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       【摘要】 
       目的研究HG颗粒对CCl4 （四氯化碳）复合因素致肝纤维化大鼠血清IL-1(白介素1)和IL-6(白介素6)含量的影响。方法70只SD大鼠，除空白对照组10只外，其余各组大鼠皮下注射CCl4，同时予高脂饲料和20%乙醇喂养6周建立肝纤维化大鼠模型，存活大鼠按性别和体重随机分为5组，再加上空白对照组，动物共计6组，分别给予药物或蒸馏水。空白对照组：蒸馏水0.1 ml/kg；模型对照组：蒸馏水0.1 ml/kg；HG颗粒高、中、低 3 种剂量组:6，3，1.5g生药/kg；复方鳖甲软肝片组:1g/kg，灌胃治疗，1次/d，连续4周。观察模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的变化。结果模型大鼠血清IL-1和IL-6含量均明显增高。HG颗粒3种剂量组治疗后均能降低模型大鼠血清IL-1和IL-6含量，复方鳖甲软肝片亦可降低大鼠血清IL-1和IL-6含量。结论HG颗粒对CCl4复合因素致肝纤维化大鼠有显著的治疗作用。
       【关键词】  HG颗粒 IL-1 IL-6
       Effects of HGKL on Serum IL-1 and IL-6 in HF Model Rats Induced by Carbon Tetrar-chloride Compounded with Other Factors
        
       BI Hongzheng, ZHANG Jintao, HUANG Guojun, XUE Jingli
       1.Basic Medical College of Zhengzhou University;
       2. Laboratory Animal Center of Zhengzhou University，Zhengzhou  450052 China;
       3. Pharmacy College of Chengdu University of TCM，Chengdu   610075  China
       Abstract：ObjectiveTo explore the effects of HGKL on serum IL-1 and IL-6 in HF model rats.MethodsSeventy SD rats excluding ten rats in blank control group were injected carbon tetrar-chloride（CCl4） hypodermicly,and were fed with high fat diet and 20% ethyl alcohol for six weeks to establish HF model rats. Existing rats were devided into five groups randomly basing on sex and weight.All rats were given drugs or distilled water.Blank control group: distilled water 0.1ml/kg；model control group: distilled water 0.1 ml/kg；HGKL high,middle,low groups：6,3,1.5g crude drug/kg；FFgBJRGP group:1 g/kg,once a day for four weeks.The contents of IL-1and IL-6 in serum were detected. ResultsThe contents of IL-1and IL-6 in model rats were significantly increased as compared with the blank group. After treatment with  HGKL high,middle,low dosages，the contents of IL-1 and IL-6 in model rats were decreased markedly，so did FFBJRGP.ConclusionHGKL has obvious effect on HF model rats induced by carbon tetrar-chloride compounded with other factors.
       Key words：HGKL；  IL-1；  IL-6
       肝纤维化(hepatic fibrosis)是各种慢性肝病进展中由于肝内纤维生成与降解失衡，导致过多的胶原在肝内沉积所致，常伴有炎症并可发展为肝硬化［1］。肝纤维化是慢性肝病重要的病理特征，也是肝硬化发生的前奏和必经中间环节。阻断肝纤维化的发生和发展，对防治肝硬化和慢性肝病具有重要意义［2，3］。美国著名肝病学家Hans Popper指出：“谁能阻止或延缓肝纤维化的发生，谁将治愈大多数慢性肝病”。HG颗粒是由丹参、桃仁等中药组成的复方制剂，此方来源于知名专家的多年临床经验总结，对肝纤维化有着良好的治疗效果。本实验旨在观察HG颗粒对CCl4复合因素所致肝纤维化大鼠血清IL-1和IL-6含量的影响，探讨其治疗机理，为其临床用药提供实验依据。
       1   材料与方法
       1.1  材料HG颗粒10g生药/袋，成都中医药大学中药制剂学教研室提供，批号：041014。复方鳖甲软肝片0.5 g/片，内蒙古福瑞中蒙药科技有限公司出品，批号：20030710。以上药物在临用时以蒸馏水配成相应浓度的溶液备用。
