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       【摘要】 
       目的分析中药何首乌中总黄酮与微量元素Mg，Fe，Mn，Cu，Zn的含量。方法紫外分光光度法测定何首乌中总黄酮的含量；原子吸收分光光度法测定Mg，Fe，Mn，Cu，Zn的含量。结果总黄酮的含量27.44 mg/g ；Mg：952.480 1±10.554 3 μg/g；Fe：7 196.725 6±98.810 1 μg/g；Mn：431.092 9±5.569 8 μg/g；Cu：5.543 8±0.151 3 μg/g；Zn：86.791 5±6.478 1 μg/g 。结论实验结果为探讨中药何首乌中黄酮类化合物与微量元素的关系及研究何首乌中微量元素与药物的功效关系提供了有用的方法和依据。
       【关键词】  何首乌 总黄酮 微量元素
       Analysis of Flavone and Mg，Fe，Mn，Cu and Zn in Shouwu and it"s Mechanism of Medicines
       DONG Dong, DONG Shunfu*, HAN Liqin, ZHAO Wenxiu, LIU Jianhua
       （Jilin Medical College，Jilin City 132013,China）
       
       Abstract：ObjectiveTo analyze the contents of flavone and trace elements in Shouwu of Chinese tradition medicine.MethodsThe content of flavone in Shouwu was determined  by ultraviolet spectrophomometry. The wntents of  trace elements including magnesium, iron, manganese ,copper and zinc were determined by flame atomic absorption spectrophotometry.ResultsThe results showed that the content of flavone 27.44 mg/g flawne the content of magnesium was 952.480 1±10.554 3 μg/g, the content of iron was 7 196.725 6±98.810 1 μg/g,the content of manganese was 431.092 9±5.569 8 μg/g ,the content of copper was 5.543 8±0.151 3 μg/g and the content of zinc was 86.791 5±6.478 1 μg/g . ConclusionIt provided useful data for discussing the relationship between the content of foawne and the trace elements in Herb of Shouwu and for studying the relationship between the trace element and its mechanism of medicines.
       Key words：Shouwu；  Flavone；  Trace element
       
       现代研究表明，微量元素和总黄酮与人体的生物功能具有密切的关系，为研究中药何首乌中微量元素和总黄酮的分析方法及其含量与药物功效的关系，本文采用紫外分光光度法测定了何首乌中总黄酮的含量，用原子吸收分光光度法测定了Mg，Fe，Mn，Cu，Zn 5种矿物元素的含量，对微量元素和总黄酮与药物药效机理进行了系统的分析研究。
       1  器材
       1.1   材料和试剂何首乌，市售，产地四川。HNO3，HClO4均为优级纯。标准储备液，Mg，Fe，Cu，Zn均为国家标准溶液（NCS），浓度为1 mg·ml-1，国家钢铁材料测试中心。Mn储备液浓度为0.5 mg·ml-1，中国环境检测总站。使用液浓度：Mg为100 μg·ml-1；Fe，Cu，Zn均为50 μg·ml-1；Mn为20 μg·ml-1 。去离子高纯水，R>106 Ω。
       1.2   仪器及工作条件HC-9006型原子吸收分光光度计，附80586计算机及FAAS软件处理系统； 原子吸收分光光度计仪器工作条件见表1。
       表1  原子吸收分光光度计仪器工作条件（略）
       1.3   样品处理随机取干燥样品100g，研碎，充分混匀，准确称取1.000 0 g，平行称取3份，于25 ml锥形瓶中，加浓HNO310 ml，密封过夜，次日加浓HNO310 ml，HClO45 ml，置电热板上缓慢加热消化，至溶液呈无色透明，近干为止。冷却后，转移至25 ml容量瓶中，用4%HNO3定容至刻度，混匀备用。
       2  方法与结果
       2.1  微量元素含量测定
       2.1.1  标准溶液各元素标准系列工作液如下：
       
       Mg：0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00 μg·ml-1；
       
       Fe：0.00，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00 μg·ml-1；
       
       Cu：0.00，0.10，0.20，0.30，0.04，0.50 μg·ml-1；
       
       Zn：0.00，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00 μg·ml-1；
       
       Mn：0.00，0.10，0.20，0.40，0.80，1.60 μg·ml-1；
       
       按仪器最佳工作条件分别测定各标准系列工作液。由计算机绘出标准曲线，算出回归方程和相关系数。在本工作范围内，各元素线性关系良好。
       
       表2显示各元素回归方程和相关系数。
       表2  各元素回归方程和相关系数（略）
       2.1.2  样品含量测定按表1所列仪器最佳工作条件，用火焰原子分光光度法吸收法测定样品溶液中Cu，Zn，Mn的含量，测定Mg，Fe时需将样品稀释10倍后再行测定。Mg的测定加10%的La(NO3)3抗干扰。
       
