胞数量与对照组相比,没有显著增加。而己烯雌酚组小鼠的子宫、卵巢重量指数以及阴道上皮角化细胞数量均较对照组有显著性增加(P<0.01, P<0.05)。结果见表2。表2  玛咖醇提取物对幼年雌性小鼠性腺重量及阴道上皮角化细胞数量的影响(略)
       4  讨论
       玛咖是近年来从传统经验中挖掘出的具有很好作用的保健食品。研究表明它对人体有较好的适应原样作用,对人体亚健康状态有很好的调节作用,特别是在改善性功能和调节内分泌方面有显著作用。玛咖除含有丰富的营养成分外,还含有特有的生物碱以及芥子油苷,这些成分与改善性功能和调节内分泌的作用密切相关[4]。
       
       本研究发现,雄性小鼠去势后因雄性激素分泌减少,其附性器官精囊腺和前列腺发育受阻,重量减轻,服用玛咖提取物后,小鼠精囊腺和前列腺重量较模型组有显著增大,但与正常对照比较,还是很轻。血清睾丸酮水平也相当低,超出了仪器的检测范围。提示玛咖提取物具有较弱的雄激素样作用,而且这种作用可能不是通过提高血清睾丸酮水平来实现的。这一作用对它改善性功能具有一定意义。同时该研究表明Maca的弱雄激素作用是多种成分共同起作用的,其中乙醇提取部位的作用最强。雌激素活性实验显示,在雌激素水平低下的幼年雌性小鼠中,玛咖提取物两剂量对子宫和卵巢的生长无明显刺激作用。提示玛咖乙醇提取物在当前剂量下,对幼年雌性小鼠没有明显的雌激素样作用。以上研究只对激素水平低下和幼年动物进行了激素样作用的初步观察,在今后的研究中,尚需对正常动物及更年期动物的性器官及内分泌激素水平的影响作进一步研究。
       【参考文献】
           [1]Dini A, Migliuolo G, Rastrelli L, et al. Chemical composition of Lepidium meyenii[J].Food Chemistry,1994,49(4):347.
       
       [2]K.Valentová,J. Ulrichová. Smallanthus sonchifolius and Lepidium meyenii: prospective Andean crops for the prevention of chronic diseases[J]. Biomed. Papers, 2003, 147(2):119.
       
       [3]郑高利,张信岳,郑经伟,等.葛根素和葛根总黄酮的雌激素样活性[J]. 中药材,2002,25(8):566.
       
       [4]Zheng B L, He K, Kim C H, et al. Effect of a lipidic extract from Lepidium meyenii on sexual behavior in mice and rats[J].Urology,2000,55(4):598.

经典中医古籍

中药学教材(附图片)

穴位数据库(附图片)