紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量
作者:郑湘娟, 余淑娴, 徐晓芳,万南红, 李玉琳,张小强
作者单位:1.南昌大学理学院,江西 南昌 330031; 2.南昌大学信息工程学院,江西 南昌 330031
《时珍国医国药》 2008年 第8期
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【摘要】
目的建立虎杖提取物中白藜芦醇含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法,测定波长为305 nm。结果检测浓度在3~16 μg/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.999 0) 。结论该方法简便、快速、准确,可作为提取过程中的实时监测。
【关键词】 虎杖 白藜芦醇 紫外分光光度法
Determination of Resveratrol in Polygonum cuspidatum by UV Spectrophotometry
ZHENG Xiangjuan, YU Shuxian ,XU Xiaofang, WAN Nanhong,LI Yulin,ZHANG Xiaoqiang
(1. School of Science, Nanchang University, Nanchang 330031, China;2.School of Information Engineering,Nanchang University,Nanchang 330031,China)
Abstract:ObjectiveTo establish the determination method for resveratrol in extract of Polygonum cuspidatum . MethodsUV spectrophotometry was adopted with a detection wavelength of 305 nm. ResultsThere was good linear relation ship with in the range of 3~16 μg (r=0.999 0). ConclusionThe method is simple,rapid,accurate.
Key words:Polygonum cuspidatum; Resveratrol; UV spectrophotometry
虎杖Polygonum cuspidatum Sied.et Zucc,又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲[1],其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用。主要用于关节麻痹、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的治疗[2]。现代药理研究表明其主要有效活性成分白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢等多种功能。目前定量检测白藜芦醇的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[3]、气相色谱/质谱法(GC/MS)[4]以及气相色谱法(GC)[5]等。国内还未见有关用紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇含量的报道。本实验应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Gold S54 紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司);AB204-N电子天平(Mettler-Toledo设备有限公司);FC-160型锤式粉碎机(上海中药机械厂制造)。
1.2 试剂
虎杖药材购自江西省药材公司(产地江西樟树),经江西医学院冯江教授鉴定为正品虎杖,白藜芦醇对照品由中国药品生物制品检验所提供,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.4 mg,于50 ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得到0.108 mg·ml-1的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备准确称量细块状虎杖10.0 g,加10倍量的水,在沸腾状态下提取180 min,提取1次,冷却后将提取液过滤,滤液定容至一定体积,即为供试样品液。精密称取一定量试液于50 ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2.3 测定波长的选择将白藜芦醇对照品和供试品溶液按实验方法操作,在 200~ 500 nm 进行波长扫描。结果表明,对照品和供试品溶液均在 305 nm 处有最大吸收,且两者光谱形状极为相似,满足分光光度法测定的基本要求。因此,选定305 nm 作为测定波长。
2.4 标准曲线的绘制分别精密吸取“2.1”项下对照品溶液0,0.3,0.6,0.9,1.2,1.5 ml各置于10 ml容量瓶中,以甲醇定容至刻度,摇匀,即得浓度分别为0,3.24,6.48,9.72,12.96,16.20 μg/ml的对照品溶液。以甲醇做参比,分别测定305 nm 吸光度,以吸光度(A) 对浓度(C) 进行线性回归,得回归方程A=0.134 27C + 0.048 59 (r=0.999 0)。结果表明,白藜芦醇检测浓度在3~16μg/ml 范围内与吸光度线性关系良好。见表1及图1。表1 白藜芦醇标准溶液的浓度与吸光度(略)
2.5 重复性实验 取同一批虎杖样品,精密称取4份,按“2.2”项下方法分别制备成4份供试品溶液。在305 nm下分别测定其吸光度并计算白藜芦醇的含量。结果(见表2)表明,4份提取液中白藜芦醇的平均含量为1.46%,RSD=2.41%(n=4)。表2 白藜芦醇含量测定结果(略)
2.6 回收率实验采用加样回收法,精密吸取已知含量为3.32 μg/ml虎杖提取液2 ml于25 ml容量瓶中,加入3.24 μg/ml对照品溶液2 ml,各4份,用甲醇稀释至刻度,摇匀,测定吸光度,计算回收率。结果得到平均回收率为98.8%,RSD为1.35%。
3 小结
本实验建立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的方法。实验表明,本法具有操作简单、速度快、准确度高的优点。其加样回收率和重复性均较好,可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的方法。
【参考文献】
[1]苏文强,杨 磊,朱明华,等.中压柱层析法分离白藜芦醇的研究[J].林产化学与工业,2004,24(1):40.
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[3]杨红美,陈 波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2006,31(3):202.
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[5]于 贞,张影陆,赵光鳌.葡萄酒中白藜芦醇的分析[J].工业微生物,2001,31(4):34.