       何首乌中Mg，Fe，Mn，Cu，Zn元素含量测定结果见表3。
       表3  样品 Mg，Fe，Mn，Cu ，Zn 元素含量测定结果（略）
       2.2  总黄酮的测定
       2.2.1  乙醇提取何首乌中总黄酮准确称取中药何首乌10.0 g于索氏提取器中，120 ml乙醚回流4 h，至无色，换成70%乙醇提取10 h，过滤，减压浓缩至20 ml左右，等体积石油醚萃取，用70%乙醇定容至100 ml，在200~400 nm波长范围内紫外扫描，最大吸收波长为306.00 nm。
       2.2.2  标准曲线绘制准确称取干燥至恒重的芦丁标准品（F20060930，国药集团化学试剂有限公司）0.076 0 g，用30%乙醇溶解后，转移至250 ml容量瓶中，30%乙醇定容，摇匀备用。溶液浓度为0.3040 mg·ml-1。准确转移上述芦丁溶液 0.00，0.40，0.80，1.20，1.60，2.00 ml于25 ml锥形瓶中，加30%乙醇至12.5 ml，加入0.8 ml 5%NaNO2溶液，放置5 min，加0.8 ml 5%Al(NO3)3溶液，放置6 min，加5 ml 4%NaOH溶液，30%乙醇稀释至刻线，放置10 min，紫外分光光度计于510 nm处测定吸收度，绘制标准曲线。回归方程：A=9.250C+0.001，r = 1.000。
       2.2.3  首乌中总黄酮的测定准确量取提取液0.50 ml于25 ml容量瓶中，加30%乙醇至12.5 ml，加入0.8 ml 5%NaNO2溶液，放置5 min，加0.8 ml 5%Al(NO3)3溶液，放置6 min，加5ml4%NaOH溶液，30%乙醇稀释至刻线，放置10 min，于510 nm处测定吸收度A = 0.507。总黄酮含量为27.44 mg/g。
       3  讨论
          
       研究表明何首乌具有补肝肾，益精血的功效，长期服用可以起到治疗肝肾阴虚血少、眩晕、失眠的作用。黄酮类化合物是中草药中重要的天然产物，是中草药中的有效成分，天然来源的生物黄酮能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障进入脂肪组织，消除疲劳、保护血管、防止动脉硬化。能使SOD活性加快，提高机体抗氧化能力及对NO的降解，明显扩张微细血管，降低血管阻力，增加脑血流量，改善微循环、清除自由基的作用［1］。
       
       微量元素作为药物中有机成分的中心原子，有利于药物有效成分的合成和作用，微量元素的研究有助于研究中草药的生长规律、药物的功效和中药的质量控制。临床微量元素学研究证明，镁具有光谱抗心率失常作用，对急性缺血缺氧引起的严重室性快速心律失常有明显的效果。锰参与人体氧化还原、磷酸化过程，是碱性磷酸酶等多种酶的激活剂，可以改善动脉硬化患者的脂类代谢，是超氧化物歧化酶（SOD）的重要组成部分，在清除超氧化物，增强机体免疫功能方面具有重要的影响，可以有效清除体内自由基，具有传导信息、调控脑、中枢神经、保护细胞膜的结构与功能［2］。铜是血红蛋白的活化剂，体内铜缺乏会引起心肌细胞氧化代谢紊乱，诱发动脉硬化，铜元素可以防止动脉壁的弹力纤维胶原降解，保护血管壁内膜的完整性，阻止动脉粥样硬化的发生和发展。中药中的黄酮类化合物与金属离子可以相互作用，黄酮与金属铁、锰、铜相互协同作用可以有效去除体内游离基。有实验研究表明，芦丁铜对实验产生的O2-·自由基具有较好的清除作用，且清除活性大于芦丁的作用［3］。本实验采用原子吸收分光光度法测定了Mg，Fe，Mn，Cu，Zn的含量，结果表明，本方法准确快速，灵敏度高，精密度好，对于测定药用植物中的微量元素含量，是一种有效的分析方法。
       
       提取总黄酮溶剂可采用不同浓度的甲醇、乙醇，实验表明，醇提取效果较水提取效果好。本实验用乙醚回流，去除药品中脂溶性色素，选用70%乙醇作溶剂，可以有效提取药物中黄酮类化合物，用石油醚进一步萃取后，除去溶于乙醇中的杂质，避免和减少多种水溶性成分的析出。在显色反应中，碱性条件下，黄酮与铝离子形成稳定的配合物，设定扫描范围400~600 nm，确定总黄酮的波长为510 nm，测定结果准确可靠。
       【参考文献】
         　　［1］ 王姝梅. 天然黄酮类化合物的抗氧化作用及构效关系［J］.海峡药学,2004,16（3）:10.
       
       ［2］ 孙晓莉,刘 灿,董顺福. 芦荟茶及其茶水中常量和微量元素的测定分析［J］.微量元素与健康研究,2003,20（2）：232.
       
       ［3］ 保志娟,方云山,丁中涛,等,分光光度法研究芦丁-铜配合物及其自由基清除活性［J］.光谱实验室,2005,22（2）:253.