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       【摘要】 
       目的建立小叶榕中牡荆素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为迪马TC- C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)，流动相为乙腈－1%醋酸（14∶86），流速1.0 ml/min，柱温为25℃，检测波长340 nm。结果牡荆素在0.082 4~0.82 4 μg范围内呈良好的线性关系，r=0.999 7；平均回收率为100.39%，RSD为2.20%。结论该方法简单、灵敏度高，可用于小叶榕中牡荆素的含量测定。
       【关键词】  小叶榕 牡荆素 高效液相色谱
       Content Determination of Viterxin in Xiaoyerong  by HPLC
       CHEN Hua
       （People′s Worker"s Hospital of Xingyi in Guizhou，Xingyi，Guizhou 562400，China）
       Abstract：Objective：To establish an HPLC method for the determination of Viterxin in Xiaoyerong. MethodsLUNA ODS C18 BDS （250 mm×4.6 mm，5 μm）was used with acetonitrile -1%Acetic Acid （14∶86）as mobile phase.The flow rate was 1.0 ml·min-1.The detection wavelength was 340 nm. ResultsThe linear range of Viterxin was 0.082 4~0.824 μg，r=0.999 7. The average recovery was 100.39%，RSD was 2.20%.ConclusionThe method is simple，rapid and accurate.
       Key words：Xiaoyerong；  Viterxin；  HPLC
       
       小叶榕Xiaoyerong为桑科植物榕树Ficus microcarpa L.f.的干燥叶，又名：细叶椿、细叶榕、垂叶榕，属桑科椿属常绿大乔木，高20~25 m，生气根［1~2］。全年可采收，斩取叶和幼枝，除去树枝，取净叶片，晒干。小叶榕多生长于村边或山林中，分布于我国的广西、广东、福建、台湾、浙江南部、云南、贵州等地，印度、缅甸、马来西亚等国也有分布。
       
       小叶榕既可作风景树、行道树，又具有药用价值。其树皮纤维可制鱼网和人造棉，茎、皮、果、叶、胶汁等均可入药，具有祛风清热、活血解毒、散淤利湿等功效。民间多用于治疗关节风湿痛、跌打损伤、小便不通、风火牙痛、急性痢疾及肠炎、疥癣、痔疮等病症。其叶、皮、果等提取的浸膏是治疗止咳、感冒类中成药的主要原料。
       
       小叶榕中的主要有效成分是黄酮类化合物，具有止咳祛痰、抗菌消炎的作用。小叶榕药用部位中黄酮类化合物的种类很多，其中以牡荆素的含量较高，并且生理活性较强，具有抗病毒、抗甲状腺肿和抑制肿瘤细胞生长等作用。因此以牡荆素作为测定指标，有利于评价小叶榕药用部位的质量。
       
       采用高效液相色谱法测定小叶榕中牡荆素的研究尚未见报道。现报道如下。
       1  器材
          
       LC-2010AH型高效液相色谱仪(日本岛津)；HS10260D型超声波清洗器(f超声工作频率40 kHz、天津市恒奥科技发展有限公司)；AUW120D型电子天平(日本岛津)。 醋酸(AR)；乙腈(色谱纯)；娃哈哈纯净水；牡荆素(Viterxin)对照品（中国药品生物制品检定所，No.111687，供含量测定用）；新鲜小叶榕采自贵州省兴义市沧江乡。
       2  方法与结果
       2.1  含量测定方法
       2.1.1  色谱条件 色谱柱为迪马TC- C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相为乙腈－1％醋酸（14∶86）；流速1 ml/min；柱温25℃；检测波长340 nm；进样量为20 μl；牡荆素对照品浓度为0.0824 mg/ml；在此条件下，色谱图如图1，牡荆素保留时间为30.417 min，理论板数31 141。
       图1  牡荆素对照品色谱图（略）
       2.1.2  对照品溶液的制备 精密称取牡荆素对照品适量，加甲醇制成每毫升含0.082 4 mg的溶液，即得。
       2.1.3  供试品溶液的制备 取小叶榕药材粉末(过40目筛) 2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加30％乙醇25 ml，密塞，称定重量，超声波振荡60 min，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
       2.1.4  测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μl，注入液相色谱仪，测定即得。小叶榕药材色谱图见图2。供试品中牡荆素保留时间为30.487 min， 理论塔板数36 241。
       2.2  测定方法学研究
       2.2.1  检测波长的确定 取对照品溶液测定其紫外光谱。牡荆素在340 nm处有最大吸收，所以检测波长选定为340 nm。
       图2  小叶榕药材色谱图（略）
       2.2.2  线性关系考察 精密吸取对照品溶液（0.082 4 mg/ml）1，2，4，6，8，10 μl，按上述色谱条件注入液相色谱仪，记录峰面积，以峰面积(A)为纵坐标，以牡荆素进样质量（B）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：A＝14.801+1 135.9B，r＝0.999 7。表明牡荆素在0.082 4～0. 824 μg范围内峰面积呈良好的线性关系。
       2.2.3  精密度实验 精密吸取小叶榕药材供试品溶液20 μl，连续进样5次，测得峰面积平均值为388.101 2， RSD为1.42%，表明测定的精密度良好。
       2.2.4  稳定性实验 取同一供试品溶液分别于1，2，4，8，12，24 h依法测定。结果见表1。峰面积平均值为382.954。RSD＝2.11％。表明供试品在8 h内稳定性良好。
       表1  牡荆素含量测定稳定性实验结果（略）
       2.2.5  重复性实验 精密称取同一小叶榕药材粉末5份，按照上述方法制备供试品溶液，测定并计算牡荆素含量（见表2）。药材中牡荆素含量测定的RSD为3.38％，说明本方法的重复性好。
       2.2.6  回收率实验 采用加样法进行回收率实验。精密称取1.0 g 小叶榕药材粉末（含量0.021%）5份，分别精密加入牡荆素对照品储备液（0.082 4 mg/ml）2.5 ml，按照上述方法制备供试液并测定。依照以下公式计算回收率：回收率（%）＝（测得量－药材含量）/对照品加入量×100%。结果表明5个加入量的回收率都较高，平均达到100.39%，RSD为2.20%。结果见表3。
       表2  牡荆素含量测定重复性实验结果（略）
       表3  牡荆素含量测定回收率实验结果（略）
       2.3  药材测定结果 按照上述方法测定10批小叶榕药材的牡荆素含量。结果见表4。
       表4  小叶榕药材牡荆素含量测定结果（略）
       从表4测定结果中可以看出，10批小叶榕药材样品中牡荆素含量最高为0.041%，最低为0.016%，小叶榕药材牡荆素的含量均在0.010％以上。据此研究结果制订小叶榕中牡荆素含量标准为：本品按干燥品计算牡荆素含量不得低于0.010％。 
       3  讨论
          
       目前，对小叶榕化学成分的研究文献报道的很少。本实验研究从小叶榕中提取出牡荆素，通过实验表明牡荆素为小叶榕中可控成分之一，故将其作为药材中的指标性成分进行含量测定，可有效地控制小叶榕的质量。
       【参考文献】
         　　［1］ 张秀实，吴钲益，曹子余. 中国植物志［M］. 北京：科学出版社，1998：112.
       
       ［2］ 中国科学院昆明植物研究所.云南植物志［M］. 北京：科学出版社，1995：597.