       健康SD大鼠 70只，普通级，雌雄各半，190～230 g，成都中医药大学实验动物中心提供，动物质量合格证号：川实动管质第11号。
       7530紫外可见分光光度计，Agilent公司产品。TG16-WS高速离心机，湖南赛特仪器厂产品。HANGPING FA1104电子天平，上海良平仪器仪表有限公司产品。HH-W21-600型电热恒温水浴锅，上海医用恒温设备厂产品。
       CCl4分析纯，徐州试剂厂产品，批号：00210201。橄榄油溶液，北京芳草医药公司产品，批号：010315。IL-1试剂盒，北京北雅免疫生物技术研究所产品，批号：040511。IL-6试剂盒，北京北雅免疫生物技术研究所产品，批号：040513。
       1.2  模型建立及分组70只SD大鼠，除空白对照组10只外，其余60只第1周（首次）用纯CCl45 ml/kg对大鼠背部皮下注射，第2～6周用40%CCl4-橄榄油3 ml/kg 对大鼠背部皮下注射，2次/周。同时第1～6周内，以高脂玉米粉饲料（79.5%玉米粉、20%猪油、0.5%胆固醇）饲喂大鼠，并以20%乙醇作为大鼠的唯一饮水。连续6周，复制大鼠肝纤维化模型［4～5］。将复制CCl4肝纤维化模型至第6周而存活的大鼠，按性别及体重随机分成5组，每组10只，加上空白对照组，共计6组。分别为：空白对照组：蒸馏水0.1 ml/kg；模型对照组:蒸馏水0.1 ml/kg； HG颗粒高、中、低3种剂量组：6，3，1.5g生药/kg；复方鳖甲软肝片组：1 g/kg，1次/d，连续4周。
       
       末次给药后24 h，从大鼠股动脉取血，分离血清，冷藏待测。用ELISA法测定血清IL-1，IL-6含量，具体步骤按照试剂盒说明书操作，通过标准品A值绘出标准曲线，然后算出各样品的值。
       1.3  统计学处理所有数据均采用统计软件SPSS13.0进行统计学处理，多组间比较用单因素方差分析，多组间比两两比较用q检验（SNK法）。各项指标均以±s表示。
       2  结果
       2.1  HG颗粒对CCl4复合因素致肝纤维化大鼠血清IL-1含量的影响由表1可知，造模6周后，模型组大鼠血清IL-1含量较空白组升高76.39%(P<0.01)。HG颗粒治疗4周后，3种剂量分别使纤维化大鼠血清IL-1含量降低32.56%，27.90%和20.93%(P均<0.01)。复方鳖甲软肝片亦使肝纤维化大鼠的血清IL-1含量降低30.23%(P<0.01)。表1  HG颗粒对CCl4复合因素致肝纤维化大鼠血清IL-1含量的影响 （略）
       2.2   HG颗粒对CCl4复合因素所致肝纤维化大鼠血清IL-6含量的影响由表2可知，造模6周后，模型组大鼠血清IL-6含量较空白组升高232.44%(P＜0.01)。 HG颗粒治疗4周后，3种剂量分别使纤维化大鼠血清IL-6含量降低33.98%，23.03%和14.71%(P均＜0.01)。复方鳖甲软肝片亦使肝纤维化大鼠血清IL-6含量降低22.69%(P＜0.01)。表2  HG颗粒对CCl4复合因素所致肝纤维化大鼠血清IL-6含量的影响（略）
       3   讨论
       中医药治疗肝纤维化有悠久的历史，肝纤维化属中医“胁痛”范畴，中药复方治疗是祖国医学的特点所在，复方的疗效往往优于单味药物。中医中药治疗肝纤维化，具有疗效显著，费用相对低廉，且毒副反应少的特点［6］。肝纤维化的病机关键是热毒瘀结，肝脾损伤［7］。
       HG颗粒由丹参、桃仁、白芍、柴胡、黄芪、汉防己、冬虫夏草等药物组成，丹参、桃仁活血养血，化瘀止痛为君；白芍、柴胡柔肝养肝为臣；佐以黄芪益气健脾，冬虫夏草益精补肾，汉防己行水消肿，清利湿热。全方配伍，共奏活血化瘀，软坚散结，补养正气之效。与复方鳖甲软肝片相比，HG颗粒减少了化积通络的药物如鳖甲、莪术、赤芍等，减少了补益药物紫河车、党参等，增加了柔肝养肝止痛的白芍、柴胡。如此组方，是因为肝纤维化属于肝硬化起始阶段，正气不甚虚弱，瘀结不甚顽固。故药味有别于治疗肝硬化疗效良好的复方鳖甲软肝片。
       药物性肝纤维化是指具有肝毒性的药物，进入体内使肝细胞变性，坏死，从而启动肝纤维化的发生发展。CCl4诱导的大鼠肝纤维化动物模型在形态学、病理生理学的某些方面与人的肝纤维化十分相似。但单一因素注射CCl4造模虽然操作简单，但制备的周期长，成模比例低，且死亡率较高，因此，我们采用CCl4、高脂食物、酒精复合因素制作肝纤维化模型，此种模型可靠且复制时间短，形成率高，死亡率低，肝纤维化进展稳定，适合于以肝细胞损伤为始动机制的肝纤维化发生发展过程的动态研究［8］。
       IL-1作为重要的促炎因子，主要是由局部浸润的单核细胞和淋巴细胞所释放。它可通过与其他促炎症因子的共同作用来促进花生四烯酸代谢产物、缓激肽和组织胺等血管活性物质的产生，并相互作用形成许多正反馈环进一步加重炎症损伤，造成肝细胞的大量坏死，从而促进成纤维细胞和Ito细胞的增殖，使胶原蛋白合成增加，导致细胞外基质（ECM）的产生增加［9］。IL-6主要由T细胞、B细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、系膜细胞等合成分泌。它主要诱导肝细胞急性期反应蛋白的合成，介导肝细胞损伤，促进免疫反应，促进贮脂细胞的增殖和胶原的合成［10～11］ 。肝病患者血清中IL-1和IL-6含量高低能较好地反映肝组织的炎症和肝细胞的损害程度［12］。本实验结果表明：HG颗粒能显著降低CCl4肝纤维化模型大鼠血清IL-1和IL-6含量，说明HG颗粒对CCl4复合因素致肝纤维化大鼠有显著的治疗作用。
       【参考文献】
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